高灵敏度的脂滴活细胞成像荧光染料

LipiDye<Lipid Droplet Green>

LipiDye是一种可以对脂滴进行高灵敏染色的新型荧光素。与以往的脂滴检测色素Nile Red相比显示出高S/N比。活细胞和固定细胞均可使用。

※本产品用于研究，不可用于临床。

※本产品由名古屋大学转化生命分子研究所（ITbM）的研究成果商品化而来

Yamaguchi E., et al., Angew. Chem. Int. Ed., 54:4539～4543 (2015).

◆脂滴（Lipid droplet）的含义

脂滴（Lipid droplet）是在脂肪细胞（Adipocyte）中发现的巨大的中性脂质的结块，主要成分是甘油三酯（Triglyceride）和甾醇酯（Sterol Ester）的单分子层结构体。脂滴被认为是储存细胞内中性脂质的细胞器，并且有较多肥胖和疾病相关的报道。最近，除了脂肪细胞，还在肝细胞、平滑肌细胞、神经胶质细胞等各种细胞中发现了脂滴。这些发现明确了其不仅仅是作为中性脂质的储存场所，还有抑制代谢和基因表达调节等各种功能。非脂肪细胞的脂滴在1μm以下，与脂肪细胞中的10~100μm的脂滴相比较小。目渐多评论认为，脂滴是每个细胞中都存在的普遍的小型细胞器。实际上，近年来与脂滴研究相关的研究报告数量显著增加（据Pubmed的调查）。

◆脂类自噬（Lipophagy）：脂滴的自噬

自2009年Nature初次报道自噬是脂滴分解的过程之后*，脂类自噬（Lipophagy）作为自噬抑制的脂质代谢引起人们的关注。脂类自噬的形成以及活性化机制作为基于脂滴分解的脂质代谢的新过程，期待它可以有效地预防脂质异常的疾病。

＊Singh, et al., Nature., 458: 1131-1135． （2009）．

◆特点

●　LipiDye是依存溶剂的分子极性发光的荧光素，选择性地吸收脂滴，使其在中性脂质中发出绿色的荧光。

●　由于其在水溶液中没有荧光，所以细胞质中的非特异性发光被明显抑制，与以往的色素相比具有高S/N比。

●　也可用于脂滴的实时成像和固定细胞中的观察。

●　具有很高的光稳定性，是实时成像的理想选择。

●　低浓度的使用量（1 μM）就可获得足够地灵敏度，工作浓度（1 μM）几乎不显示细胞毒性。

◆化合物信息

●　IUPAC name: 1,3-Diphenyl-2-[4-(N,N-diphenylamino)phenyl]benzo[b]phosphole-P-oxide

●　化学式 : C₃₈H₂₈NOP

●　分子量 : 545.58 g/mol

●　溶解度 : 可溶于DMSO

◆波长

Excitation/ Emission: 405 nm / 521～530 nm

※LipiDye用一般的绿色荧光色素使用的滤镜（FITC和GFP等）无法检测。请使用合适的滤镜。

◆使用案例

与Nile Red比较

脂肪细胞的脂滴用LipiDye或者Nile Red染色，检测箭头（左图）指示范围的荧光强度（右图）。无论是灵敏度还是S/N比LipiDye都比Nile Red高。脂滴中的荧光强度LipiDye较强（distance 0～10 μm），细胞质中的非特异性荧光信号Nile Red较强（distance 10～20 μm）。

脂肪前驱细胞3T3-L1细胞的分化

用LipiDye观察脂肪前驱细胞3T3-L1的分化过程。可以看出，分化过程中脂滴不断变大。

比较固定细胞

比较培养脂肪细胞用多聚甲醛固定后染色的情况（左图）和活细胞染色后用多聚甲醛固定的情况（右图），无论哪一种情况都可以高灵敏度地检测出脂滴。

※甲醇固定可能会影响到脂滴的构造，不建议使用。请使用多聚甲醛等的交联型固定试剂。

验证光稳定性

评价了LipiDye和BODIPY493/503、Fluorescein、Prodan随着照射时间的光稳定性。LipiDye与其他的荧光素相比显示出了较高的光稳定性。

验证细胞毒性

用MTT法评价LipiDye的细胞毒性。LipiDye几乎不影响细胞存活率。

◆相关产品

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。