无血清细胞冻存液
BAMBANKER™、BAMBANKER™ Direct
GC Lymphotec开发的BAMBANKER™无血清细胞冻存液，不含血清，细胞不受血清来源的未知成分或感染物质影响，无成分组成导致的批间差，质量稳定。此外，BAMBANKER™ 具有与含血清型冻存液相同的高存活率，因此可放心使用。
仅需在培养悬液中添加等量的BAMBANKER™ Direct，无需通过离心回收细胞，即可快速冷冻（-80℃）并进行长期储存。数据显示，与离心法相比，使用BAMBANKER™ Direct的操作时间缩减约2/3。已确认其性能与畅销20多年的BAMBANKER™相同，可放心使用。 |
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◆特点
● 具有与含血清型冻存液相同的细胞存活率（已获得专利）
● 无需程序冷冻仪，可在-80℃快速冷冻且长期储存
● 拥有小鼠ES细胞的使用实绩1）
● BAMBANKER™ Direct可在直接添加至细胞培养液中后进行冻存，无需离心操作
用户报告
● 东京工业大学大学院 生命理工学研究科 田川研究室 佐藤老师
◆操作方法
BAMBANKER™
1. 离心对数生长期※的细胞，并收集5×105~1×107个细胞。
2. 将回收的细胞悬浮于1 mL的BAMBANKER™中，转移至冻存管，无需预冷，直接在-80℃下冷冻储存。-80℃下冷冻的细胞后续也可在
液氮中储存。
3. 解冻细胞时，请在恒温箱中迅速进行。
※ 冻存成功的关键在于细胞的状态。冻存的细胞处于生长对数期，对提高冷冻后的活细胞率至关重要。
BAMBANKER™ Direct
1. 向培养液中添加等量的BAMBANKER™ Direct※
2. 使用移液器吹打混匀培养基和BAMBANKER™ Direct。
3. 将BAMBANKER™ Direct混合溶液转移至冻存管，-80°C冷冻储存。
※贴壁细胞需去除培养上清，使用PBS清洗后，添加细胞分离液，在与分离液等量的BAMBANKER™ Direct中悬浮。
◆不同细胞的存活率比较
细胞名称 | 保存时间 | 存活率 | ||
BAMBANKER™ | A公司含血清型 | A公司无血清型 | ||
P3U1（小鼠骨髓瘤细胞系） | 12个月 | 95% | 95% | 70% |
K562（人白血病细胞系） | 12个月 | 73% | 70% | 60% |
人胃上皮细胞 | 10个月 | 100% | 62% | 56% |
人γδT细胞 | 10个月 | 65% | 37% | 35% |
Daudi（人B细胞系） | 12个月 | 100% | 100% | 92% |
PC12（大鼠来源肾上腺嗜铬细胞瘤） | 11个月 | 95% | 59% | 20% |
人B细胞系 | 9个月 | 74% | 54% | 35% |
OKT4（小鼠杂交瘤） | 12个月 | 100% | 100% | 92% |
猴B细胞系 | 10个月 | 56% | 40% | 18% |
※ 保存条件：-80℃
◆小鼠成纤维细胞系保存效率对比
【BAMBANKER™】
【自制冷冻保存液】
实验条件
● 使用细胞：小鼠成纤维细胞系
● 保存细胞数量：4 x 106 cells/ vial （各细胞悬浮于1 mL的保存液中)
● 储存温度：-80℃，放入直接保管箱中进行冷却
● 储存时间：45天；解冻方法：常规法进行解冻
在自制冻存液（含10%DMSO的FBS）中发现了大量的死亡细胞，增殖能力停滞。而在BAMBANKER™中，解冻后立即观察到了活跃的细胞增殖，证明大多数细胞成功存活。
数据提供：东京医科大学 生化学领域 森谷老师
◆BAMBANKER™应用实例细胞一览
细胞系
•201B7 （人iPS细胞系) | •3T3-L1（小鼠前脂肪细胞系） | •A431（人鳞状细胞癌细胞系） |
•BAEC（牛主动脉内皮细胞系） | •Balb/3T3（小鼠成纤维细胞系） | •C2C12（小鼠骨骼肌细胞系） |
•Daudi（人B细胞系） | •ECV 304（人脐静脉内皮细胞系） | •H295R（肾上腺皮质细胞） |
•HEK293（人胚肾细胞系） | •HEK293T（人胚肾细胞系） | •HeLa（人宫颈癌细胞系） |
•HeLa S3（人宫颈癌细胞系） | •HepG2（人肝癌细胞系） | •HFF（人正常成纤维细胞系） |
•Huh7（人肝癌细胞系） | •Jurkat（人白血病T细胞系） | •K562（人慢性粒细胞白血病细胞系） |
•KATO III（人胃癌上皮细胞系） | •KLM-1（人胰腺癌细胞系） | •MDCK（犬肾小管上皮细胞系） |
•DT40 (鸡B细胞来源) | •NIH3T3（胎鼠皮肤细胞系） | •OKT4（小鼠杂交瘤） |
