LabAssay™ Ammonia
LabAssay™ 氨检测试剂盒
氨主要产生于肠道和肾脏。在生物体内产生的氨通过肝脏中的尿素循环通路转变成尿素,然后从尿液中排出。
本产品把亚硝基铁氰化钠作为催化剂,以基于苯酚、次氯酸的贝特洛反应的比色法为基础的氨检测试剂。
LabAssay™ Ammonia 是以人和小鼠等动物样品作为对象的生化学检测用试剂,可检测样品中的氨。
LabAssay™ 系列是研究用试剂。不可用于诊断。
◆特点
● 少量样品即可进行检测
● 可使用微孔板检测多个样品
● 可检测小鼠等动物样品
◆检测原理
氨和苯酚在催化剂亚硝基铁氰化钠的作用下置换生成二氧二苯胺。在强碱存在下,利用与次氯酸钠反应生成呈蓝色的靛酚,通过测定吸光度,从而测定出样本中的氮氨浓度。
◆试剂盒组成
● 脱蛋白试剂——100 mL×1瓶
● 显色剂 A——50 mL×1瓶
● 显色剂 B——25 mL×1瓶
● 显色剂 C——50 mL×1瓶
● 氨标准溶液——15 mL×1瓶
● 标准溶液用稀释液——200 mL×1瓶
◆性能
● 标准曲线范围——100~400 μg/dL(μg/100 mL)
● 检测时间——约70分钟
● 所需样品量——70 μL
● 检测波长——630 nm
● 检测对象:小鼠、大鼠、人、猫、狗
● 检测样品:血液
〈标准曲线示例〉
◆使用方法
【微孔板法】
根据下表条件,在孔板内进行反应。
待测样品 | 标准系列 | 空白对照 | |
第一项操作在小试管中进行 | |||
脱蛋白试剂 | 调整至脱蛋白试剂:血液=4:1 (v/v) | 调整至脱蛋白试剂:标准液=4:1(v/v) | 70 μL |
样品 | - | ||
充分混合,离心5000 x g,4°C,15 min。 后续操作在微孔板上进行。 | 充分混合。后续操作在微孔板上进行。 | ||
上清 70 μL | 混合溶液 70 μL | - | |
显色试剂A | 70 μL | 70 μL | 70 μL |
显色试剂B | 35 μL | 35 μL | 35 μL |
显色试剂C | 70 μL | 70 μL | 70 μL |
向微孔板中添加各种试剂后,使用孔板混匀仪充分混匀,在37 ℃下加热20 min。充分混匀后在室温※ 下静置30 min。 充分混匀后,以空白作为对照,检测630 nm处待测样品和标准液的的吸光度。 |
※ 室温:20 ℃~25 ℃
◆数据
加标回收测试
小鼠样品
添加量(mg/dL) | 测定值(mg/dL) | 回收量(mg/dL) | 回收率(%) |
- | 81.8 | - | - |
56.9 | 142 | 60.2 | 106 |
114 | 205 | 123 | 108 |
171 | 247 | 165 | 96.8 |
大鼠样品
添加量(mg/dL) | 测定值(mg/dL) | 回收量(mg/dL) | 回收率(%) |
- | 77.3 | - | - |
56.9 | 137 | 59.7 | 105 |
114 | 188 | 111 | 97.5 |
171 | 236 | 159 | 93.1 |
样品检测示例
雄性小鼠血液BALB/cAJc1 8W | 雄性大鼠血液 Jc1:SD 8W | ||
sample No. | 测定值(µg/dL) | sample No. | 测定值(µg/dL) |
1 | 118 | 1 | 99.3 |
2 | 124 | 2 | 91.6 |
3 | 95.6 | 3 | 90 |
4 | 116 | 4 | 93.1 |
5 | 95 | 5 | 97.7 |
mean | 110 | mean | 94.3 |
SD | 13.6 | SD | 4.01 |
(n=2)
狗血浆(EDTA)
No. | Age(years) | 测定值(μg/dL) | mean | SD | CV(%) | |
1 | 4 | 232 | 210 | 221 | 15 | 7 |
2 | 6 | 194 | 178 | 186 | 12 | 6.2 |
3 | 10 | 225 | 207 | 216 | 13 | 5.9 |
4 | 12 | 208 | 196 | 202 | 8.2 | 4.1 |
5 | 6 | 181 | 202 | 192 | 15 | 7.7 |
6 | 11 | 155 | 175 | 165 | 14 | 8.6 |
7 | 10 | 144 | 151 | 147 | 5 | 3.5 |
8 | 12 | 156 | 173 | 164 | 12 | 7.2 |
狗血清
No. | Age(years) | 测定值(μg/dL) | mean | SD | CV(%) | |
1 | 4 | 331 | 365 | 348 | 24 | 6.9 |
2 | 6 | 296 | 323 | 310 | 19 | 6.2 |
