干细胞培养的基础材料 iMatrix系列
无需稀释可直接使用的孔板涂层溶液
Easy iMatrix-511
Easy iMatrix-511 是可以直接应用于培养孔板涂层的稀释溶液,有 iMatrix-511 和 iMatrix-511 silk 两种类型的稀释溶液。
本品 1 支(100 mL)可用于大约 11 块 6 孔板。
培养孔板涂层后 iMatrix-511 及 iMatrix-511 silk 的使用方法相同。
产品名称 | Easy iMatrix-511 (iMatrix-511 稀释型) | Easy iMatrix-511 silk (iMatrix-511 silk 稀释型) |
产品编号 | ||
转基因蛋白质 | 人层粘连蛋白 511E8 片段 | |
转基因蛋白表达系统 | 转基因 CHO-S 细胞 | 转基因蚕表达系统 |
产品形态 | 稀释溶液 | |
容量 | 100 mL(可包被约 11 块 6 孔板) | |
储存条件 | 2-15℃ | |
备注 | 含有重组 HSA |
◆使用方法
【使用方法:以 6 well plate(9.6 cm2 / well)为例】
每孔中添加该产品 1.5 mL(0.25 μg/cm2)。
iMatrix-511 或 iMatrix-511 silk 可在以下三种条件下进行涂层处理:①37℃ 1小时处理、②室温 3小时处理、③4℃ 过夜处理。
涂层处理完成后,去掉 Easy iMatrix-511 溶液,在孔板未干燥状态下,迅速接种细胞。
※避免涂层处理后的培养器材干燥,以免影响培养效果。
◆产品列表
产品编号 | 产品名称 | 提纯原料 | 规格 |
Easy iMatrix-511 层粘连蛋白511 | iMatrix-511 | 100 mL | |
Easy iMatrix-511 Silk 层粘连蛋白511 蚕来源 | iMatrix-511 Silk | 100 mL |
◆相关产品
产品编号 | 产品名称 | 容量 |
iMatrix-511溶液 (0.5 mg/mL PBS) 重组层粘连蛋白511-E8片段,溶液(0.5 mg/mL) | 175 µg× 2(350 µL×2) | |
175 µg× 6(350 µL×6) | ||
387-10131 | iMatrix-511 Silk 层粘连蛋白511 Sil | 175 μg ×6 |
Easy iMatrix-511,Easy iMatrix-511silk
Q1. 产品是以什么样的状态销售的?
A1. 产品是以液态销售的。一瓶里密封装有 1.6 μg/mL 浓度的 100 mL 细胞培养基质(层粘连蛋白 511-E8 片段)。
Q2. 产品的存储条件和有效期是什么?
A2. 产品的储存条件为,冷藏保存在 2-15°C。(推荐 4°C)产品的有效期,请参考下表。
产品 | 保质期 |
Easy iMatrix-511 | Lot.001 为生产后 6 个月内 |
Easy iMatrix-511silk | Lot.002 以后为生产后一年内 |
※ 具体的有效期详见考产品外包装。
Q3. 可以冷冻保存吗?
A3. 不可以冷冻保存。
Q4. 培养 hES/hiPS 细胞时使用什么培养基较好?
A4. 宫崎等的论文(Nature communications, 3(1236), 1-10, 2012)、(Scientific Reports, 7, 41165, 2017)中,使用了以下的培养基。
・mTeSR1,TeSR2,TeSR-E8 (STEMCELL Technologies)
・StemPro hESC SFM (Thermo Fisher Scientific)
・StemFitAK03 (Ajinomoto)
中川等的论文(Scientific Reports, 4(3594), 1-7, 2014)中使用了以下的培养基。
・StemFit (Ajinomoto)
文献中使用的培养基都出现了良好的结果。
Q5. 请教我培养 iPS 细胞时最佳的使用量。
A5. 6 孔板的一个孔中(9.6 cm2)使用 1.5 mL 本产品时,iMatrix-511 的浓度为 0.25 μg/cm2。
Q6. 培养 iPS 细胞时需要 Rock Inhibitor(Y-27632)吗?
A6. 在中川等的论文(Scientific Reports, 4(3594), 2014)中,介绍了只有在传代时添加 Rock Inhibitor,更换培养基的时候不使用的方法。
Q7. 培养 iPS 细胞时可以单细胞传代吗?
A7. 可以。
※使用iMatrix-511时,ES/iPS 细胞的扩增培养步骤,传代操作,请参考以下的链接。
也可以参考中川等的论文(Scientific Reports, 4(3594), 2014)。
Q8. 传代时使用什么细胞分离液?
A8. 请使用胰蛋白酶。
※使用iMatrix-511时,ES/iPS细胞的扩增培养步骤,传代操作,请参考以下的链接。
也可以参考中川等的论文(Scientific Reports, 4(3594), 2014)。
Q9. 可以使用小鼠的 iPS 细胞吗?
A9. 由于没有小鼠 iPS 细胞的培养数据,所以无法回答。
Q10. 这个产品与基质胶有什么不同?
A10. 基质胶含有小鼠 EHS 肉瘤来源的层粘连蛋白-111。另外还含有层粘连蛋白以外的分子。
A10. iMatrix-511 是将在 CHO-S 细胞中表达的层粘连蛋白 511-E8 片段高度纯化后的重组蛋白。
A10. iMatrix-511silk 是从蚕结的茧中高纯度纯化层粘连蛋白 511-E8 片段的重组蛋白。
A10. 已知 iPS 细胞是通过细胞膜受体(特别是 α6β1整联蛋白)粘附于层粘连蛋白-511。
A10. 已知 α6β1整联蛋白对层粘连蛋白-511 具有高粘附活性。这使得用 iMatrix-511 / iMatrix-511silk 可以使 iPS 细胞在单细胞状态下传代。
A10. 在宫崎等的论文中(Nature communications, 3(1236), 1-10, 201),5 次传代后(30 天后)的细胞数扩增效率约为基质胶的 200 倍。
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