水平连接细胞共培养板
UniWells™ Horizontal Co-Culture Plate
UniWells™ Horizontal Co-Culture Plate是两个孔的水平连接型新型共培养容器。
传统共用培养液的代表性容器,是一种称为插入式细胞培养器的上下重叠型培养容器。该容器的缺点在于细胞底部材质的不同会导致细胞行为的差异,无法同时在显微镜下观察相互间的细胞。除此以外,由于细胞位于滤膜上方,细胞数量增加会降低共培养效果。而且,容器之间容量的巨大差异,会使培养液中分泌的物质稀释,导致共培养效率不高。为了解决这些缺点,我们制作了新型的横向连接式细胞培养容器。
不仅解决了之前难以同时观察相互作用的问题,还可进行有效的共培养。容器尺寸为普通的制剂尺寸,适用于各种研究器械。可自由选择直径为13 mm的各种滤膜,适配多种多样的共培养实验。
◆特点
● 可以使用显微镜方便且同时观察两边细胞
● 孔之间的滤膜不易堵塞
● 可单独培养各种细胞
◆套装组成
UniWells™ Horizontal Co-Culture Plate (384-14421)
![]() | Main Body A ············· 2 Main Body B ············· 2 Cover ············· 4 Common Cover ············· 4 Adapter ············· 1 O-ring ············· 2 [Note] The filters are sold separately |
◆水平共培养的优点是什么?
1) 实验培养基量相同
传统产品 | UniWells™ |
传统的纵向培养容器下方的培养基量较多,会稀释上方的细胞分泌因子。 | UniWells™ 可以在左右的培养基量相同的情况下进行培养。 |
2) 细胞不会堵塞滤膜
传统产品 | UniWells™ |
传统的纵向培养容器细胞会堵塞滤膜,阻碍细胞分泌因子的通过。 | UniWells™ 即使细胞增殖也不会堵塞滤膜。 |
◆应用实例
外泌体摄取
使用UniWells™ Horizontal Co-Culture Plate进行实验,检测细胞释放的外泌体扩散后,能否通过滤膜被另外的细胞摄取。
通过使用UniWells™ 无需混合细胞,并且可以只让外泌体通过滤膜。通过使用UniWells™ 可以简易地检测外泌体是否被另一种的细胞摄取。
外泌体渗透率的比较
在传统共培养容器和UniWells™共培养容器的两边培养皿分别接种相同数量的细胞。细胞接种24 h后开始共培养。接种48 h后,用NanoSight分别检测两个共培养器中的外泌体。本实验的培养基量相同。
与传统共培养容器相比,UniWell™共培养容器中通过滤膜的外泌体数量更多。
◆使用方法
连接使用
将滤膜、O型密封环、盖子接在一起。 ※滤膜需另行购买 |
连接方法有以下两种
A) 将单独培养过的孔中的培养基引过去并连接
B) 一开始连接后,增加培养基的量至共培养状态
单独使用
将通用盖和盖子合上即可使用。 |
用于显微镜
置于载玻片大小的转接口上,就可以简单地在显微镜下观察细胞。 *转接口在容器本体上。 |
◆培养基容量
在未满400 μL的培养液量情况下,孔间培养基不共通。 | 单边最大培养基容量为1.8 mL。 |
培养基容量的概略图
从底部到不共通的水平面的高度约为6 mm。实际上,由于还有观察的厚度,因此高度只有5 mm左右。按液体容积计算,400 μL接近非共通液面界限。若是300 μL,液面就会位于结合部位以下。根据对接与移动时的震动所带来的溶液表面张力,有时候400 μL也会到达对接部位。
共通时的培养液容量,约为1800 μL至2000 μL。培养液过多的话,会黏附到盖子上,因此,请仔细观察添加不沾到盖子上容量的培养液。放置滤膜的情况下,请添加培养液直至覆盖整个滤膜。
单独培养可以盖上侧面的盖子,但在对接状态下,只要培养液容量低于400 μL,则可在非共通状态下进行培养。
只要添加足够的培养液即可随时实现共培养。若非长时间培养,400 μL的培养液即可满足培养需求。
如需进行3腔或以上的共培养,请点击此处查看相关产品:水平共培养板连接器Connector for horizontal plate
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疑难解答
1. 产品的材质是什么?
UniWells™ 主体的材质是聚苯乙烯,通用盖的材质是低密度聚苯乙烯。另外滤膜(另售)使用的是蛋白难以吸附的聚碳酸酯。
2. 需要灭菌吗?
包装后进行了电子束灭菌所以不需要灭菌。由于聚苯乙烯和低密度聚苯乙烯的耐热温度低,所以不能高压灭菌。原则上本产品不可回收利用。
3. 有涂层吗?
UniWells™ 没有涂层,请根据需求进行涂层。
4. 接种的细胞数有标准吗?
Ginrei Lab向每个孔中添加190 μL制备成5×104 个/mL 的NHDF(人成纤维细胞)和PANC-1(人胰腺癌培养细胞)。24 h后,细胞贴壁时,约40%~50%的细胞进行了汇合。但是适当的细胞数根据实验和细胞的种类会有很大的差异,需要根据条件进行讨论。
5. 可以用什么样的显微镜进行观察?
UniWells™ 和载玻片尺寸相同,可用各种显微镜进行观察。CQ1(横河电机株式会社),JuLI™ Stage(Air Brown 公司)的显微镜制造商也已经确认可以使用。
6. 需要多长时间令共培养中两孔的溶液均一?
使用UniWells™ Filter 0.6 µm(产品编号:388-14441)时,葡萄糖需要24 h达到相同浓度。蛋白48 h大概溶合70%。
7. 为什么置入滤膜的实验中,体液因子的通过量很少?
蛋白以及外泌体等物质会黏附在滤膜、容器、提取试剂盒上。在阳性对照样品中充分回收的情况下(提取过程没有问题),请先确认培养条件以及滤膜的处理。经常出现的问题是,①培养液过少,以及②滤膜未充分脱气。
① 培养液过少的情况:滤膜与培养液的接触面积减少,会显著地降低共培养效果。
x 错误例子(培养液量1 mL) 培养液未覆盖通道以及滤膜。共培养效果显著降低。 | ○ 正确例子(培养液量1.5 mL) 培养液覆盖通道以及滤膜。若再增加培养液,上盖则会在盖上时接触液面,且因表面张力可能会导致培养液溢出。 |
② 滤膜未充分脱气的情况下:使用前不充分脱气,会使空气残留在孔中将其堵塞,降低共培养效果。
【脱气方法】
将滤膜浸入使用的培养液中约5 min,用小镊子夹住滤膜,充分洗涮后取出。
※建议※ 浸入培养液前使用70%乙醇处理3 min,或浸入培养液中使用超声波震动脱气更为有效。
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
384-14421 | UniWells™ Horizontal Co-Culture Plate UniWells™ 水平共培养板 |
10 set | - | 培养容器(材质:聚苯乙烯) |
381-14431 | UniWells™ Filter 0.03μm UniWells™ 滤膜0.03μm |
50片 | - | 专用滤膜(孔径0.03μm) |
388-14441 | UniWells™ Filter 0.6μm UniWells™ 滤膜0.6μm |
50片 | - | 专用滤膜(孔径0.6μm) |
388-17001 | UniWells(TM) Adapter 96 UniWells™共培养板96孔板适配器 |
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