PS 亲和法助力揭秘大熊猫食性转变的“幕后推手” -竹子miRNA跨界调控-

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大熊猫在分类上属于食肉目,但现今几乎完全以竹子为食。这种从肉食到专性食竹的极端食性转变,长期以来一直是进化生物学和保护生物学的研究热点。以往研究大多从大熊猫自身的遗传突变、形态适应、低能量代谢等角度去寻找答案。

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西南野生动植物资源保护教育部重点实验室的研究人员发表于Frontiers in Veterinary  Science的研究发现,竹子来源的microRNA(miRNA)在通过食物摄入进入大熊猫血液循环后,可能会影响多巴胺代谢、味觉/嗅觉信号转导、消化吸收等多个生理过程,介导大熊猫从肉食向竹食的转变及其后续适应。该发现为大熊猫食性适应机制提供了一个全新的分子层面解释,即“食物中的miRNA主动参与了宿主的生理调节”。

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在研究过程中,该研究团队采集了幼年雌性、成年雌性和成年雄性大熊猫的外周血,并利用FUJIFILM Wako的 MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS 从血液中分离外泌体。该试剂盒采用磷脂酰丝氨酸(PS)亲和法,能够高效、温和地捕获完整的外泌体,从而提取高质量的外泌体RNA用于后续miRNA测序,高纯度、高回收率的外泌体是研究团队获得真实、可靠的植物miRNA跨界调控证据的重要保障。

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新版本:MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS Ver.2


外泌体膜由分泌细胞来源的蛋白质和脂质组成。通常情况下,磷脂酰丝氨酸(PS)在活细胞中依赖脂质翻转酶的作用分布于细胞膜内侧,同时它也暴露于外泌体膜的外侧。Tim4(T-cell immunoglobulin domain and mucin domain-containing protein 4)是凋亡细胞的巨噬细胞吞噬受体。在钙离子存在下,Tim4通过与胞外区的IgV结构域结合到PS。

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基于这一机理,FUJIFILM Wako和金泽大学纳米生命科学研究所的华山教授合作,利用Tim4固化磁珠,在钙离子存在下捕获培养上清和血清等样品中的外泌体,并通过添加螯合剂纯化外泌体,由此成功开发了基于这一原理的PS亲和法外泌体纯化系列产品。与传统的外泌体纯化法相比,PS亲和法可实现更加简单地纯化完整状态的高纯度外泌体。这是可取代迄今为止的黄金标准法超速离心法的新型外泌体纯化法。

 

目前,基于PS亲和法的外泌体纯化系列产品在全球应用于各类外泌体相关的基础研究:在癌症标志物领域,该方法被用于从血浆和尿液等体液中高效分离EV,通过蛋白质组学分析筛选前列腺癌等恶性肿瘤的潜在诊断标志物;在神经退行性疾病研究中,研究人员利用PS亲和法纯化的EV探讨α-突触核蛋白(α-Syn)在多系统萎缩(MSA)和路易体痴呆(DLB)中EV释放受损的机制;在再生医学领域,间充质干细胞(MSC)来源的EV因其抗炎、抗纤维化和组织修复作用备受关注,PS亲和法分离的MSC-EV在回收率、纯度和生物学活性方面均显著优于传统方法;在病毒学研究中,PS亲和法被成功用于从人粪便源病毒样颗粒中分离EV封装的肠道病毒群体,揭示了非包膜病毒也可通过EV介导封装的突破性发现,对传统病毒分类学提出了重要挑战。

 

此外,FUJIFILM Wako也开发了更适合从纯化EV中提取RNA的试剂盒——纯化细胞外囊泡(EV)用miRNA提取试剂盒,仅需少量缓冲洗脱液(20 μL)即可回收高浓度的RNA,兼容下游RT-qPCR、微阵列、NGS等分析方法。

 

如果您也在从事EVs或细胞外囊泡相关研究,不妨尝试这一方法,或许能为您带来意想不到的发现!


    最后,大家可能有一个疑问,怎么确认miRNA是来自植物的。

    提示一下:

    这篇文章,在采血期间,大熊猫食用了三种竹子的不同部位。所以,研究人员收集了采血期间食用的三种竹子及其不同部位    

   (竹茎(BJZ1)、竹笋(JZS1)和竹叶(FZY1))的样本进行测序。


参考文献:

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC11906662/


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