StemSure® hPSC 培养基Δ
人多能性干细胞无血清培养基
本产品是无饲养层条件下用于维持培养人ES细胞·iPS细胞的无血清,无动物源性成分的液体培养基。不含BSA及HAS等蛋白,批次间的差别较少,结果稳定。但是,本产品不含bFGF(碱性線成纤维细胞成长因子)。
◆特点
● 无血清、无饲养层培养人 ES· iPS 细胞
● 使用人 iPS 细胞 201B7 细胞系,进行每批次的质量检测
● 不含动物源成分
● 不属于医药用外毒物或剧毒物,保存及处理简单
● 不含蛋白的低蛋白培养基
● 可使用 Matrigel® 、iMatrix-511、Vitronectin 等培养基质
● 可使用 Accutase, TrypLE Select 等解离液
● 传代培养时添加 Y-27632 可传代培养单细胞
◆检测项目
● 细胞繁殖能力测试(使用人iPS细胞201B7细胞系)
● 碱性磷酸酶染色(使用人iPS细胞201B7细胞系)
● 无菌检测
● pH
● 渗透压
● 内毒素
● 支原体检测
◆使用注意
● 本产品不含bFGF(碱性成纤维细胞成长因子)。
● 本产品需冷藏(-20℃)。溶解后无需再冷冻,请保存于2~10℃,并在1周内使用完毕。
◆人iPS细胞201B7细胞系
将使用A公司培养基(含有 BSA、使用动物源成分)培养的人iPS细胞201B7细胞系移植到 StemSure® hPSC培养基Δ,进行传代培养。下图为传代移植培养时的细胞形态及细胞集団倍增数、未分化性标记表达结果。
《 细胞形态 》
使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养的人iPS细胞的形态与A公司培养基的几乎相同,没有发生分化,稳定地进行了培养。
《 细胞群倍加数 》
对比移植到 StemSure® hPSC 培养基Δ后的第1代到第5代的细胞,使用 StemSure® hPSC 培养基Δ的细胞繁殖状况更好。
< 培养基成分 >
StemSure® hPSC 培养基Δ + 35 ng/ml bFGF
< 细胞播种数 >
1×105 cells/well(使用6孔培养板)
《 未分化性标记表达确认 》
使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养至5代,观察到全部的未分化标记物(Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN)。
※BC2LCN 是能与存在于人 ES ・iPS 细胞膜表面的糖链特异性结合的重组凝集素。
< 培养基成分 >
StemSure® hPSC 培养基Δ + 35 ng/ml bFGF
< 细胞播种数 >
1×105 cells/well(使用6孔培养板)
《 未分化性标记表达确认 》
使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养至5代,观察到全部的未分化标记物(Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN)。
※BC2LCN 是能与存在于人 ES ・iPS 细胞膜表面的糖链特异性结合的重组凝集素。
<数据提供 独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工学研究中心 小沼泰子老师、伊藤弓弦老师>
◆人ES细胞201B7细胞系
将使用A公司培养基(含有 BSA、使用动物源成分)培养的人ES细胞201B7细胞系移植到 StemSure® hPSC 培养基Δ,进行传代培养。下图为传代移植培养时的细胞形态及细胞集団倍增数、未分化性标记表达结果。
《 细胞形态 》
使用A公司培养基的细胞,细胞在第2代以后出现了分化。另一方面,使用 StemSure® hPSC 培养基Δ的细胞,没有发生分化,稳定地进行了培养。
《 细胞群倍增数 》
比较两者移植到 StemSure® hPSC 培养基Δ后的第1代到第5代,细胞的繁殖能力没有差异。
< 培养基成分 >
StemSure® hPSC培养基Δ + 35 ng/ml bFGF
< 细胞播种数 >
1×105 cells/well(使用6孔培养板)
《 未分化性维持確認 》
使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养至第6代,观察到全部的未分化标记物(Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN)。
※BC2LCN 是能与存在于人ES ・iPS细胞膜表面的糖链特异性结合的重组凝集素。
<数据提供 独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工学研究中心 小沼泰子老师、伊藤 弓弦老师>
核型解析
对使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养到第27代的人iPS细胞进行了核型解析,没有发现染色体异常。
<数据提供 独立行政法人国立成育医疗研究中心研究所 再生医疗中心 三浦巧老师、阿久津英憲老师>
人iPS细胞201B7分化成三胚层
使用 StemSure® hPSC 培养基Δ将人iPS细胞201B7细胞系培养至第3代,再使用 StemSure® 系列培养基进行驯化培养,可观察到 βⅢ-Tubulin、α-SMA、AFP,因此判断细胞形成胚体后,进行了三胚层分化。
< 培养基成分 >
StemSure® D-MEM + StemSure® Serum Replacement + 2 mmol/l L-Glutamine + 10 mmol/l StemSure® 2-Mercaptoetanol + 1 x Non-essential Amino Acids Solution
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
197-17571 | StemSure® hPSC MediumΔ | 100ml | 用于细胞培养 | |
193-17573 | StemSure® hPSC MediumΔ | 100ml×4 | 用于细胞培养 | |
064-05381 | Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant, Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 | 50μg | 用于细胞培养 | |
068-05384 | Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant, Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 | 100μg | 用于细胞培养 | |
060-05383 | Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant, Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 | 1mg | 用于细胞培养 | |
257-00511 | Y-27632 | 1mg | 用于细胞培养 | |
253-00513 | Y-27632 | 5mg | 用于细胞培养 | |
251-00514 | Y-27632 | 25mg | 用于细胞培养 | |
253-00591 | 5mmol/l Y-27632 Solution | 300μl | 用于细胞培养 | |
220-02041 | Vitronectin(20-398 aa), Human, recombinant,Solution | 500μg | 生物化学用 | |
197-16275 | StemSure® D-MEM(High Glucose)with Phenol Red and Sodium Pyruvate | 500ml | 用于细胞培养 | |
197-16775 | StemSure® Serum Replacement | 500ml | 用于细胞培养 | |
198-15781 | StemSure® 10mmol/l 2-Mercaptoethanol Solution (×100) | 100ml | 用于细胞培养 | |
195-15791 | StemSure® 50mmol/l Monothioglycerol Solution (×100) | 100ml | 用于细胞培养 | |
190-15805 | StemSure® 0.1w/v% Gelatin Solution | 500ml | 用于细胞培养 | |
199-16051 | StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution | 106units | 用于细胞培养 | |
195-16053 | StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution | 106units×10 | 用于细胞培养 | |
195-16031 | StemSure® Freezing Medium | 100ml | 用于细胞培养 |
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