高分子β-淀粉样蛋白寡聚体ELISA试剂盒Wako Ver.2
High Molecular Amyloid β Oligomer ELISA Kit Wako Ver.2
免疫化学用 for Immunochemistry
制造商:FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation
保存条件:冷藏(冰冻运输)
分子量:0
◆试剂盒内容
96次用
抗体固相化孔板——1个
标准溶液(10 nM)——100 μL
缓冲液——60 mL
生物素偶联抗体(BAN50)溶液——100 μL
过氧化物酶偶联链霉亲和素溶液——100 μL
显色剂1——6 mL
显色剂2——6 mL
洗涤液(10×)——100 mL
标准品制备溶液——12 mL
血浆血清用样品制备溶液——50 mL
封板贴——4张
◆特点
● 可检测血浆、血清、脑脊液样品
● 可特异性地对9-mer以上的高分子Aβ寡聚体进行定量
◆试剂盒功能
标准曲线范围※1 | 0.41~100 pM(人脑脊液) 0.16~40 pM(人血清及EDTA抗凝血浆) |
反应Aβ寡聚体 | ≧9mer的Aβ寡聚体 |
检测对象样品 | 血清、EDTA抗凝血浆、脑脊液、in vitro Aβ寡聚体 |
所需样品量 | 人脑脊液:25 μL(4倍稀释) 人血清、血浆(EDTA):50 μL(2倍稀释) |
检测时间 | 4.5 h |
检测方法※2 | 发光法 |
※1 基于16-mer多抗原肽(MAP)标准品的换算值。
※2 检测时需要准备酶标仪。
◆检测原理
本系列采取双抗体夹心法ELISA,使用抗Aβ抗体(BAN50)作为捕获抗体和检测抗体,与1~8-mer几乎不发生反应,与9-mer以上的Aβ寡聚体则发生特异性反应。使用带有16个抗Aβ抗体(BAN50的抗体识别序列的16-mer MAP肽作为标准品。
◆高分子Aβ寡聚体的特异性数据
将Aβ1-42肽冷藏并孵育过夜后,通过超滤分离为不足30 kDa(8聚体以下)和30 kDa以上(9聚体以上),并使用Aβ抗体(BAN50)对各组进行Western Blot和ELISA(本方法)检测。
■ Western Blot(抗Aβ抗体(BAN50)) | ■ Aβ寡聚体ELISA |
8聚体以下(<30 kDa)的Fraction B几乎检测不到信号;9聚体以上(≥30 kDa)的Fraction A则检测到强烈的信号。
◆检测案例
检测案例1:加标回收和稀释度线性测试
人血浆样品 | 未添加 | +0.5 pM标准溶液 | +1 pM标准溶液 | +5 pM标准溶液 | +30 pM标准溶液 | ||||
检测值 | 检测值 | Recovery | 检测值 | Recovery | 检测值 | Recovery | 检测值 | Recovery | |
1.85 pM | 2.36 pM | 102% | 2.85 pM | 100% | 7.11 pM | 105% | 31.2 pM | 97.80% | |
人血清样品 | 未添加 | +0.5 pM标准溶液 | +1 pM标准溶液 | +5 pM标准溶液 | +30 pM标准溶液 | ||||
检测值 | 检测值 | Recovery | 检测值 | Recovery | 检测值 | Recovery | 检测值 | Recovery | |
1.58 pM | 2.07 pM | 98% | 2.59 pM | 101% | 6.64 pM | 101% | 31.9 pM | 101% |
人脑脊液① | 未添加 | +3 pM标准溶液 | +6 pM标准溶液 | +15 pM标准溶液 | |||
检测值 | 检测值 | Recovery | 检测值 | Recovery | 检测值 | Recovery | |
5.16 pM | 8.01 pM | 95% | 10.6 pM | 91% | 18.1 pM | 86% | |
人脑脊液② | 未添加 | +10 pM标准溶液 | +15 pM标准溶液 | +35 pM标准溶液 | |||
