已取得PMDA认证的细胞冻存液
GC Lymphotec iStock细胞冻存液
GC Lymphotec Inc.的iStock细胞冻存液不含血清和人以外的动物来源成分,适用于人ES/iPS细胞和再生医疗研究。
此外,iStock的长期稳定性优异,使用本产品悬浮回收的细胞后,可置于超低温冷冻冰箱速冻并长期储存。-80°C冷冻约12 h后,可在液氮中储存。
◆特点
● 无血清以及其他来源成分
● 无需程序化冷冻仪
● 可在-80°C快速冷冻且可长期储存
● 已取得PMDA认证,可用于再生医疗产品原料
● 无需制备冻存液
● 冷藏保存的保质期为3年
◆各冻存液与iStock的性能比较
人外周血单核细胞(PBMC) | 小鼠ES细胞 |
从 9 名知情同意的健康者血液中,分离出外周血单核细胞(PBMC), 并使用OKT3抗体固相化培养瓶和GC LYMPHOTEC的淋巴细胞培养基 培养4天。 使用含血清冻存液和iStock,将增殖的细胞调整至1.5×107 cells/mL, 采用慢速冷冻法,冷冻于-80℃。第二天,转移至液氮罐中,保存7天 后复苏,比较回收率(复苏后细胞数/冻存前细胞数×100%)。 ⇒iStock和含血清冻存液显示相同的复苏率。 | 使用10% DMSO/Medium、iStock、竞品A、竞品B将增殖后的小鼠ES细胞调整浓度至4×106 cells/mL。分装1 mL悬液至冻存管(n=4),不使用freezing container,在-80°C下进行冻存。第二天转移至液氮,储存一周。 在37°C下快速复苏,离心后,在培养基中悬浮并检测活细胞数,比较复苏率。 ⇒与其他冻存液相比,iStock显示更高的复苏率。 |
人iPS细胞 | |
冷冻3×106 cell/tube人iPS细胞(n=3),使用液氮储存。 解冻后,接种至培养容器,3天后检测细胞数。 ⇒与其他公司产品相比,使用iStock冻存液复苏后的iPSC增殖情况 ⇒更优异。 | 使用1 mL冻存液悬浮3.0×106 cells的人iPS细胞,转移至冻存管,并使用-80°C的冷冻仪冷冻细胞(各冻存液分别冷冻3管),2天后转移至液氮罐进行保存。使用加热至37°C的干浴器解冻液氮(液相)保存的冷冻细胞,然后悬浮于2 mL iPS细胞专用培养基,并使用台盼蓝染色计数法测量活细胞(每款冻存液各测量3管,计算平均值)。 |
使用加热至37°C的干浴器复苏各冻存液冻存的iPS细胞的冷冻管,然后悬浮于iPS细胞专用培养基并离心,通过去除上清,来去除冻存液。分散细胞沉淀,添加2 mL的iPS细胞培养专用培养基,并接种至层粘连蛋白预包被的6孔板的1个孔中,37°C、CO2浓度5%的条件下培养至第三天。培养结束后,使用细胞解离液解离细胞,并使用台盼蓝染色计数法测量活细胞(每款冻存液各测量3管,计算平均值)
细胞球(HEK293T)
实验概要 使用低吸附U底96孔板制备HEK293T细胞球,用竞品A、竞品B和iStock这3款冻存液在-80°C下冷冻储存。冷冻2周后复苏细胞,培养3天并评估增殖能力。
实验结果 使用WST-8检测细胞增殖能力后发现,与竞品A和竞品B冻存的细胞相比,iStock冻存的细胞吸光度的值更高。 以上结果显示,iStock可有效用于HEK293T细胞球的冻存。 |
◆iStock使用方法
1. 细胞冻存
❶将细胞移至离心管。
❷离心分离(800×g左右,3-5 min),用抽吸器去除上清。向~1.5×107个细胞中加入1 mL的 iStock,缓慢地进行移液。
❸将细胞悬液分注至冷冻管中。
❹在-80℃的低温冷冻箱进行冻存(根据细胞类型,将冷冻管转移至市售的冷冻容器进行冻存)。
❺第二天移至液氮罐中。
2. 细胞解冻
❶在37°C的温水浴中解冻冷冻管。
❷立即与约10 mL的培养液混合。
❸离心分离(800×g左右,3-5 min),用抽吸器去除上清。
❹在适量的培养液中悬浮,转移至培养容器,开始培养。
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产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
389-19454 | iStock iStock细胞冻存液 |
100 mL | - |
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