抗微管蛋白（甘氨酰化），多克隆抗体（Gly-pep1）
anti-Tubulin (glycylated), pAb (Gly-pep1)
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| AG-25B-0034-C100 | 抗微管蛋白（甘氨酰化），多克隆抗体（Gly-pep1） anti-Tubulin (glycylated), pAb (Gly-pep1) | 100 μg |
◆产品规格
| 产品详情 | |
| 产品类别 | 多克隆抗体 |
| 来源/宿主 | 兔 |
| 免疫原/抗原 | 对应于人微管蛋白β-2A链的D431EQGEFE（G-COOH*）EEEG441-NH2 （*从谷氨酸的γ-羧基分支的甘氨酸作为异肽键）的合成肽。 |
| 应用 | Western Blot: (1：10,000) |
| 免疫组化: (1：5,000) | |
| 免疫共沉淀: (1：200) | |
| 交叉反应 | 狗 |
| 人 | |
| 小鼠 | |
| 特异性 | 该抗体识别单糖或双糖化微管蛋白。培养细胞中的甘氨酰酶（TTLL3和TTLL8）的活性主要 导致α-和β-微管蛋白的修饰，但也导致其他尚未鉴定的蛋白质底物被抗体Gly-pep1检测 到。在免疫荧光标记中，该抗体强烈标记甘氨酰化微管（Gadadhar等，2017）。 |
| 纯度 | ≥95% (SDS-PAGE) |
| 纯化详情 | 表位亲和纯化 |
| 浓度 | 1 mg/mL |
| 规格 | 液体。在含有0.02％叠氮化钠的PBS中保存。 |
| Accession Number | Q13885 |
| 运输及储存 | |
| 运输 | 蓝冰 |
| 短期存储 | +4°C |
| 长期存储 | -20°C |
| 储存建议 | 重新配制后，建议分装并储存于-20°C。 |
| 避免反复冻融。 | |
| 使用/稳定性 | 收到产品后可在-20℃稳定保存至少6个月。 |
◆产品描述
微管是在所有真核细胞中都能发现的关键细胞骨架元件。一般认为是通过“微管蛋白密码”调控机制来生成不同特性的微管，从而使微管能实现多种不同功能。标记微管的一种机制是通过各种各样的微管蛋白翻译后修饰（PTM）。其中一种修饰方式是甘氨酰化，通过将二级甘氨酸链（支链）添加到蛋白质的主肽链产生。这些支链的长度可以从一个到二十个以上的甘氨酸残基不等。甘氨酰化由来自微管蛋白酪氨酸连接酶样（TTLL）家族的酶TTLL3，TTLL8和TTLL10催化。尤其是TTLL3和TTLL8对于甘氨酰化起始是必需的，因为它们产生初始的甘氨酸链。
Gly-pep1抗体是通过模拟β2-微管蛋白（TUBB2A）在E437位点上带有单甘氨酸链的多肽而制备的抗体。本抗体可以特异性地检测甘氨酰化的微管蛋白，以及在细胞以及组织中的其他未知的甘氨酰化底物。因微管的甘氨酰化主要在纤毛和鞭毛中发生，Gly-pep1还可以标记能动的纤毛以及原纤毛（Gadadhar等，2017）。
◆参考文献
Tubulin glycylation controls primary cilia length: S. Gadadhar, et al.; J. Cell Biol. (Article in press) (2017)
◆实验数据
使用抗微管蛋白（甘氨酰化），多克隆抗体（Gly-pep1）（产品编号AG-25B-0034）进行蛋白质甘氨酰化的免疫印迹分析。实验方法：在标准条件下培养HEK-293T细胞，转染表达甘氨酰酶TTLL3和TTLL8的质粒，并在10％SDS-PAGE上进行电泳。使用小鼠睾丸的裂解液作为甘氨酰化微管蛋白的阳性对照。将蛋白转至NC膜并进行免疫印迹检测，以抗微管蛋白（甘氨酰化）多克隆抗体（Gly-pep1）（1：20,000）在含0.1％Tween-20的TBS（TBS-T）中进行洗涤，在含2.5％脱脂牛奶的TBS-T中进行抗体孵育。在未转染的HEK-293T细胞提取物中，即使在高度曝光下也检测不到微管蛋白。在TTLL3甘氨酰酶表达后，主要是β-微管蛋白被Gly-pep1检测出来，同时，TTLL8表达产生了Gly-pep1阳性的 α-微管蛋白以及其他尚未鉴定的底物。睾丸裂解液也含有不同甘氨酰化蛋白的异质混合物，包括α和β-微管蛋白。图片由巴黎居里研究所的Sudarshan Gadadhar和Carsten Janke提供。
使用抗微管蛋白（甘氨酰化）多克隆抗体（Gly-pep1）（产品编号AG-25B-0034）对多纤毛室管膜细胞和带有初级纤毛的细胞进行免疫荧光染色。 实验方法：从新生野生型小鼠分离的放射状神经胶质细胞和血清饥饿诱导MDCK细胞系的纤毛发生。用微管稳定化方法固定细胞并用抗微管蛋白（甘氨酰化）多克隆抗体（Gly-pep1）（1:5,000；红色），抗α-微管蛋白（乙酰化）多克隆抗体（TEU318）（AG-20B -0068）（绿色）和DAPI（蓝色）染色。在纤毛上观察到Gly-pep1特异性染色。图片由巴黎居里研究所的Sudarshan Gadadhar和Carsten Janke提供。
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