检测值 | 检测值 | Recovery | 检测值 | Recovery | 检测值 | Recovery | |
29.1 pM | 38.8 pM | 97% | 44.0 pM | 99.30% | 59.9 pM | 88% |
检测案例2:检测临床样品(脑脊液)
用本ELISA法检测非认知症患者(Control)、轻度认知障碍患者(MCI)阿尔茨海默病(AD)患者的脑脊液。
年龄 | 性别 | MMSE※3 | 脑脊液Aβ寡聚体(pM) | |
Control | 69 | M | 30 | 2.37 |
60 | F | 30 | 1.65 | |
59 | M | 30 | 2.82 | |
46 | M | 28 | 2.24 | |
60 | F | 29 | 1.34 | |
MCI | 69 | F | 24 | 3.6 |
76 | M | 23 | 2.62 | |
82 | M | 26 | 2.33 | |
69 | F | 23 | 2.67 | |
73 | F | 25 | 2.34 | |
AD | 79 | F | 10 | 3.56 |
88 | M | 24 | 3.13 | |
62 | M | 16 | 4.13 | |
78 | M | 13 | 3.95 | |
63 | M | 14 | 3.88 | |
74 | F | 16 | 3.25 | |
76 | M | 19 | 3.69 | |
84 | M | 16 | 4.34 |
※3:MMSE score:认知功能诊断问诊检查的分数
※3:MMSE score:30-28分:正常
※3:MMSE score:27-24分:怀疑有轻度认知障碍
※3:MMSE score:23分以下:怀疑严重认知症
非认知症患者(Control)、轻度认知障碍患者(MCI)阿尔茨海默病患者(AD)间的检测值差异明显。
结果表明,高分子Aβ寡聚体的检测值与MMSE Score相关。
◆对比表
产品名称 | High Molecular Amyloid β Oligomer ELISA Kit Wako Ver.2 | High Molecular Amyloid β Oligomer ELISA Kit Wako |
产品编号 | 290-82001 | 298-80101 |
标准曲线范围※1 | 0.41~100 pM(人脑脊液) | 0.410~100 pM(人脑脊液) |
反应Aβ寡聚体 | ≧9 mer的Aβ寡聚体 | ≧9 mer的Aβ寡聚体 |
检测对象样本 | 人血清、EDTA抗凝血浆、 脑脊液in vitro Aβ寡聚体 | 人脑脊液 |
in vitro Aβ寡聚体 | ||
必要样本体积 | 人脑脊液:25 μL(4倍稀释) | 人脑脊液:25 μL(4倍稀释) |
检测时间 | 4.5 h | 4.5 h |
检测方法※2 | 发光法 | 发光法 |
※1 基于16-mer多抗原肽(MAP)标准品的换算值。
※2 检测时需要准备酶标仪。
FAQ
关于检测样品
Q:可以用血浆、血清检测吗?
A:可以。
需要的器材、装置
Q:使用本产品检测时需要那些器材、装置?
A:● 纯化水(蒸馏水)
A:● 标准溶液/样品稀释用试管
A:● 清洗液稀释用玻璃容器(量筒/烧杯)
A:● 吸头更换型移液器(可准确移液10 μL或准确移液100~500 μL的一次性吸头)
A:● 连续分配移液器,可连续分配50 μL、100 μL的移液器
A:● 吸水纸(擦除清洗后微孔板上的残留液体)
A:● 混合器(Vortex型)
A:● 微孔板振荡器(约600~800 rpm)
A:● 96孔板清洗机(有更佳)或洗瓶
A:● 96孔板酶标仪(荧光检测用)
A:● 数据处理软件
试剂盒使用的抗体
Q:本产品的抗体可单独购买吗?
A:可以。请参考以下产品编号。
A:但是,虽然试剂盒中的捕获抗体为下述产品编号的产品,但检测用抗体使用的是下述产品的生物素标记抗体。
A:生物素标记抗体不对外销售。
产品编号:013-26873
产品名称:抗人β-淀粉样蛋白,单克隆抗体(BAN50)
试剂盒形式
Q:试剂盒可拆分使用吗?
