亲和蛋白磁珠
Tamavidin® 2-REV Magnetic Beads
<Tamavidin® 2-REV ~和生物素可逆性结合>
Tamavidin® 2-REV是新亲和蛋白[Tamavidin® 2]的变体。由于生物素的结合力降低，可形成可逆的生物素结合复合物。因此，通过添加过量生物素，可以竞争性洗脱生物素分子。
（之前的亲和蛋白/链亲和素与生物素的结合力非常牢固且不可逆。）
◆MagCapture™ Tamavidin® 2-REV 概要
MagCapture™ Tamavidin® 2-REV试剂组成：磁珠悬浮液，TBS缓冲液（pH7.4），0.05w/v%叠氮化钠，50w/v%甘油。
◆MagCapture™ Tamavidin® 2-REV使用案例
生物素化DYKDDDDK-BAP回收性能验证。
竞争洗脱的生物素溶液组成：2 mmol/L 生物素，PBS溶液。
添加生物素化DYKDDDDK-BAP 10 ng至细胞裂解液（相当于1×106细胞数）与原产品Streptavidin磁珠比较添加回收性能。 MagCapture™ Tamavidin® 2-REV与原产品比较，低背景，能够回收到目生物素化DYKDDDDK-BAP。 |
生物素抗体免疫沉降
采用生物素化Anti-hAgo2 Mab，从K562细胞回收内源性人Ago2蛋白质。
与原产品Streptavidin磁珠相比，MagCapture™ Tamavidin® 2-REV是因其低背景，能够回收到内源性人Ago2蛋白质。
◆RNA Pull-down检测
应用（HOTAIR RNA）
通过RNA Pull-down检测比较原产品链霉亲和素磁珠和MagCapture™ Tamavidin® 2-REV的性能。
RNA Pull-dow检测后的生物素可竞争性洗脱。（数据未公布）。
A | 用生物素标记HOTAIR RNA的有义链和反义链进行RNAPull-down检测，通过SDS样品缓冲液洗脱，纯化的蛋白质样本通过银染色可检测出来。各RNA探针的反应样本均采用的是K562（5×106细胞数）的总细胞裂解物。 |
B | 利用RNAPull-down实验获得的样本进行免疫印迹实验。一抗是抗Ezh2抗体（D2C9）以及LSD1抗体（C69G12）。 MagCapture™ Tamavidin® 2-REV与原产品相比，可高效率且低背景回收RNA结合蛋白。 |
Tamavidin® 2 系列 产品概要
Magnetic Beads
本产品是将新规格抗生物素蛋白样蛋白的Tamavidin® 2-REV固相化在磁珠上。
Tamavidin® 2-REV是新规格的抗生物素蛋白样蛋白。因通过氨基酸修饰具有可逆的生物素结合性能，在结合生物素分子后，通过添加过量的生物素在温和洗脱条件下可回收靶分子。
Tamavidin® 2重组体
产品名称 | 等电点（pl）※1 | 耐热性※2 | 有机溶剂耐性 | 生物素结合速度系数(ka(M-1S-1)) | 生物素解离速度系数(kd(S-1)) | 分子量（四聚物） |
Tamavidin® 2 | 7.4 | Tm=85℃ | + | (1.0±0.5)×106 | 检测极限值以下※4 | 约60kDa |
Tamavidin® 2-REV | 8 | Tm=75℃ | - | (1.3±0.5)×106 | (1.5±0.4)×10-5 | 约60kDa |
Tamavidin® 2-HOT | 7.23 | 高耐熱性 | 高耐性※3 | (3.0±1.7)×105 | 检测极限值以下 | 约60kDa |
※1 | 等电点：产品均是通过氨基酸序列计算出来的数值。 |
※2 | 耐热性（TM值）：生物素结合活性加热20分钟可达到加热前的50%。关于Tamavidin® 2-HOT，因为在99.9℃加热30分钟结合 活性保持在90%以上，所以算不出数值。 |
※3 | 高耐性：40-50%DMSO中 |
※4 | 检测极限值：5×10-6(kd(S-1)) |
欲了解相关资料请点击：Tamavidin® 2-REV Magnetic Beads技术研讨会
【参考文献】
＜Tamavidin® 2＞
[1] | Takakura, Y. et al., "Tamavidins - novel avidin-like biotin-binding proteins from the Tamogitake mushroom.", FEBS Journal, 276, 1383(2009). |
[2] | Takakura, Y. et al., "Tamavidin, a versatile affinity tag for protein purification and immobilization.",J. Biotechnol., 145, 317(2010). |
＜Tamavidin® 2-REV＞
[3] | Takakura, Y. et al., "Tamavidin2-REV: An engineered tamavidin with reversible biotin-binding capability.", J. Biotechnol., 164(1), 19(2013). |
＜Tamavidin® 2-LPI＞
[4] | Takakura, Y.et al., "Engineering of novel tamavidin 2 muteins with lowered isoelectric points and lowered non-specific binding properties.", J. Biosci. Bioeng.,114(5), 485(2012). |
＜Tamavidin® 2-HOT＞
[5] | Takakura, Y. et al., "Tamavidin-HOT, a highly thermostable biotin-binding protein.", J. Biotechnol., 169, 1(2014). |
[6] | Ukekawa, R. et al., "A useful new tool for isolation of long non-coding RNA-binding proteins.",Medical Science Digest, 40(7), 355(2014). |
[7] | Takakura, Y. et al.: "Tamavidin2-REV : an engineered tamavidin with reversible biotin-binding capability.", J. Biotechnol., 164(1), 19-25(2013). |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 205-18263 | Tamavidin® 2, recombinant Tamavidin® 2, 重组型 |
5 mg | 免疫化学用 | |
| 203-19401 | Tamavidin® 2-REV, recombinant Tamavidin® 2-可逆性, 重组型 |
1 mg | 免疫化学用 | |
| 209-19403 | Tamavidin® 2-REV, recombinant Tamavidin® 2-可逆性, 重组型 |
5 mg | 免疫化学用 | |
| 205-19363 | Tamavidin® 2-HOT, recombinant Tamavidin® 2-耐热性, 重组型 |
5 mg | 免疫化学用 | |
| 136-18341 | MagCaptureTM Tamavidin® 2-REV MagCaptureTM Tamavidin® 2-REV RNA回收试剂 |
20 mL | 基因研究用 |
| 免责声明 |
|
1. 本公司密切关注本网站发布的内容，但不保证发布内容的准确性、完整性、可靠性和最新性等。 2. 本公司不保证使用本网站期间不会出现故障或计算机病毒污染的风险。 3. 无论何种原因，使用本网站时给用户或第三方造成的任何不利或损害，本公司概不负责。此外，对于用户与其他用户或第三方之间因本网站发生的任何交易、通讯 3. 或纠纷，本公司概不负责。 4. 本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。如任何用户将本网站提供的产品和服务用于临床诊断或治 4. 疗，以及其他特定的用途或行为，本公司概不保证其安全性和有效性，并且不负任何相关的法律责任。 |
