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LabAssay™ Ammonia
LabAssay™ 氨检测试剂盒

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LabAssay Ammonia

LabAssay™ 氨检测试剂盒



氨主要产生于肠道和肾脏。在生物体内产生的氨通过肝脏中的尿素循环通路转变成尿素,然后从尿液中排出。

本产品把亚硝基铁氰化钠作为催化剂,以基于苯酚、次氯酸的贝特洛反应的比色法为基础的氨检测试剂。

LabAssay™ Ammonia 是以人和小鼠等动物样品作为对象的生化学检测用试剂,可检测样品中的氨。

LabAssay™ 系列是研究用试剂。不可用于诊断。


 

◆特点


● 少量样品即可进行检测

● 可使用微孔板检测多个样品

● 可检测小鼠等动物样品


 

检测原理


  氨和苯酚在催化剂亚硝基铁氰化钠的作用下置换生成二氧二苯胺。在强碱存在下,利用与次氯酸钠反应生成呈蓝色的靛酚,通过测定吸光度,从而测定出样本中的氮氨浓度。


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◆试剂盒组成


● 脱蛋白试剂——100 mL×1瓶

● 显色剂 A——50 mL×1瓶

● 显色剂 B——25 mL×1瓶

● 显色剂 C——50 mL×1瓶

● 氨标准溶液——15 mL×1瓶

● 标准溶液用稀释液——200 mL×1瓶



性能


● 标准曲线范围——100~400 μg/dL(μg/100 mL)

● 检测时间——约70分钟

● 所需样品量——70 μL

● 检测波长——630 nm

● 检测对象:小鼠、大鼠、人、猫、狗

● 检测样品:血液

 


〈标准曲线示例〉


 


◆使用方法


【微孔板法】


根据下表条件,在孔板内进行反应。



待测样品

标准系列

空白对照

第一项操作在小试管中进行

脱蛋白试剂

调整至脱蛋白试剂:血液=4:1

(v/v)

调整至脱蛋白试剂:标准液=4:1(v/v)

70 μL

样品

-


充分混合,离心5000 x g,4°C,15 min。

后续操作在微孔板上进行。

充分混合。后续操作在微孔板上进行。



上清 70 μL

混合溶液 70 μL

-

显色试剂A

70 μL

70 μL

70 μL

显色试剂B

35 μL

35 μL

35 μL

显色试剂C

70 μL

70 μL

70 μL

向微孔板中添加各种试剂后,使用孔板混匀仪充分混匀,在37 ℃下加热20 min。充分混匀后在室温※ 下静置30 min。

充分混匀后,以空白作为对照,检测630 nm处待测样品和标准液的的吸光度。

※ 室温:20 ℃~25 ℃



数据


加标回收测试


小鼠样品


添加量(mg/dL)

测定值(mg/dL)

回收量(mg/dL)

回收率(%)

-

81.8

-

-

56.9

142

60.2

106

114

205

123

108

171

247

165

96.8



大鼠样品


添加量(mg/dL)

测定值(mg/dL)

回收量(mg/dL)

回收率(%)

-

77.3

-

-

56.9

137

59.7

105

114

188

111

97.5

171

236

159

93.1



样品检测示例


雄性小鼠血液BALB/cAJc1 8W 

雄性大鼠血液 Jc1:SD 8W 

sample No.

测定值(µg/dL)

sample   No.

测定值(µg/dL)

1

118

1

99.3

2

124

2

91.6

3

95.6

3

90

4

116

4

93.1

5

95

5

97.7

mean

110

mean

94.3

SD

13.6

SD

4.01

(n=2)



狗血浆(EDTA)


No.

Age(years)

测定值(μg/dL)

mean

SD

CV(%)

1

4

232

210

221

15

7

2

6

194

178

186

12

6.2

3

10

225

207

216

13

5.9

4

12

208

196

202

8.2

4.1

5

6

181

202

192

15

7.7

6

11

155

175

165

14

8.6

7

10

144

151

147

5

3.5

8

12

156

173

164

12

7.2



狗血清


No.

Age(years)

测定值(μg/dL)

mean

SD

CV(%)

1

4

331

365

348

24

6.9

2

6

296

323

310

19

6.2

3

6

409

465

437

40

9.1

4

11

367

365

366

1.6

0.4

5

12

453

513

483

42

8.7

6

6

349

366

357

12

3.4

7

10

451

504

478

37

7.8

8

4

291

323

307

22

7.2



猫血浆(EDTA)


No.

Age(years)

测定值(μg/dL)

mean

SD

CV(%)

1

0.5

191

204

197

9.4

4.8

2

1

109

109

109

0.14

0.13

3

3

113

119

116

4.1

3.5

4

0.5

138

156

147

13

8.6

5

3

133

137

135

2.9

2.2

6

3

103

114

108

7.6

7

7

0.5

129

137

133

5.8

4.4



猫血清


No.

Age(years)

测定值(μg/dL)

mean

SD

CV(%)

1

3

381

366

374

11

2.8

2

3

370

378

374

5.7

1.5

3

6

381

342

361

28

7.8

4

4

357

329

343

20

5.8

5

6

249

245

247

2.9

1.2

6

6

315

299

307

11

3.7

7

1

403

388

395

10

2.6

8

1

198

193

196

4.2

2.1



【试管法】


添加经脱蛋白试剂处理的样品 800 μL、显色剂 A 800 μL、显色剂 B 400 μL、显色剂 C 800 μL 至微管或试管,充分搅拌,并在37°C下加热 20 min。再次搅拌后,用水(20~25°C)冷却 30 min。以空白为对照,检测样品和标准溶液的吸光度。

    使用此方法在试管内检测时,试剂盒的使用次数为 60 次。



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