A:可以。微孔板可拆卸成八联管使用,并提供了足够量的标准品。但拆分使用时,每次都需要制备标准曲线,因此
A:会减少可检测样品的数量。
■ 1次用完的情况下:
■ 可检测40个样品(80孔)
■ ※标准品占用其余的16个孔
■ 分两次用的情况下:
■ 可检测32个样品(64孔)
■ ※标准品占用其余的32个孔
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
290-82001 | High Molecular Amyloid β Oligomer ELISA Kit Wako Ver.2 高分子β-淀粉样蛋白寡聚体ELISA试剂盒Wako Ver.2 |
96 次用 | - | - |
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
292-62301 | Human β Amyloid(1-40) ELISA Kit Wako 人淀粉样蛋白抗体(1-40)ELISA试剂盒 |
96次用 | 免疫化学用 | - |
298-64601 | Human β Amyloid(1-40)ELISA Kit Wako Ⅱ 人淀粉样蛋白抗体(1-40)ELISA试剂盒II |
96次用 | 免疫化学用 | - |
294-62501 | Human/Rat Beta Amyloid(40)ELISA Kit Wako 人/鼠淀粉样蛋白抗体(40)ELISA试剂盒 |
96次用 | 免疫化学用 | - |
294-64701 | Human/Rat Beta Amyloid(40) ELISA Kit Ⅱ 人/鼠淀粉样蛋白抗体(40)ELISA试剂盒II |
96次用 | 免疫化学用 | - |
298-62401 | Human β Amyloid(1-42) ELISA Kit Wako 人淀粉样蛋白抗体(1-42)ELISA试剂盒 |
96次用 | 免疫化学用 | - |
296-64401 | Human β Amyloid(1-42) ELISA Kit Wako, High Sensitive 人淀粉样蛋白抗体(1-42)高灵敏度ELISA试剂盒 |
96次用 | 免疫化学用 | - |
290-62601 | Human/Rat Beta Amyloid(42)ELISA Kit Wako 人/鼠淀粉样蛋白抗体(42)ELISA试剂盒 |
96次用 | 免疫化学用 | - |
292-64501 | Human/Rat Beta Amyloid(42) ELISA Kit Wako, High Sensitive 人/鼠淀粉样蛋白抗体(42)高灵敏度ELISA试剂盒 |
96次用 | 免疫化学用 | - |
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
017-26871 | Anti Human Amyloid β, Monoclonal Antibody(BAN50) 抗人β-淀粉样蛋白,单克隆抗体(BAN50) |
10μL | 免疫化学用 | - |
013-26873 | Anti Human Amyloid β, Monoclonal Antibody(BAN50) 抗人β-淀粉样蛋白,单克隆抗体(BAN50) |
50μL | 免疫化学用 | - |
010-26883 | Anti Amyloid β, Monoclonal Antibody(BNT77) β-淀粉样蛋白,单抗(BNT77) |
50μL | 免疫化学用 | - |
018-26921 | Anti Amyloid β40, Monoclonal Antibody(BA27) 抗β-淀粉样蛋白40,单克隆抗体(BA27) |
10μL | 免疫化学用 | - |
014-26923 | Anti Amyloid β40, Monoclonal Antibody(BA27) 抗β-淀粉样蛋白40,单克隆抗体(BA27) |
50μL | 免疫化学用 | - |
014-26901 | Anti Amyloid β42(43), Monoclonal Antibody(BC05) 抗β-淀粉样蛋白42(43),单克隆抗体(BC05) |
10μL | 免疫化学用 | - |
010-26903 | Anti Amyloid β42(43), Monoclonal Antibody(BC05) 抗β-淀粉样蛋白42(43),单克隆抗体(BC05) |
50μL | 免疫化学用 | - |
014-27241 | Anti Human Apolipoprotein E4, Monoclonal Antibody(3F9) 抗人载脂蛋白E4,单克隆抗体(3F9) |
10μL | 免疫化学用 | - |
010-27243 | Anti Human Apolipoprotein E4, Monoclonal Antibody(3F9) 抗人载脂蛋白E4,单克隆抗体(3F9) |
50μL | 免疫化学用 | - |
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
330-43071 | Human β Amyloid(1-40) ELISA Kit Wako 人淀粉样蛋白抗体(1-40)ELISA试剂盒 |
0.5 mg | - | - |
336-43791 | Amyloid beta-Protein (Human, 1-40) [HCl Form] 淀粉样β-蛋白(人,1-40)[HCl形式] |
0.5 mg | - | - |
338-43491 | Amyloid beta-Protein (Human, 1-42) 淀粉样β蛋白(人,1-42) |
0.5 mg | - | - |
333-43701 | Amyloid beta-Protein (Human, 1-43) 淀粉样β-蛋白(人,1-43) |
0.5 mg | - | - |
334-43591 | Amyloid beta-Protein (Human, 1-16) 淀粉样β蛋白(人,1-16) |
0.5 mg | - | - |
330-44811 | Amyloid β-Protein (Human, 1-28) 淀粉样β-蛋白(人,1-28) |
0.5 mg | - | - |
331-44841 | Amyloid β-Protein (Human, 1-38) 淀粉样β-蛋白(人,1-38) |
0.5 mg | - | - |
333-44921 | Amyloid β-Protein (Human, 11-40) 淀粉样β-蛋白(人,11-40) |
0.5 mg | - | - |
330-44931 | [Pyr11]-Amyloid β-Protein (Human,11-40) [ pyr11 ] -淀粉样蛋白(人,β1-40) |
0.5 mg | - | - |
334-43091 | Amyloid beta-Protein (Human, 25-35) 淀粉样β蛋白(人,25-35) |
0.5 mg | - | - |
336-43671 | [Pyr3]-Amyloid beta-Protein (Human, 3-42) [Pyr3]-淀粉样β蛋白(人,3-42) |
0.5 mg | - | - |
337-43581 | beta-Sheet Breaker Peptide iAbeta5 | 0.5 mg | - | - |
335-00781 | Amyloid β-Protein (1-42, O-acyl isopeptide) | 2 mg | - | - |
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