MagCapture™ RNA Pull Down 检测试剂盒
本试剂盒包含新型链霉亲和素样蛋白 Tamavidin® 2的突变体、可洗脱的生物素样 Tamavidin® 2-REV 的固定化磁珠以及FUJIFILM Wako的洗脱用缓冲液。
本品可应用于生物素化 RNA(bait RNA)的 RNA Pull Down,所拉下来的含有生物素化 RNA 的核糖核蛋白(RNP)复合物无需变性,即可通过生物素竞争性洗脱回收。
因此,与使用 SDS 等变性剂的洗脱法相比,本试剂盒优势为可减少目的蛋白中的非特异性蛋白。可有效应用于对于确定与目的 RNA 相互作用的蛋白以及功能未知的新型长链非编码 RNA(lncRNA)的功能分析。
◆Tamavidin® 2-REV~和生物素可逆结合功能
Takakura, Y. et al.: "Tamavidin® 2-REV : an engineered tamavidin with reversible biotin-binding capability.", J. Biotechnol., 164(1), 19-25(2013).
Tamavidin® 2-REV 是新型链霉亲和素样蛋白 Tamavidin® 2的突变体。通过减低与生物素的亲和力,可以形成可逆性的生物素结合复合物。因此,通过添加过量的生物素,可以竞争性洗脱生物素化分子。
(传统的链霉亲和素(抗生物素蛋白)和生物素的结合力非常牢固,发生不可逆的结合。)
试剂盒内容 10次反应 | |
RPD捕获磁珠——500 μL RPD洗涤缓冲液——55 mL RPD细胞裂解缓冲液——25 mL RPD重组缓冲液——1500 μL RPD生物素洗脱缓冲液——1000 μL |
◆操作步骤概述
◆应用数据 ~以 HOTAIR RNA※ 进行 RNA Pull Down 分析~
※HOTAIR 是一种与肿瘤发生密切相关的 lncRNA
银染 bait RNA:生物素标记 HOTAIR RNA 正义链 洗脱:Sample Buffer、4%SDS溶液、 洗脱:试剂盒附带的生物素溶液 样本:K562 细胞(1×107 细胞)的总细胞裂解液 Western Blot 一抗:抗 Ezh2 抗体 二抗:抗兔 IgG(Fc)单抗,POD 结合 二抗:(Code No. 016-23943) 与传统产品相比,本试剂盒可获得低背景的 RNA 结合蛋白。 |
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 包装 |
MagCapture™ RNA Pull Down 检测试剂盒 | 基因研究用 | 10 次 |
◆相关产品
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 包装 |
136-18341 | MagCapture™ Tamavidin® 2-REV RNA回收试剂 MagCapture™ Tamavidin® 2-REV | 基因研究 | 2 mL |
133-18611 | MagCapture™ HP Tamavidin® 2-REV RNA回收试剂 MagCapture™ HP Tamavidin® 2-REV | 2 mL | |
Tamavidin® 2, recombinant | 免疫化学用 | 5 mg | |
Tamavidin® 2-REV, recombinant 与生物素可逆性结合 | 1 mg | ||
5 mg | |||
Tamavidin® 2-HOT, recombinant 超耐热、耐有机溶剂 | 5 mg |
根据有关许可,Tamavidin® 是日本 Tabako 产业株式会社的注册商标。Tamavidin® 由日本 Tabako 产业株式会社授权给 FUJIFILM Wako 进行销售。
详细产品单页,请点击下载:MagCapture™ RNA Pull down kit
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