GenomONE ™ – CF 对细胞温和，比起PEG法，操作更简单。
本文介绍使用仅经抗原（小分子化合物）免疫1次的小鼠脾细胞在短时间内获得可产生抗体杂交瘤的实验示例。
抗原⇒CML（Nε-(carboxymethyl) lysine）和BSA（bovine serum albumin）的复合物。
将0.1 mg抗原（CML-BSA复合物）与弗氏完全佐剂同时皮内注射至小鼠尾根部位，2周后（没有最终免疫），切除小鼠脾脏。
使用GenomONE ™ – CF 对解离得到的脾脏细胞（6×107）和小鼠骨髓瘤（X-63-Ag8.653，1.2×107）进行融合。
融合后，用30 mL培养基（10%FBS/RPM1640）悬浮，取其中的15 mL加入市售的补充剂（HLCM：CSTi # 0232，final 0.5-2%），在3个96孔板上进行培养。第二天将一半培养基换成HAT培养基。之后每次更换培养基同样都加入HLCM。10天后，（ELISA）评估细胞集落的增殖和上清中的抗体效价。
杂交瘤阳性孔数（阳性率%） | CML抗体产生阳性孔数（阳性率%） |
285/288（99%） | 9/288（3.1%） |
克隆1次后，从具有各种特异性模式的杂交瘤中建立CML特异性抗体产生菌株43-2C（与CEL结合性的比较）
43-2C抗体（IgG1, κ）的特异性 |
|
CML：Nε-(carboxymethyl) lysine 美拉德反应产物 (AGE) 的主要结构之一。4次免疫后使用PEG进行融合的常规方法难以获得抗体。 CEL：Nε-(carboxyethyl) lysine 与CML类似的AGE的主要结构。 MSA：mouse serum albumin |
上述结果为其中一例，可以根据抗原、骨髓瘤、supplement等的类型来优化实验条件。
◆GenomONE ™ – CF 产品规格
产品编号 | Freeze-dried HVJ-E | HVJ-E Suspending Buffer （0.5 mL/支） | Cell Fusion Buffer |
1 | 1 | 1 | |
4 | 3 | 4 |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
| 免责声明 |
|
1. 本公司密切关注本网站发布的内容，但不保证发布内容的准确性、完整性、可靠性和最新性等。 2. 本公司不保证使用本网站期间不会出现故障或计算机病毒污染的风险。 3. 无论何种原因，使用本网站时给用户或第三方造成的任何不利或损害，本公司概不负责。此外，对于用户与其他用户或第三方之间因本网站发生的任何交易、通讯 3. 或纠纷，本公司概不负责。 4. 本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。如任何用户将本网站提供的产品和服务用于临床诊断或治 4. 疗，以及其他特定的用途或行为，本公司概不保证其安全性和有效性，并且不负任何相关的法律责任。 |
