本产品是Hot-Star PCR用的耐热型DNA聚合酶。进入PCR循环前先经过95℃，5分钟的热处理，对本产品进行酶活性化处理。
在PCR初期需要进行过量酶活抑制的热启动PCR，以抑制引导错误、无效酶失活。根据用途的不同，附有可分开使用的2种10倍浓度的反应缓冲液。
◆特点
● 高特异性和DNA高回收率
● 具有热启动功能，可在室温条件下配制反应液
● 适用于多路传输PCR
● 极少有宿主源DNA混入，纯度高
◆产品组成
Hot-Start Gene Taq | 250 units | 50 units |
dNTP 混合物 | 800 μL×１瓶 | 160 μL×１瓶 |
10×Gene Taq通用缓冲液 | 1 mL×１瓶 | 1 mL×１瓶 |
10×Brilliant Buffer | 1 mL×１瓶 | 200 μL×１瓶 |
◆产品信息
M.W. | 68 kDa |
活性 | 2.5 units/μL |
单位的定义 | 1 unit是指以活化小牛胸腺DNA为引物/模板，在74℃下，30分钟内，将10nmol的脱氧核苷酸渗入不溶酸沉淀物，使其酶活化。 |
形状 | 20 mmol/L Tris-HCl (pH8.0)、100 mmol/L KCl、0.1 mmol/L EDTA、0.5 % Tween 20、1 mmol/L DTT、50%甘油。 |
纯度 | 将10 units本酶和1μgλ/HindⅢ digest，在74℃下反应1小时，琼脂糖凝胶电泳显示样品条带不发生改变。 |
◆实验案例
以HeLa DNA（50ng）为模板，对下列三种扩增困难的引物进行Shuttle PCR。
【引物】
・A-1
F：5'-AGTGGGCAGAGCCAGTCACT-3'
R：5'-AGACTGGATGCCCAGCCTAA-3'
・A-2
F：5'-CAGACTCTGGGGCTGCCCAT-3'
R：5'-TCAAACACTGGCTTGGGGTA-3'
・A-3
F：5'-CCTTGGAGCAATGAGCAATG-3'
R：5'-CATCTTTCCAGGCTCCTTCC-3'
【实验方法】
模板DNA | 50 ng |
引物 (10 μM each) | 1 μL |
10×反应缓冲液 | 5 μL |
聚合酶 | 5 μL |
dNTP 混合物 | 0.2 mM |
聚合酶 | 0.25 U |
总量 | 50 μL |
PCR条件 | 95℃, 5 分钟 |
【结果】
在热启动Gene Taq使用Brilliant Buffer，即使低特异性的引物，也可实现高特异性扩增，使目的扩增产物取得高回收率。
◆产品信息
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
热启动基因Taq酶 Hot-Start Gene Taq | 50 units | |
250 units | ||
250 units×4 |
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