重组羧肽酶B(RCPB)
◆概述
羧肽酶B(E.C 3.4.17.2)属金属羧肽酶A和羧肽酶B(CPA/CPB)家族,可选择性水解蛋白或多肽羧基端的Arg和Lys。不同于切割芳香族或脂肪类氨基酸残基的羧肽酶A,羧肽酶B优先切割碱性氨基酸※,同时也能切割一些非碱性氨基酸。重组CPB的活性受到典型的金属螯合剂如EDTA,及Cu2+,Hg2+抑制;而Zn2+,Mn2+等金属离子则能够不同程度提高酶活。CPB的最适pH为8.0,偏酸或偏碱均会造成活性下降,pH接近5.0时活性接近零,pH>12.0时活性完全丧失。CPB在一定温度内(<60 ℃)活性随温度升高而上升。
※碱性氨基酸:水解生成的氢氧根负离子多于氢正离子的氨基酸,其特点是侧链常含有可质子化的碱性化学基团。包括以下三种:
中文名 | 英文名 | 缩写 | 符号 | 等电点 |
精氨酸 | Arginine | Arg | R | 10.76 |
赖氨酸 | Lysine | Lys | K | 9.74 |
组氨酸 | Histidine | His | H | 7.59 |
◆优势
● 单批次产量大,批间差小
● 高纯度,高比活性
● 无外源性病毒污染,无动物源生产原料
◆应用范围
生产工艺:重组胰岛素及其类似物的生产制备工艺,重组多肽类药物的生产制备工艺等。
质控与科研:单克隆抗体的质量检测,蛋白质C-末端氨基酸测定等。
◆纯度
SDS-PAGE显示纯度>90%。
◆使用方法
保存:25 mmol/L Tris-HCl, pH 7.6或无菌水;溶解后分装-15 ℃以下保存。
酶切体系:pH 7.5~9.0;
推荐使用量:蛋白酶:融合蛋白质量比1:50~1:1000
◆保存条件
储存稳定性:冻干粉存于-15 ℃以下,24个月稳定;25 mmol/L Tris-HCl,pH 7.6溶解后分装储存于-15 ℃以下,反复冻融5次,活性无损失;
溶解后2~8 ℃保存建议不超过3 d。
运输稳定性:冰袋保温运输,活性稳定。
◆应用实例
RCPB特异性酶切合成短肽
合成多肽序列YGKRLWK,理论酶切位点酶切产物YGKRLW及K,蛋白酶:合成多肽质量比1:5000,37 ℃酶切反应10 min,LC-MS验证酶切反应特异性。
Peak# | R.T. | M.W. | Sequence |
Peak 1 | 7.06 min | 950.15 | YGKRLWK |
Peak 2 | 8.27 min | 821.98 | YGKRLW |
◆产品信息
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 比活 |
RCPB | 10 mg | 150 U/mg | |
RCPB | 10 μg | 150 U/mg |
◆相关产品
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 储存条件 | 其他信息 |
RCPB ELISA Kit | 96 孔 | 2~8 ℃ | 检测范围: |
※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。
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