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GC Lymphotec iStock细胞冻存液
已取得PMDA认证的细胞冻存液

已取得PMDA认证的细胞冻存液

GC Lymphotec iStock细胞冻存液


GC Lymphotec Inc.的iStock细胞冻存液不含血清和人以外的动物来源成分,适用于人ES/iPS细胞和再生医疗研究。

此外,iStock的长期稳定性优异,使用本产品悬浮回收的细胞后,可置于超低温冷冻冰箱速冻并长期储存。-80°C冷冻约12 h后,可在液氮中储存。

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◆特点


● 无血清以及其他来源成分

● 无需程序化冷冻仪

● 可在-80°C快速冷冻且可长期储存

● 已取得PMDA认证,可用于再生医疗产品原料

● 无需制备冻存液

● 冷藏保存的保质期为3年



◆各冻存液与iStock的性能比较


人外周血单核细胞(PBMC)


小鼠ES细胞

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从 9 名知情同意的健康者血液中,分离出外周血单核细胞(PBMC),

并使用OKT3抗体固相化培养瓶和GC LYMPHOTEC的淋巴细胞培养基

培养4天。

使用含血清冻存液和iStock,将增殖的细胞调整至1.5×10cells/mL,

采用慢速冷冻法,冷冻于-80℃。第二天,转移至液氮罐中,保存7天

后复苏,比较回收率(复苏后细胞数/冻存前细胞数×100%)。

iStock和含血清冻存液显示相同的复苏率。

使用10% DMSO/Medium、iStock、竞品A、竞品B将增殖后的小鼠ES细胞调整浓度至4×106 cells/mL。分装1 mL悬液至冻存管(n=4),不使用freezing container,在-80°C下进行冻存。第二天转移至液氮,储存一周。

在37°C下快速复苏,离心后,在培养基中悬浮并检测活细胞数,比较复苏率。

与其他冻存液相比,iStock显示更高的复苏率。



人iPS细胞


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冷冻3×106 cell/tube人iPS细胞(n=3),使用液氮储存。

解冻后,接种至培养容器,3天后检测细胞数。

与其他公司产品相比,使用iStock冻存液复苏后的iPSC增殖情况

更优异。

使用1 mL冻存液悬浮3.0×106 cells的人iPS细胞,转移至冻存管,并使用-80°C的冷冻仪冷冻细胞(各冻存液分别冷冻3管),2天后转移至液氮罐进行保存。使用加热至37°C的干浴器解冻液氮(液相)保存的冷冻细胞,然后悬浮于2 mL iPS细胞专用培养基,并使用台盼蓝染色计数法测量活细胞(每款冻存液各测量3管,计算平均值)。



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使用加热至37°C的干浴器复苏各冻存液冻存的iPS细胞的冷冻管,然后悬浮于iPS细胞专用培养基并离心,通过去除上清,来去除冻存液。分散细胞沉淀,添加2 mL的iPS细胞培养专用培养基,并接种至层粘连蛋白预包被的6孔板的1个孔中,37°C、CO2浓度5%的条件下培养至第三天。培养结束后,使用细胞解离液解离细胞,并使用台盼蓝染色计数法测量活细胞(每款冻存液各测量3管,计算平均值)



细胞球(HEK293T)


实验概要

使用低吸附U底96孔板制备HEK293T细胞球,用竞品A、竞品B和iStock这3款冻存液在-80°C下冷冻储存。冷冻2周后复苏细胞,培养3天并评估增殖能力。

 


实验结果

使用WST-8检测细胞增殖能力后发现,与竞品A和竞品B冻存的细胞相比,iStock冻存的细胞吸光度的值更高。

以上结果显示,iStock可有效用于HEK293T细胞球的冻存。

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iStock使用方法


1. 细胞冻存   

❶将细胞移至离心管。

❷离心分离(800×g左右,3-5 min),用抽吸器去除上清。向~1.5×107个细胞中加入1 mL的 iStock,缓慢地进行移液。

❸将细胞悬液分注至冷冻管中。

❹在-80℃的低温冷冻箱进行冻存(根据细胞类型,将冷冻管转移至市售的冷冻容器进行冻存)。

❺第二天移至液氮罐中。


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2. 细胞解冻    

❶在37°C的温水浴中解冻冷冻管。

❷立即与约10 mL的培养液混合。

❸离心分离(800×g左右,3-5 min),用抽吸器去除上清。

❹在适量的培养液中悬浮,转移至培养容器,开始培养。



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产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
389-19454 iStock
iStock细胞冻存液
100 mL -

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