简便·快捷的总蛋白定量检测试剂盒
蛋白质快速测定试剂盒Wako II（Protein Assay Rapid Kit Wako II）
本试剂盒可检测样品中的总蛋白。
现在，多数蛋白质定量测定法会对试管、玻璃容器等造成污染。
本试剂盒使用以邻苯三酚红(PR)为色素的比色法作为基本原理进行开发的。显色液操作简单，几乎不会对实验器皿造成污染。
◆特点
● 一步定量
● 显色液不需稀释
● 反应时间只需30分钟
● 显色器皿污染小
◆测定原理
邻苯三酚红（PR）与钼酸结合，在 470 nm 处形成最大吸收波长的红色络合物。该络合物在酸性条件下与蛋白质结合，使波长发生移位，同时使试液呈现出蓝紫色。通过测定 600 nm 附近的吸光度，对试剂中总蛋白的浓度进行测定。 |  |
◆操作概要【细胞法（cell method）】
1. 将 50 μL 样品及 3.0 mL 显色液充分混合*) |  |
试剂盒构成 ● 显色液：310 mL×1支 ● BSA标准溶液（2 mg/mL）：5mL×1支 | 检测范围 ● 细胞法（cell method）：62.5～2,000 μg/mL ● 微量滴定板法：125～2,000 μg/mL |
◆标准曲线例【细胞法（cell method）】
共存物质影响
共存物质对样品 BSA（浓度 500 μg/mL）的影响为无添加的吸光度的 ±10% 以内。
| 化合物 | 共存容许浓度 | 化合物 | 共存容许浓度 |
| 硫酸铵 | 0.8 mol/L | 2-巯基乙醇 | 0.5 mol/L |
| 二硫苏糖醇 | 0.5 mol/L | MES | 0.7 mol/L |
| 乙二胺四乙酸（EDTA） | 0.4 mol/L | MOPS | 0.2 mol/L |
乙二醇双（2-氨基乙醚）四乙酸（EGTA） | 0.04 mol/L | 氯化钠 | 4 mol/L |
| 果糖 | 0.1 mg/mL | 氢氧化钠 | 0.02 mol/L |
| 葡萄糖 | 0.1 mg/mL | 磷酸二氢钠 | 1 mol/L |
| 谷胱甘肽（还原） | 0.5 mg/mL | 哌嗪-1,4-二乙磺酸 | 0.5 mol/L |
| 甘油 | 50 v/v% | SDS *) | 0.01 w/v/% |
| 甘氨酸 | 0.1 mol/L | 叠氮化钠 | 0.2 w/v% |
| 盐酸胍 | 0.1 mol/L | 蔗糖 | 40 w/v% |
| 4-羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES） | 0.1 mol/L | 聚乙二醇辛基苯基醚 | 0.07 w/v% |
| 盐酸 | 1 mol/L | 三羟甲基氨基甲烷 | 2 mol/L |
| 氯化钾 | 1 mol/L | 非离子活性剂20 | 0.1 mol/L |
| 六水氯化镁(MgCl2・6H2O) | 1 mol/L | 尿素 | 6 mol/L |
*) 本试剂盒易受SDS影响，此外校准曲线仅能够在SDS 浓度0.01%，BSA浓度250～2,000μg/mL的条件下制作，请注意避免增加SDS的用量。
◆相关产品
蛋白质定量试剂盒
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 容量 |
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蛋白质分子量Marker
本产品是用于电泳、蛋白质印迹法的蛋白质分子量Marker。
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| 预染Marker | |||
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| 234-02464 | 500 μL×3 | ||
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| 蛋白质印迹法Marker | |||
| 236-02723 | WESTERN-VIEW™ Western Protein Size Marker (32-165kDa) | 电泳用 | 250 μL |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 295-78401 | 蛋白质快速测定试剂盒Wako II Protein Assay Rapid Kit wako II |
100次 | 蛋白质定量用 |
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