大鼠生长激素(GH) ELISA试剂盒
生长激素(Growth hormone,别名Somatotrop(h)ic hormone、 STH、 Somatotrop(h)in)主要是由垂体前叶嗜酸性腺垂体分泌的蛋白激素,在大脑和淋巴细胞表达。与GH高度相似的GH2表达于人的胎盘。GH作用于肝脏、肌肉、肾脏、软骨细胞、成纤维细胞、胸腺上皮细胞。在IGF-1作用下,通过软骨细胞的增殖、硫酸软骨素的合成、肝脏其他器官细胞肥大增殖、促蛋白合成等促进生长,对胸腺细胞分泌胸腺素起到促进作用。GH暂时性表达胰岛素样作用,之后在脂肪细胞中通过脂肪分解增加游离脂肪酸、血糖上升、胰岛素拮抗作用抑制糖分解、肌肉中糖原含量增加、末梢组织胰岛素灵敏性下降等代谢方面起到一定双相性作用。还起到类似催乳素作用对Na、K、Mg、Ca、P的存积、促进小肠Ca吸收、乳腺发育、乳汁分泌等作用。
GHRH、生长素释放肽、甲状腺激素、皮质醇、视黄酸均可促进GH合成分泌。另外通过胰高血糖素、加压素、2-脱氧-D-葡萄糖耐受性、精氨酸等酸负载、蛋白质摄入、TF5、β-内啡肽、左旋多巴、肾上腺素α受体刺激等可促进GH分泌。促进GH分泌的生理状态是低血糖、应激(发热,外伤,出血,乙醚麻醉,精神焦虑)、空腹、运动、慢波睡眠等。GH分泌会抑制引起促生长素抑制素(SRIF)、活化素、肾上腺素β受体刺激、葡萄糖、游离脂肪酸、皮质类固醇投放、高浓度IGF-1、高浓度GH等现象发生。抑制GH分泌的生理状态是高血糖、增加血液中的脂肪、异相睡眠等。GH分泌是具有episodic性的。也就是说可间隔性地使血糖浓度急剧上升或下降。因此非人为采血时血中GH水平会变化很大。
◆特点
● 测定时间短(总反应时间:5小时)
● 微量样本(标准操作法5 μL)即可测定。
● 使用无害的防腐剂。
● 全部试剂为溶液即用类型。
● 高测定精度和高重复性。
◆试剂盒组成
组成品 | 状态 | 包装 |
抗体包被96孔板 | 清洗后使用 | 96 wells(8×12)/1个 |
标准溶液(20 ng/mL) | 稀释后使用 | 100 μL/1瓶 |
缓冲液 | 直接使用 | 60 mL/1瓶 |
生物素结合抗GH抗体 | 稀释后使用 | 100 μL/1瓶 |
过氧化物酶·抗生素结合物 | 稀释后使用 | 100 μL/1瓶 |
显色液(TMB) | 直接使用 | 12 mL/1瓶 |
终止液(1M H2SO4) ※小心轻放 | 直接使用 | 12 mL/1瓶 |
浓缩清洗液(10×) | 稀释后使用 | 100 mL/1瓶 |
孔板密封膜 | 4个 | |
产品说明书 | 1本 |
物种交叉性
2000 pg/mL时数据+:有交叉性 ―:无交叉性
动物种类 | 对象物质 | 反应性及反应率(%) |
大鼠 | r-GH | 100 |
Prolactin | 0.02 | |
Placental lactogen | 0.02 | |
TSH | ― | |
LH | ― | |
FSH | ― | |
小鼠 | GH | + |
TSH | ― |
◆样本信息
● 大鼠血清·血浆
● 5 μL/well(标准操作法)
※ 样本量可调节范围:5~25 μL。但需用缓冲液将板孔总量调制至50 μL
※ 推荐使用1 mg/mL (终浓度)EDTA作为抗凝剂。
◆测定范围
● 31.3~2,000 pg/mL(标准曲线范围)
● 62.6~4,000 pg/mL(样本量25 μL时)
● 0.313~20 ng/mL(标准操作时)
◆实验数据
精度测试(组内变异)
样本 | A | B |
1 | 262 | 864 |
2 | 247 | 837 |
3 | 250 | 813 |
4 | 258 | 775 |
5 | 251 | 780 |
6 | 257 | 800 |
7 | 254 | 771 |
8 | 270 | 779 |
Mean | 256 | 802 |
SD | 7.19 | 33.5 |
CV(%) | 2.8 | 4.2 |
单位:pg/mL
重复性测试(组间变异)
测定日/样本 | E | F | G |
0天 | 1626 | 412 | 96.0 |
1天 | 1576 | 407 | 97.9 |
2天 | 1615 | 409 | 96.1 |
3天 | 1561 | 401 | 103 |
Mean | 1595 | 407 | 98.3 |
SD | 31.0 | 4.50 | 3.35 |
CV(%) | 1.9 | 1.1 | 3.4 |
单位:pg/mL,n=4
加标回收测试
样本C
添加量 | 实测值 | 回收量 | 回收率(%) |
0.00 | 101 | — | — |
155 | 265 | 164 | 106 |
192 | 285 | 184 | 95.8 |
223 | 325 | 224 | 100 |
单位:pg/mL,n=2
样本D
添加量 | 实测值 | 回收量 | 回收率(%) |
0.00 | 506 | — | — |
303 | 822 | 316 | 104 |
466 | 949 | 443 | 95.1 |
539 | 1058 | 552 | 102 |
单位:pg/mL,n=2
稀释直线性测试
2个血清样本连续用稀释缓冲液稀释3个梯度测定结果,直线回归值R2=0.999。
参考文献
1. | Daily Fasting Blood Glucose Rhythm in Male Mice: A Role of the Circadian Clock in the Liver. Ando H, Ushijima K, Shimba S, Fujimura A. Endocrinology. 2016 Feb;157(2):463-9. |
2. | Casted-immobilization downregulates glucocorticoid receptor expression in rat slow-twitch soleus muscle. Sato S., Suzuki H., Tsujimoto H., Shirato K., Tachiyashiki K., Imaizumia K. Life Sciences, Vol.89(25-26), p962-967, Dec 2011. |
3. | Activation of PPARδ promotes mitochondrial energy metabolism and decreases basal insulin secretion in palmitate-treated β-cells. Jiang L., Wan J., Ke L., LU Q., Tong N. Molecular and Cellular Biochemistry, Vol.343(1-2), p249-256, Oct 2010. |
4. | The CXCR4 antagonist AMD3100 suppresses hypoxia-mediated growth hormone production in GH3 rat pituitary adenoma cells. Yoshida,D.,Koketshu,K.,Nomura,R.,Teramoto,A. J Neurooncol, 2010. |
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
639-13749 | (AKRGH-010)LBIS® Rat GH ELISA Kit LBIS® 大鼠生长激素(GH) ELISA试剂盒 |
96 tests | - | - |
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