亲和标签抗体系列的试用装活动来啦!!

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◆DYK标签:DYKDDDDK


DYK标签是识别DYKDDDDK肽链的单抗。可用于检测大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞中表达的DYKDDDDK标签融合蛋白。


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将表达3×DYKDDDDK标签融合蛋白A的质粒转染至HEK293细胞中,经过24 h培养后,随机选取其中的克隆细胞。将选取的克隆细胞用RIPA缓冲液进行裂,对所得的细胞溶解液用Western blotting检测。

分别用Wako(克隆号 1E6)(产品编号:018-22381)抗体和A公司抗体进行Western Blot检测。

与A公司抗体相比,Wako(克隆号 1E6)抗体识别DYKDDDDK的特异性更高。





A公司产品和Wako产品在Western blotting检测中的灵敏度比较


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Lane 1:293T细胞溶解液

Lane 2:瞬时表达蛋白A-DYKDDDDK的293T细胞溶解液

Lane 3:瞬时表达蛋白B-DYKDDDDK的293T細胞溶解液

封闭:含5% 脱脂奶的TBS-T、4℃,过夜

抗体反应:2 h、室温

发光剂:ImmunoStar® LD

检测:LAS-3000、曝光时间15 min

Wako 1E6-HRP比A公司产品有更高的灵敏度!!



◆PA标签系统 标签序列【GVAMPGAEDDVV】

 

● 超高亲和性抗体,实现高回收率、高纯度纯化

● 通过树脂再生,降低运行成本

● 在动物细胞表达系(HEK293T细胞、CHO细胞等)中,有效纯化蛋白

● PA标签系统是使用可识别肽标签(12个氨基酸残基)的单抗(NZ-1)。Wako开发了对应的亲和性纯化标签系统。

● NZ-1单抗对PA tag具有高亲和性和特异性,可应用于Western blotting、细胞流式分析、免疫组化(ICC)。

   通过免疫沉淀,可纯化PA标签融合蛋白以及树脂再生。

● PA标签系统,可一步纯化高纯度PA标签融合蛋白。



使用案例:Western blotting


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Lane 1

一抗:抗IDH1抗体(RcMab-1), 1 μg/mL

二抗:抗大鼠IgG-HRP标签, 1000倍稀释

 

 Lane 2

一抗:抗PA tag抗体, 1 μg/mL

二抗:抗大鼠IgG-HRP标签, 1000倍稀释

 

Lane 3

一抗:抗DYKDDDDK标签抗体, 3.5 μg/mL

二抗:抗小鼠IgG-HRP标签, 1000倍稀释

 

上样量:各10 μg

曝光时间:10 min



◆6×His标签:HHHHHH (6×His)


可用于检测His(6×His)标签融合蛋白。克隆号不同,识别端的特异性、应用也有所不同。



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克隆号

识别端

Western blotting

Immunoprecipitation

ELISA

产品编号

N端

C端

N端

C端

9F2

C端

ND

+++++

ND

++

-

010-21861

21-48

N端及C端

+++

++++

+++

+++

017-23211

28-75

N端及C端

++

++

+++++

+++++

014-23221



B公司产品和Wako产品各克隆号的Western blotting检测功能比较


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N端His:HEK293T表达的6×His-Protein Z, 1×105 cells

C端His:Protein P-6×His+CHO细胞溶解液, 1×105 cells

一抗:1 μg/mL

二抗:抗小鼠IgG抗体, 5000倍稀释液

可确认其具有比B公司产品同等甚至更高的灵敏度。



GFP tag: Green Fluorescent Protein (GFP)


  可识别Green Fluorescent Protein(GFP)的抗体。GFP是可实时检测目标蛋白局部或细胞、细胞器中的标签蛋白,可应用于各个研究领域。

 


c-Myc标签:EQKLISEEDL


可识别人c-Myc 来源(410-419aa)多肽EQKLISEEDL单抗。


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抗c-Myc, 单抗(017-21871

抗体浓度:0.25 μg/mL

抗原量:对10 ng c-Myc标签重组蛋白进行电泳操作。

用10000倍稀释的抗小鼠IgG-HRP抗体进行检测。



GST标签:Glutathione-S-transferase


可识别Glutathione S-transferase(GST)单抗。

 

