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LBIS牛血清白蛋白ELSIA试剂盒
LBIS Bovine Albumin ELISA Kit

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LBIS Bovine Albumin ELISA Kit



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白蛋白存在于细胞和体液中,主要类型为高水溶性的蛋白,同时也存在糖基化的白蛋白。血清白蛋白分子量约为69 kDa,占血浆蛋白56-60%,等电点为4.9,在肝细胞中合成。

血清白蛋白是血清蛋白的主要组成部分,在维持渗透压中起重要作用,在生理上与脂肪酸、胆红素和甲状腺素等难溶于水的物质结合,并协助其运输。血清白蛋白浓度的降低,通常是由于肝硬化等引发的白蛋白生物合成减少、营养不良或热性病损耗的体蛋白所导致的血液中白蛋白的消耗,以及肾障碍引起的尿液渗出等原因所致。

在健康人的尿液中,血清白蛋白的排泄量每天仅在30 mg以下,但由于患肾脏疾病时渗出至尿液的白蛋白会增多,因此患肾小球肾炎、肾病综合征、糖尿病性肾病等肾脏疾病时的尿白蛋白水平会升高。另外,发烧、高血压、充血性心力衰竭、尿路感染等情况下,尿白蛋白水平也有可能会升高。即使是健康人,在经过剧烈运动或肌肉劳动后、热水沐浴后、精神兴奋、压力和摄入大量蛋白后以及月经前,尿白蛋白会短暂性增加,这种现象也被称为生理性或功能性蛋白尿或运动性蛋白尿。此外,仅在站立时才出现的蛋白尿主要发现于年轻人中。

人类中有一种罕见的先天性疾病,称为低白蛋白血症,也称为无白蛋白血症,但正确来说是含有极少量白蛋白,临床症状为轻度水肿和中度低血压,尚未观察到肝功能异常或蛋白尿。动物中大鼠有无白蛋白血症analbuminemia的模型,是由佐佐木研究所的Sumi Nagase老师以SD大鼠建立的,被称为NAR(Nagase analbuminemia rat)。

血清白蛋白的检测,使用TIA检测系统宏观上效果不错,FUJIFILM Wako Shibayagi也可以提供大鼠和小鼠的自动检测仪器用TIA试剂盒,然如果要实现高灵敏度和微量检测则需用到ELISA。富士胶片和光Shibayagi的LBIS Albumin ELISA Kit除了可定量检测血液中、尿液中与疾病相关的白蛋白外,还可应用于体外白蛋白生物合成实验系统、从培养体系中纯化得到的生物药中FBS等的残留污染检测,NAR中肝细胞和肝组织移植后白蛋白产生的标记成功与否的研究等等。



◆试剂盒特点


● 可快速检测(总反应时间:2.5 h)

● 检测范围:0.78~50 ng/mL

● 所需样品量:100 μL/well

● 使用环保的防腐剂

● 所有试剂均为即开即用的溶液

● 高检测准确性和可重复性


使用目的


● 检测培养基来源的牛血清白蛋白(BSA/FBS)

● 细胞和组织加工产品

● 单克隆抗体生产工艺

● 重组蛋白生产工艺



试剂盒的组成


组成内容

状态

包装

 (A)抗体固定96孔板(干板型)

清洗后使用

96 wells(8×12)/1支

 (B)标准白蛋白溶液(500 ng/mL)

稀释后使用

200 μL/1支

 (C)缓冲液

直接使用

60 mL/1支

 (D)过氧化物酶结合抗白蛋白抗体

稀释后使用

200 μL/1支

 (F)显色液(TMB)

直接使用

12 mL/1支

 (H) 反应停止液(1M H2SO4)  使用注意

直接使用

12 mL/1支

 (I)浓缩清洗液(10×)

稀释后使用

100 mL/1支

 封板膜

——

3张

 使用说明书

——

1份



交叉反应性


物种

交叉反应率(%)

100%

小鼠

小于0.05%

大鼠

小于0.05%

小于0.05%


※ 交叉反应率为1000 ng/mL浓度下检测的数据。



◆样品信息


检测样品中牛白蛋白残留污染

※ 检测时,制备合适倍率的缓冲液,用作检测用的稀释样品。

※ 请注意本试剂盒对于检测牛血清·血浆样品十分敏感。需稀释约一百万倍。



◆检测范围


0.78~50 ng/mL(标准曲线范围)



◆Validation data

 

准确度测试(实验组内差异)


样品

A

B

C

D

1

46

23.9

11.7

1.72

2

45.3

23.5

11.8

1.84

3

43.9

24.2

11.5

1.7

4

44.8

22.5

11.4

1.76

5

48

24.7

12.3

1.75

mean

45.6

23.8

11.7

1.75

SD

1.561

0.825

0.353

0.053

CV(%)

3.4

3.5

3

3


单位:ng/mL


可重复性测试(实验组间差异)


检测日/样品

E

F

G

第0日

1.48

5.7

24.3

第1日

1.55

6.2

25.6

第2日

1.5

6.35

25

第3日

1.56

6.25

25

mean

1.52

6.12

25

SD

0.042

0.288

0.545

CV(%)

2.8

4.7

2.2


单位:ng/mL n=3


加标回收测试


样品 H


添加量

实测值

回收量

回收率

0

3.06

-

-

1.5

4.58

1.52

101

3

5.8

2.74

91.3

3.75

6.79

3.73

99.5


单位:ng/mL n=3


样品 I


添加量

实测值

回收量

回收率

0

10.6

-

-

3.95

14.7

4.1

104

11.9

22.3

11.7

98.3

19.8

29.4

18.8

94.9


单位:ng/mL n=3



◆稀释直线性测试


使用连续性稀释缓冲液分4个阶段梯度稀释2个血清样品,并进行检测,结果显示直线回归的R2从0.9996变为了0.9997。

 


操作方法


抗体包被96孔板(干板型)

↓ 清洗4次

样品或标准溶液 100 μL

↓ 搅拌,室温(20~25 ℃),静置反应1 h 

↓ 清洗4次

过氧化物酶结合抗白蛋白抗体 100 μL

↓ 搅拌,室温(20~25 ℃),静置反应1 h 

↓ 清洗4次

显色液(TMB) 100 μL

↓ 搅拌,室温(20~25 ℃),静置反应30 min 

反应终止液(1M H2SO4

搅拌

吸光度检测(主波长450 nm、副波长620 nm:600~650 nm)



FBS/FCS,液体培养基检测示例


样品

白蛋白检测值(mg/mL)

FBS-1

17.3

FBS-2

17.3

FCS-1

10.5

FCS-2

12.5

RPMI-1(10 %FBS)

1.39

RPMI-2(10 %FBS)

1.73



◆牛血清白蛋白(BSA)检测用试剂


牛血清白蛋白(BSA:Bovine Serum Albumin)


产品编号

产品名称

标准曲线范围

样品量
(稀释样品)

635-07099

LBIS Bovine Albumin ELISA kit

LBIS牛白蛋白 ELISA试剂盒

0.78~50 ng/mL

100 μL


已经验证可以检测样品中掺入的牛血清白蛋白,以及来源于生产过程的终产品中牛血清白蛋白残留杂质。

本产品仅供实验研究用,不可作临床应用。



点击此处下载产品宣传页



产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
635-07099 LBIS Bovine Albumin ELISA kit
LBIS牛白蛋白 ELISA试剂盒
96 tests

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