血蓝蛋白(KLH)(T细胞依赖性抗原)
大鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒
药品的免疫毒性实验相关方针ICH S8中推荐在无特定免疫毒性标靶情况下进行的T细胞依赖性抗体生产实验(TDAR、T cell Dependent Antibody Reaction)。TDAR被称为T细胞依赖性抗原。例如:通过KLH(Keyhole limpet hemocyanin)的投放对一次抗原刺激而生产IgM性状抗体。接下来进行二次抗原刺激后通过类别转换作用可观察到产生IgG性状抗体。由于本试剂盒可简便测定大鼠血液中IgM性状的抗KLH浓度,所以十分符合上文所述的目的。可与大鼠抗KLH-IgG检测试剂盒配套使用。
◆特点
● 测定时间短(总反应时间:2小时20分钟)
● 微量样本即可测定。
● 使用无害的防腐剂。
● 全部试剂为溶液即用类型。
● 高测定精度和高重复性。
◆试剂盒组成
组成品 | 状态 | 包装 |
KLH包被96孔板 | 清洗后使用 | 96 wells(8×12)/1个 |
抗KLH大鼠IgG标准溶液(300 ng/mL) | 稀释后使用 | 200 μL/1瓶 |
缓冲液 | 直接使用 | 100 mL/1瓶 |
HRP结合抗大鼠IgG抗体 | 稀释后使用 | 100 μL/1瓶 |
显色液(TMB) | 直接使用 | 12 mL/1瓶 |
终止液(1M H2SO4) ※小心轻放 | 直接使用 | 12 mL/1瓶 |
浓缩清洗液(10×) | 稀释后使用 | 100 mL/1瓶 |
孔板密封膜 | 3个 | |
产品说明书 | 1本 |
◆物种交叉性
3000 ng/mL时数据—:无交叉性
动物种类 | 对象物质 | 反应性及反应率(%) |
大鼠 | IgG | 100 |
IgM | ― | |
IgA | ― | |
IgE | ― | |
小鼠 | IgG | ― |
IgM | ― | |
IgE | ― |
◆样本信息
● 大鼠血清·血浆
● 50 μL/well(稀释样本)
※ 用附带的缓冲液将样品稀释至标准曲线范围内。
※ 为了避免非特异反应发生,请将样本稀释500倍以上。
◆测定范围
0.47~30 ng/mL(标准曲线范围)
◆实验数据
精度测试(组内变异)
样本 | A | B |
1 | 11.2 | 3.93 |
2 | 11.0 | 3.74 |
3 | 11.3 | 3.83 |
4 | 11.1 | 3.70 |
5 | 11.5 | 3.99 |
Mean | 11.2 | 3.84 |
SD | 0.190 | 0.121 |
CV(%) | 1.7 | 3.2 |
单位:ng/mL
重复性测试(组间变异)
测定日/样本 | E | F | G |
0天 | 15.3 | 3.84 | 0.969 |
1天 | 15.3 | 3.84 | 0.954 |
2天 | 15.4 | 3.83 | 0.958 |
3天 | 15.2 | 3.82 | 0.976 |
Mean | 15.3 | 3.83 | 0.965 |
SD | 0.0615 | 0.0067 | 0.0102 |
CV(%) | 0.40 | 0.18 | 1.1 |
单位:ng/mL,n=4
加标回收测试
样本C
添加量 | 实测值 | 回收量 | 回收率(%) |
0.00 | 1.18 | — | — |
0.466 | 1.65 | 0.470 | 101 |
1.40 | 2.53 | 1.35 | 96.4 |
2.33 | 3.48 | 2.30 | 98.7 |
单位:ng/mL,n=2
样本D
添加量 | 实测值 | 回收量 | 回收率(%) |
0.00 | 12.5 | — | — |
4.90 | 17.2 | 4.70 | 95.9 |
10.7 | 23.1 | 10.6 | 99.1 |
15.4 | 27.2 | 14.7 | 95.5 |
单位:ng/mL,n=2
稀释直线性测试
2个血清样本连续用稀释缓冲液稀释3个梯度测定结果,直线回归值R2=0.9992~0.9998
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
636-13759 | LBIS® KLH(TDAR) Rat-IgG ELISA Kit 血蓝蛋白(KLH)(T细胞依赖性抗原)大鼠免疫球蛋白G(IgG) ELISA试剂盒 |
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