活细胞成像荧光染料Ageladine A


一种新颖的活细胞成像荧光染料,具有细胞渗透性、无毒及pH依赖性等特点。

 


◆产品特性


●  pH 范围广( pH 4-8 ),该荧光染料在紫外光激发下发出蓝绿色荧光,在酸性环境中荧光信号更强,碱性溶液中较难被检测;

●  无毒的高细胞渗透性染料,无酯类或酯酶,聚集于胞内酸性细胞器,与膜内侧有疏水作用;

●  几乎不会降解,表现出长期稳定性;

●  可以对酸性细胞器、囊泡、细胞、组织和小动物进行连续几天的无毒pH 监测。



Ageladine A(合成染料)


AG-CMA-1001-C200 200 μg

分子式:C12H8Br2F3N5O2 . C2HF3O2blob.png

分子量:357.0 . 114.0

CAS 号:643020-13-7

纯度:≥ 98%

激发光波长范围:325 - 415 nm

最佳波长:370 nm

发射光波长范围:415 - 500 nm 以上

最佳波长:415 nm




案例•应用


 通过荧光显微镜观测酸性细胞器(比如溶酶体、内涵体)和小型动物(比如扁形动物、刺细胞动物、不同动物的幼虫和卵)•筛选• 活力检测• 流式细胞术• 荧光寿命成像(FLIM)技术。Licensed from Alfred Wegener Institute (EP2156193A1;US8198098B2).


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成像参数

孵育时间:

培养细胞:10-30 分钟;小型动物( 比如幼虫和扁形动物):30-120 分钟;培养基中的血清和盐离子浓度对孵育时间没有任何影响,只需所有缓冲液的pH 达到7.5 即可。

光谱性质:

激发光波长范围:325 - 415 nm;最佳波长:370 nm

发射光波长范围:415 - 500 nm 以上;最佳波长:415 nm

  实验采用一般的滤光装置即可(比如FURA-2)。在pH 4-8 范围内,荧光强度与pH 呈线性负相关。可以通过比例量测法或荧光寿命成像技术得到定量实验结果。 会发生光漂白(Photobleaching),但是在常规实验低激发强度和曝光时间(即使好几天)的条件下对实验没什么影响。孵育好几天也不会发生泄露。使用浓度达到30 μM 时没有毒性效应。PC12 细胞的膜片钳实验结果表明,当浓度大于10 μM 时膜电位会发生轻微的改变。

推荐使用浓度:

  介于1 μM ( 细胞) - 30 μM ( 小型动物) 之间。



成像举例


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 PC12- 细胞用Ageladine A 染色的细胞成像图。

 

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Aiptasia sp. 不同部位的刺细胞Ageladine A 染色图:左图:枪丝部位;右图:触须部分。用共焦激光扫描显微镜进行观察,红色区域显示荧光(伪色彩)。



◆抗血管新生试剂

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Ageladine A 是一种独特的溴吡咯- 咪唑类生物碱,能够发出荧光。最初从海绵Agelas nakamurai 中分离得到。它表现出良好的体内外抗肿瘤血管活性,最初被认为与基质金属蛋白酶多种亚型的抑制有关,随后被证实其抗肿瘤血管活性是对激酶的选择性抑制造成的,包括酪氨酸- 磷酸化- 调节激酶(DYRK)1A、DYRK2、酪氨酸激酶2(TYK2) 和酵母Sps1/Ste20 相关激酶4(YSK4) 的双重特异性。它是一种高选择性的血管生成抑制剂,对一系列人肿瘤细胞系无毒性。

 





产品编号

产品名称

规格

 AG-CMA-1001-C200

Ageladine A . TFA

海洋生物碱. 三氟乙酸

200   ug




参考文献


  [1]  Ageladine A: An antigiogenetic matrix metalloproteinase inhibitor from themarine sponge Agelas nakamurai: M. Fujita, et al.; JACS 125, 1570 (2003)

  [2]  A one-pot synthesis and biological activity of ageladine A and analogues: S.R.Shengule, et al.; Med. Chem. 54, 2492 (2011)

  [3]  Marine-derived angiogenesis inhibitors for cancer therapy: Y.Q. Wang & Z.H. Miao; Mar. Drugs 11, 903 (2013)

  [4]  Ageladine A, a pyrrole-imidazole alkaloid from marinesponges, is a pH sensitive membrane permeable dye: U.Bickmeyer, et al.; BBRC 373, 419 (2008)

  [5]  Tracking of fast moving neuronal vesicles with ageladine A: U.Bickmeyer, et al.; BBRC 402, 489 (2010)

  [6]  The alkaloid Ageladine A, originally isolated from marinesponges, used for pH-sensitive imaging of transparent marineanimals: U. Bickmeyer; Mar. Drugs 10, 223 (2012)

  [7]  Incorporated nematocysts in Aeolidiella stephanieae(Gastropoda, Opisthobranchia, Aeolidoidea) mature byacidification shown by the pH sensitive fluorescing alkaloid  Ageladine A: D. Obermann, et al.; Toxicon 60, 1108 (2012)


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