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StemSure® hPSC培养基△
人ES/iPS细胞 无饲养层无血清培养基

人ES/iPS细胞 无饲养层无血清培养基wako

StemSure® hPSC培养基△



  本产品是一款可在无饲养层条件下维持培养人多能干细胞(人ES细胞和人iPS细胞)的无血清培养基。由于原材料中不含动物来源成分,以及BSA和HSA等白蛋白,所以无批间差异,可实现稳定培养。但本产品不含bFGF(碱性成纤维细胞生长因子)。


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◆ 特点


● 可在无饲养层条件下培养人ES细胞以及人iPS细胞的无血清培养基

● 每批次都使用人iPS细胞201B7株进行质量检测

● 不使用动物来源成分

● 非药用毒物及剧毒物,易于处理和储存。

● 不含白蛋白的低蛋白培养基

● 可与Matrigel® 、iMatrix-511、Vitronectin等多种涂层剂联用

● 可与Accutase,TrypLE Select等解离液联用

● 传代时可通过添加Y-27632实现使用单细胞传代



◆测试项目


● 细胞增殖测试(使用人iPS细胞201B7株)

● 碱性磷酸酶染色(使用人iPS细胞201B7株)

● 无菌测试

● pH

● 渗透压

● 内毒素

● 支原体测试



◆使用注意事项


  本产品不含bFGF(碱性成纤维细胞生长因子)。

  本产品需冷冻(-20℃)储存。溶解后不可再次冷冻,建议在2~10℃条件下进行储存,并在1周内使用完毕。



◆人iPS细胞201B7株的培养


将使用A公司培养基(含BSA、无饲养层用)培养的人iPS细胞201B7株移植至StemSure® hPSC培养基Δ,进行传代培养。以下为传代培养时的细胞形态、细胞群倍加数和未分化性能维持检测的结果。



细胞形态


在StemSure® hPSC培养基Δ培养的人iPS细胞的细胞形态与A公司培养基培养的几乎相同,也没有观察到趋向分化的形态,可实现稳定培养。


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细胞群倍


移植到StemSure® hPSC培养基Δ后,立即进行第1~5次传代。结果显示,StemSure® hPSC培养基Δ培养的细胞增殖情况更为良好。


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<培养基组成>

StemSure® hPSC培养基Δ + 35 ng/mL bFGF


<细胞接种数>

1×105 cells/well (使用6孔板)



未分化性能维持的确认


  使用StemSure® hPSC培养基进行5次传代维持培养,确认到全部未分化标志物(Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN)的表达。

  ※BC2LCN是一种对存在于人ES细胞/人iPS细胞膜表面的糖链具有高亲和性的重组凝集素。


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<数据提供 独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工程研究中心 小沼泰子老师、伊藤弓弦老师>



◆人ES细胞WA01株的培养


将使用A公司培养基(含BSA、无饲养层用)培养的人ES细胞WA01株移至StemSure® hPSC培养基Δ,进行传代培养。以下为传代培养时的细胞形态、细胞群倍加数和未分化性能维持检测的结果。


细胞形态


使用A公司培养基进行培养时,在2次传代以后开始出现趋向分化形态的细胞。但使用StemSure® hPSC培养基Δ培养的人ES细胞没有观察到趋向分化的形态,可实现稳定培养。


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细胞群倍


移植到StemSure® hPSC培养基Δ后,立即进行第1~5次传代。结果显示,与A公司培养基相比,细胞的增殖能力没有差异。


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<培养基组成>

StemSure® hPSC培养基Δ + 35 ng/mbFGF


<细胞接种数>

1×105 cells/well (使用6孔板)



未分化维持的确认


使用StemSure® hPSC培养基Δ进行6次传代维持培养,确认到全部未分化标志物(Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN)的表达。


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<数据提供 独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工程研究中心 小沼 泰子 老师、伊藤 弓弦 老师>



◆染色体核型分析


核型分析使用StemSure® hPSC培养基Δ进行27次传代培养的人iPS细胞,确认是否存在染色体异常。


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<数据提供 独立行政法人国立成育医疗研究中心研究所 再生医疗中心 三浦老师、阿久津英憲老师



◆人iPS细胞201B7的三胚层分化


使用StemSure®系列的培养基驯化培养了使用StemSure® hPSC培养基Δ培养的人iPS细胞201B7株。胚状体形成后,通过检测βⅢ-Tubulin、α-SMA、AFP的表达确认三胚层分化。


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<培养基组成>


StemSure® D-MEM + StemSure® Serum

Replacement + 2 mmol/l L-Glutamine +

0.1 mmol/l StemSure® 2-Mercaptoetanol + 1 

x Non-essential Amino Acids Solution 



◆产品列表


产品编号

产品名称

产品规格

197-17571

StemSure(R) hPSC Medium Δ

100 mL

193-17573

100 mL × 4



碱性成纤维细胞生长因子Y-27632


产品编号

产品名称

产品规格

060-05383

Fibroblast growth Factor (basic) (FGF-basic/bFGF/FGF2), Human,

recombinant, Animal-derived-free(154aa)

成纤维细胞生长因子(碱性),人,重组,无动物衍生物

1 mg

064-05381

50 μg

068-05384

100 μg

030-24021

CultureSure™ Y-27632 

CultureSure™ Y-27632(选择性ROCK抑制剂)

1 mg

036-24023

5 mg

034-24024

25 mg

030-24026

100 mg

259-00613

Y-27632, MF
选择性强效ROCK抑制剂

5 mg

257-00614

25 mg

035-24593

CultureSure™ 10mmol/L Y-27632 Solution, Animal-derived-free 

CultureSure™ 10 mmol/l Y-27632溶液,无动物源

1 mL

039-24591

300 μL



StemSure® 系列


产品编号

产品名称

产品规格

197-16275

StemSure(R) D-MEM(High glucose) with Phenol Red and Sodium Pyruvate
StemSure D-MEM(高糖)含酚红和丙酮酸钠

500 mL

191-18375

StemSure(R) Serum Replacement (SSR)
Stemsure®血清替代品

500 mL

198-15781

StemSureR 10mmol/L 2-Mercaptoethanol Solution (×100)
StemSure 10 mmol/L 2-巯基乙醇

100 mL

195-15791

StemSure(R) 50mmol/L Monothioglycerol Solution(×100)
StemSure 50 mmol/L 硫代甘油

100 mL

190-15805

StemSure(R) 0.1w/v% gelatin Solution
StemSure 0.1w/v% 明胶溶液

500 mL

199-16051

StemSureR LIF, Mouse, recombinant, Solution
    StemSureR 白细胞抑制因子溶液,小鼠,重组

1000000 units

195-16031

StemSure(R) Freezing Medium
    StemSure 细胞冻存液

100 mL



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