 

亲和性标签抗体结合琼脂糖珠


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<使用载体量>

抗DYKDDDDK标签抗体琼脂糖珠(Wako): 20 μL/assay

A社 Affinity Beads: 20 μL/assay


<抗原添加量>

含DYKDDDDK标签融合蛋白的大肠杆菌细胞裂解液20 mg/assay


<免疫沉淀条件>

4℃、3 h


<洗脱方法>

150 ug/mL DYKDDDDK肽 (产品编号:044-30951) 20 μL/assay

→ 4℃、孵化30 min

添加20 μL/assay 的2% SDS sample buffer → 煮沸5 min。


<SDS-PAGE>

样品电泳量:10 μL


<检测方法>

银染法

配制可过量表达DYKDDDDK标签融合蛋白(约19 kDa)的大肠杆菌裂解液,分别用本产品和A公司产品免疫沉淀后,用DYKDDDDK肽进行抗原洗脱。将得到的抗原样品用SDS-PAGE分离、银染色后,比较抗原回收率。


可确认比A公司产品具有同等甚至以上的抗原回收性能!!



◆产品列表


产品编号

产品名称

应用

子类
克隆号

包装
(试用)

高特异单抗

010-21861

Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9F2)
6×His单抗(9F2)

WB

小鼠IgG1
9F2

20 μg

014-23221

Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(28-75)
6×His单抗(28-75)

WB,IP

小鼠IgG3・κ
28-75

20 μL

017-23211

Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(21-48)
6×His单抗(21-48)

WB、IP、ELISA

小鼠IgG1・κ
21-48

20 μg

018-22381

Anti DYKDDDDK tag, Monoclonal AntibodyD
YKDDDK标签单抗

WB、IP、FCM、ChIP

小鼠IgG2b
1E6

20 μg

017-21871

ANTI c-Myc, Monoclonal
Antibodyc-Myc单克隆抗体

WB、IP

小鼠IgG1
9E10

20 μg

012-20461

Anti Green Fluorescent Protein, Monoclonal Antibody (Anti GFP,   MoAb)
绿色荧光蛋白单克隆抗体

IHC

小鼠IgG2・κ
mFX73

20 μL

HRP标记单抗

014-21901

Anti c-Myc, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated
过氧化物酶标记的c-Myc单抗

WB

小鼠IgG1
9E10

10 μL

015-22391

Anti DYKDDDDK tag, Monoclonal Antibody, Peroxidase   Conjugated
过氧化物酶标记的DYKDDDK标签单抗

WB

小鼠IgG2b
1E6

10 μL

010-23181

Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9C11), Peroxidase   Conjugated
抗6×His,单克隆抗体(9C11),过氧化物酶偶联

WB

小鼠IgG1
9C11

10 μL

011-21891

Anti Glutathione S-transferase, Monoclonal Antibody, Peroxidase   Conjugated
抗谷胱甘肽S-转移酶,单克隆抗体,过氧化物酶偶联

WB

小鼠IgG2b
5A7

20 μL

015-25951

Anti PA tag, Rat Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated
抗 PA 标签, 大鼠 单克隆 抗体, 过氧化物酶标记

WB

大鼠IgG2a
NZ-1

20 μL

抗体结合琼脂糖珠

012-22781

Anti DYKDDDDK tag Antibody Beads
抗DYKDDDDK标签抗体琼脂糖珠

IP

小鼠IgG2b
1E6

200 μL

019-23391

Anti 6×Histidine Antibody Beads
抗6×His抗体琼脂糖珠

IP

小鼠IgG3・κ
28-75

400 μL

014-23081

Anti HA Antibody Beads
抗HA抗体琼脂糖珠

IP

小鼠IgG1
4B2

200 μg



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