用于未分化细胞的高灵敏度染色,无需荧光显微镜
人ES/iPS细胞染色试剂盒-BF
本品是利用对未分化人ES/iPS细胞具有高亲和力的凝集素和rBC2LCN(AiLecS1),对人ES/iPS细胞进行染色的试剂盒。
在结合过氧化物酶的rBC2LCN(rBC2LCN-POD)和高灵敏度DAB显色底物的共同作用下,无需荧光显微镜即可识别可见光下未分化的人ES/iPS细胞。
碱性磷酸酶(ALP)染色多数情况下可以用于可见光下未分化细胞的检测,但在骨、软骨、肝脏等具有ALP活性细胞的分化诱导实验中,ALP染色不能用来检测未分化的细胞。由于本试剂盒中使用的rBC2LCN对人ES/iPS细胞具有高亲和力,不会对具有ALP活性的细胞进行染色,可在多种细胞的分化诱导实验中检测未分化细胞。
◆检测原理
将结合过氧化物酶的rBC2LCN(rBC2LCN-POD)与存在于人ES/iPS细胞膜的足糖萼蛋白上的O型糖链进行结合,通过DAB底物与过氧化物酶的反应,能在可见光下观察到未分化细胞。
◆染色案例①
人ES/iPS细胞染色试剂盒-BF是将饲养层条件下培养的人iPS细胞(201B7株)固定之后,先对ALP(NBT/BCIP)(蓝紫色)进行染色,再使用本试剂盒(棕色)共染色。由于进入分化状态的细胞(红色框内的细胞)不与rBC2LCN结合,所以不会被本试剂盒染色。
◆染色案例②
共培养具有ALP活性的间充质干细胞(MSC)与人iPS细胞,再分别使用ALP、本试剂盒进行染色。
在ALP染色中,人iPS细胞(中央部分)与MSC(周围部分)均被染色;而在使用本试剂盒的染色中,只有人iPS细胞被染色。
◆产品列表
产品编号 | 产品名称 | 等级 | 包装 |
Human ES/iPS Cell Staining Kit-BF | 细胞染色用 | 10 次 |
相关产品
荧光标记rBC2LCN
产品编号 | 产品名称 | 等级 | 包装 |
rBC2LCN-FITC (AiLecS1-FITC) | 细胞染色用 | 100 μL | |
100 μL×5 | |||
rBC2LCN-635 (AiLecS1-635) | 细胞染色用 | 100 μL |
经过滤器过滤、灭菌,直接添加至人ES/iPS细胞的培养基中,可观察到荧光标记的人ES/iPS细胞。
也可用于流式细胞仪。
未标记rBC2LCN
产品编号 | 产品名称 | 等级 | 包装 |
BC2LCN(AiLecS2) Lectin, recombinant, Solution | 糖链研究用 | 1 mg | |
1 mg×5 |
※ 上述试剂仅供实验研究用,不可用作医药品、食品、临床诊断等。
参考文献
1. Watanabe, T. et al.: Cytotherapy, 23, 176(2021).
2. Onuma, Y. et al.: Biochem. Biophys. Res. Commun., 431, 524(2013).
3. Tateno, H. et al.: Stem Cells Transl. Med., 2, 265(2013).
4. Tateno, H. et al.: J. Biol. Chem., 286, 20345(2011).
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