3 | 6 | 409 | 465 | 437 | 40 | 9.1 |
4 | 11 | 367 | 365 | 366 | 1.6 | 0.4 |
5 | 12 | 453 | 513 | 483 | 42 | 8.7 |
6 | 6 | 349 | 366 | 357 | 12 | 3.4 |
7 | 10 | 451 | 504 | 478 | 37 | 7.8 |
8 | 4 | 291 | 323 | 307 | 22 | 7.2 |
猫血浆(EDTA)
No. | Age(years) | 测定值(μg/dL) | mean | SD | CV(%) | |
1 | 0.5 | 191 | 204 | 197 | 9.4 | 4.8 |
2 | 1 | 109 | 109 | 109 | 0.14 | 0.13 |
3 | 3 | 113 | 119 | 116 | 4.1 | 3.5 |
4 | 0.5 | 138 | 156 | 147 | 13 | 8.6 |
5 | 3 | 133 | 137 | 135 | 2.9 | 2.2 |
6 | 3 | 103 | 114 | 108 | 7.6 | 7 |
7 | 0.5 | 129 | 137 | 133 | 5.8 | 4.4 |
猫血清
No. | Age(years) | 测定值(μg/dL) | mean | SD | CV(%) | |
1 | 3 | 381 | 366 | 374 | 11 | 2.8 |
2 | 3 | 370 | 378 | 374 | 5.7 | 1.5 |
3 | 6 | 381 | 342 | 361 | 28 | 7.8 |
4 | 4 | 357 | 329 | 343 | 20 | 5.8 |
5 | 6 | 249 | 245 | 247 | 2.9 | 1.2 |
6 | 6 | 315 | 299 | 307 | 11 | 3.7 |
7 | 1 | 403 | 388 | 395 | 10 | 2.6 |
8 | 1 | 198 | 193 | 196 | 4.2 | 2.1 |
【试管法】
添加经脱蛋白试剂处理的样品 800 μL、显色剂 A 800 μL、显色剂 B 400 μL、显色剂 C 800 μL 至微管或试管,充分搅拌,并在37°C下加热 20 min。再次搅拌后,用水(20~25°C)冷却 30 min。以空白为对照,检测样品和标准溶液的吸光度。
※ 使用此方法在试管内检测时,试剂盒的使用次数为 60 次。
参考文献
Inokuma, K. et al. : Microb. Cell Fact., 17, 153 (2018). Widespread effect of N-acetyl-D-glucosamine assimilation on the metabolisms of amino acids, purines, and pyrimidines in Scheffersomyces stipitis
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
297-94601 | LabAssay™ Ammonia LabAssay™ 氨检测试剂盒 |
700 tests | 细胞生物学 | - |
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
633-51021 | LabAssay™ ALP LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒 |
500 tests | 细胞生物学用 | - |
293-93601 | LabAssay™ Cholesterol LabAssay™ 胆固醇检测试剂盒 |
500 tests | 细胞生物学用 | - |
291-93901 | LabAssay™ Creatine LabAssay™ 肌酸检测试剂盒 |
500 tests | 细胞生物学用 | - |
291-93901 | LabAssay™ Glucose LabAssay™ 葡萄糖检测试剂盒 |
500 tests | 细胞生物学用 | |
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500 tests | 细胞生物学用 | - |
299-94301 | LabAssay™ Phospholipid LabAssay™ 磷脂检测试剂盒 |
500 tests | 细胞生物学用 | - |
291-94501 | LabAssay™ Triglyceride LabAssay™ 甘油三酯检测试剂盒 |
350 tests | 细胞生物学用 | - |
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