细胞及组织冻存策略

在-80℃或-196℃冷冻保存，是细胞长期保存的唯一方法，有利于减少污染，减少因传代次数太多而引起的遗传变异和形态改变，以及避免有限细胞系出现衰老或恶性转化。细胞冻存为细胞培养工作带来很大的机动灵活性，降低了人力和物力的消耗。

细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，以最大限度的保存细胞活力。在过去的几十年中，科研工作者将培养基、血清和DMSO按照一定的比例配制成冻存液，并配合手工使细胞从4℃，-20℃，-80℃到液氮中逐步转移使其达到“慢冻”的效果。但这种自制的冻存液储存时间一般比较短，不能满足时间跨度大的实验项目的需求。且这样人力和时间成本大，人手操作的误差和血清制品的批间差也给实验结果带来了不稳定性。由此商品化的无血清即用型冻存液应运而生。初期的无血清细胞冻存液诞生在日本。

◆不需要程序降温的无血清细胞冻存液

在细胞冻存过程中会形成冰晶，导致水分子和溶质浓度不均匀，对细胞形成损伤。使用含DMSO的细胞冻存液，可使细胞受到的伤害减小。日本原装进口含DMSO的无血清细胞冻存液，均无不明动物源成分，高质量标准为实验效果带来保证。使用无血清细胞冻存液，不需要进行程序降温，细胞可以长期存放在-80℃或液氮。

◆不含DMSO的玻璃化冻存液

有部分细胞不适用于DMSO冻存，或者根据实验需要需要避免引入DMSO。针对这部分细胞，我们提供玻璃化冻存策略。玻璃化冻存，是以玻璃化冻存液对细胞进行高浓度玻璃化保护及处理后，快速投入液氮保存，使保护剂和细胞内水分来不及形成冰，或冰晶没有充分的时间进行生长，从而进入一种人工的完全玻璃化的状态。在玻璃化状态下，水分子没有进行重排，不产生结构和体积的变化，因而不会由于机械损伤或溶液效应对组织和细胞造成伤害，保证解冻后细胞仍有活力。日本原装进口无DMSO、无血清的细胞玻璃化冻存液，是玻璃化冻存试剂的首选。

◆组织冻存

随着移植医学研究的发展，出现了对组织的冷冻保存技术的实验需求。其中如皮肤等活组织薄而脆弱，需要有特定保护剂保护组织免受损伤。Funakoshi的ThelioKeep保存液，可维持上皮等组织的活性及生长的机能。

神经研究中常用到小鼠、大鼠胚胎来源的原代神经细胞。在某些特定实验中，需要收集一定量的标本才进行下游实验，此时需要将有实验价值的实验动物脑组织进行冻存。

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