【本活动已结束】
◆DYK标签：DYKDDDDK
DYK标签是识别DYKDDDDK肽链的单抗。可用于检测大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞中表达的DYKDDDDK标签融合蛋白。
将表达3×DYKDDDDK标签融合蛋白A的质粒转染至HEK293细胞中，经过24 h培养后，随机选取其中的克隆细胞。将选取的克隆细胞用RIPA缓冲液进行裂，对所得的细胞溶解液用Western blotting检测。
分别用Wako（克隆号 1E6）（产品编号：018-22381）抗体和A公司抗体进行Western Blot检测。
与A公司抗体相比，Wako（克隆号 1E6）抗体识别DYKDDDDK的特异性更高。
A公司产品和Wako产品在Western blotting检测中的灵敏度比较
Lane 1：293T细胞溶解液
Lane 2：瞬时表达蛋白A-DYKDDDDK的293T细胞溶解液
Lane 3：瞬时表达蛋白B-DYKDDDDK的293T細胞溶解液
封闭：含5% 脱脂奶的TBS-T、4℃，过夜
抗体反应：2 h、室温
发光剂：ImmunoStar® LD
检测：LAS-3000、曝光时间15 min
Wako 1E6-HRP比A公司产品有更高的灵敏度!!
◆PA标签系统 标签序列【GVAMPGAEDDVV】
● 超高亲和性抗体，实现高回收率、高纯度纯化
● 通过树脂再生，降低运行成本
● 在动物细胞表达系（HEK293T细胞、CHO细胞等）中，有效纯化蛋白
● PA标签系统是使用可识别肽标签（12个氨基酸残基）的单抗（NZ-1）。Wako开发了对应的亲和性纯化标签系统。
● NZ-1单抗对PA tag具有高亲和性和特异性，可应用于Western blotting、细胞流式分析、免疫组化（ICC）。
通过免疫沉淀，可纯化PA标签融合蛋白以及树脂再生。
● PA标签系统，可一步纯化高纯度PA标签融合蛋白。
使用案例：Western blotting
Lane 1
一抗：抗IDH1抗体（RcMab-1）, 1 μg/mL
二抗：抗大鼠IgG-HRP标签, 1000倍稀释
Lane 2
一抗：抗PA tag抗体, 1 μg/mL
二抗：抗大鼠IgG-HRP标签, 1000倍稀释
Lane 3
一抗：抗DYKDDDDK标签抗体, 3.5 μg/mL
二抗：抗小鼠IgG-HRP标签, 1000倍稀释
上样量：各10 μg
曝光时间：10 min
◆6×His标签：HHHHHH (6×His)
可用于检测His（6×His）标签融合蛋白。克隆号不同，识别端的特异性、应用也有所不同。
克隆号 | 识别端 | Western blotting | Immunoprecipitation | ELISA | 产品编号 | ||
N端 | C端 | N端 | C端 | ||||
9F2 | C端 | ND | +++++ | ND | ++ | - | 010-21861 |
21-48 | N端及C端 | +++ | ++++ | +++ | +++ | ○ | 017-23211 |
28-75 | N端及C端 | ++ | ++ | +++++ | +++++ | ○ | 014-23221 |
B公司产品和Wako产品各克隆号的Western blotting检测功能比较
N端His：HEK293T表达的6×His-Protein Z, 1×105 cells
C端His：Protein P-6×His＋CHO细胞溶解液, 1×105 cells
一抗：1 μg/mL
二抗：抗小鼠IgG抗体, 5000倍稀释液
可确认其具有比B公司产品同等甚至更高的灵敏度。
GFP tag： Green Fluorescent Protein (GFP)
可识别Green Fluorescent Protein（GFP）的抗体。GFP是可实时检测目标蛋白局部或细胞、细胞器中的标签蛋白，可应用于各个研究领域。
c-Myc标签：EQKLISEEDL
可识别人c-Myc 来源（410-419aa）多肽EQKLISEEDL单抗。
抗c-Myc, 单抗（017-21871）
抗体浓度：0.25 μg/mL
抗原量：对10 ng c-Myc标签重组蛋白进行电泳操作。
用10000倍稀释的抗小鼠IgG-HRP抗体进行检测。
GST标签：Glutathione-S-transferase
可识别Glutathione S-transferase（GST）单抗。
亲和性标签抗体结合琼脂糖珠
＜使用载体量＞
抗DYKDDDDK标签抗体琼脂糖珠（Wako）: 20 μL/assay
A社 Affinity Beads: 20 μL/assay
＜抗原添加量＞
含DYKDDDDK标签融合蛋白的大肠杆菌细胞裂解液20 mg/assay
＜免疫沉淀条件＞
4℃、3 h
＜洗脱方法＞
150 ug/mL DYKDDDDK肽 (产品编号：044-30951) 20 μL/assay
→ 4℃、孵化30 min
添加20 μL/assay 的2% SDS sample buffer → 煮沸5 min。
＜SDS-PAGE＞
样品电泳量：10 μL
＜检测方法＞
银染法
配制可过量表达DYKDDDDK标签融合蛋白（约19 kDa）的大肠杆菌裂解液，分别用本产品和A公司产品免疫沉淀后，用DYKDDDDK肽进行抗原洗脱。将得到的抗原样品用SDS-PAGE分离、银染色后，比较抗原回收率。
可确认比A公司产品具有同等甚至以上的抗原回收性能！！
◆产品列表
产品编号 | 产品名称 | 应用 | 子类 | 包装 |
高特异单抗 | ||||
Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9F2) | WB | 小鼠IgG1 | 20 μg | |
Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(28-75) | WB,IP | 小鼠IgG3･κ | 20 μL | |
Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(21-48) | WB、IP、ELISA | 小鼠IgG1･κ | 20 μg | |
Anti DYKDDDDK tag, Monoclonal AntibodyD | WB、IP、FCM、ChIP | 小鼠IgG2b | 20 μg | |
ANTI c-Myc, Monoclonal | WB、IP | 小鼠IgG1 | 20 μg | |
Anti Green Fluorescent Protein, Monoclonal Antibody (Anti GFP, MoAb) | IHC | 小鼠IgG2･κ | 20 μL | |
HRP标记单抗 | ||||
Anti c-Myc, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated | WB | 小鼠IgG1 | 10 μL | |
Anti DYKDDDDK tag, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated | WB | 小鼠IgG2b | 10 μL | |
Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9C11), Peroxidase Conjugated | WB | 小鼠IgG1 | 10 μL | |
Anti Glutathione S-transferase, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated | WB | 小鼠IgG2b | 20 μL | |
Anti PA tag, Rat Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated | WB | 大鼠IgG2a | 20 μL | |
抗体结合琼脂糖珠 | ||||
Anti DYKDDDDK tag Antibody Beads | IP | 小鼠IgG2b | 200 μL | |
Anti 6×Histidine Antibody Beads | IP | 小鼠IgG3･κ | 400 μL | |
Anti HA Antibody Beads | IP | 小鼠IgG1 | 200 μg | |
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