•OP9（小鼠髓系基质细胞） | •P3U1（小鼠骨髓瘤细胞系） | •PANC-1（人胰腺癌细胞系） |
•PC12（大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤系） | •RPE（人间充质上皮细胞系） | •SNL（小鼠胎儿成纤维细胞） |
•TSU-Pr1（人前列腺癌细胞系） | •Vero（非洲绿猴肾细胞系） | •小鼠ES细胞系 |
•人永生化肌细胞 |
原代细胞
•MEF（小鼠胚胎成纤维细胞） | •人γδT细胞 | •人外周血来源活化淋巴细胞 |
•PBMC （外周血单核细胞） | •小鼠脾脏来源活化淋巴细胞 | |
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Bambanker® 与其他相关产品的比较
细胞冻存效果验证
细胞冻存液类型
１．Bambanker®
２．Medium with serum （含血清，A公司）
３．Serum-free Medium （无血清，A公司）
实验结果
*1：细胞-80℃的保存时间
相关PDF
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１. | Q：为什么我使用了 BAMBANKER® 来保存细胞，但是存活率依然不高？ A：请冻存前确保细胞处于生长对数期，并且冻存时细胞数目控制在 5×105~1×107/mL 冻存液。 |
2. | Q：我们实验室已经有固定的冻存程序了，换了你们的 BAMBANKER® 可以还继续用原来程序降温的方法冻存吗？ A：虽然本产品可以无需程序降温冻存细胞，但如果通过程序降温盒等适当控制了温度下降的速度，效果更佳。 |
3. | Q：哪些细胞株（系）适合使用BAMBANKER® 来进行细胞冷冻保存？ A：几乎所有细胞株（系）都可以使用 BAMBANKER® 进行冻存。对于较为宝贵的 ES/iPS 细胞的保存尤其适用。官网上所列举的细胞系均已经过测试验证。 但也并不排除可能有某些细胞株是不适合使用 BAMBANER® 来进行冻存的，用户在没有确认是否可使用时，建议在进行正式细胞冻存之前先进行预实验。 |
4. | Q：无血清冻存液相比传统含血清冻存液有什么优势？ A：无血清冻存液因不含有动物血清，质量更稳定，批间差小；同时未知生物成分或感染性物质污染细胞的几率也极低，尤其对于 ES/iPS 细胞等有可能用于再生医疗的细胞安全得以严格保障；可以直接冻存无血清培养的细胞，免去无血清再驯化的步骤；另外 BAMBANKER® 无血清细胞冻存液不需要像传统的血清冻存液需要程序降温，减少了用户的繁琐操作，节省了时间。 |
5. | Q：BAMBANKER® 在冷冻保存细胞的过程中起什么作用？ A：BAMBANKER® 无血清细胞冻存液使用了 DMSO 等作为保护剂，在冻存细胞时能以１℃/min 左右的温度下降而逐渐冻结，在此过程中，细胞内的水分子被置换成冻结保护剂，抑制胞内和细胞周边的冰晶的形成，防止细胞膜和细胞器结构损伤，防止蛋白变质。 |
6. | Q：未使用的BAMBANKER® 无血清细胞冻存液应该如何保存？ A：2-10℃ 避光保存。开封后尽快使用。请注意保质期为自生产日期起 24 个月。 |
7. | Q：BAMBANKER® 能否使用于医疗领域? A：BAMBANKER® 仅供科研使用，不能使用于人体或医疗领域。 |
参考文献
1. T.Hikichi, et al; Differentiation Potential of Parthenogenetic Embryonic Stem Cells Is Improved by Nuclear Transfer, Stem Cells, 25, 46-53(2007)
2. Durruthy-Durruthy, J. et al. : Nature Genetics, 48, 44-52 (2016).
3. Sugii, S. et al. : Nature Protocols, 6, 346–358 (2011).
4. Zaidi, SK. et al. : Proc Natl Acad Sci U S A, 104, 19861–19866 (2007).
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 302-14686 | BAMBANKER BAMBANKER冻存液 |
100 mL | - | - |
| 306-14684 | BAMBANKER BAMBANKER冻存液 |
20 mLx5 | - | - |
| 306-95921 | BAMBANKER Direct BAMBANKER直接冻存液 |
20 mL | - | - |
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