Nippi低内毒素胶原 · 明胶
Nippi致力于胶原研究，研究胶原蛋白已有半个多世纪，并成功开发了低内毒素浓度的胶原试剂和明胶试剂。Nippi可以提供胶原、明胶试剂产品及其相关支持，以满足其应用于从基础研究到临床研究的需求。
什么是内毒素？
内毒素是组成革兰氏阴性菌细胞壁的脂多糖（Lipopolysaccharide），简称为LPS，是具有代表性的热原（pyrogen），即使只有pg（10-12 g）或ng（10-9 g）进入血液，也会引起发热、炎症等各种生理反应。此外，内毒素具有极高的耐热性，需要在250℃以上干热灭菌30 min以上才能完全灭活，一旦混入，就难以去除。因此，直接给药体内的药物、医疗器械、以及再生医疗等产品需从原材料开始尽量减少内毒素的污染。
◆低内毒素胶原
用胃蛋白酶从猪真皮中提取的未变性胶原蛋白，使用Nippi研发的技术可显著降低内毒素（100 EU/g以下）。由于生产过程中包含病毒灭活和过滤步骤，因此适用于in vivo研究。除液体产品外，还可以提供各种形式，如粉末、纤维片等产品。
另外，本产品仅供研究用，其他用途欢迎向我们咨询。
▍ 特点
● 原料使用从SPF猪身上提取的猪皮
● 经胃蛋白酶处理的去端肽胶原
● 低内毒素（100 EU/g以下）
● 已完成病毒清除测试
● 使用0.2 μm过滤器过滤原材料后在超净室生产
● 最后使用0.45 μm过滤器过滤
● 如需定制，还可以提供粉末和纤维片
▍ 用途
● 2D/3D细胞培养基质
● 作为易受内毒素影响的实验中作为基质使用
● 药物传输（DDS)底物的研究应用
▍ 产品分析数据
1. 胶原电泳分析
根据Laemmli法（Nature 227，pp680-685(1970))对纯化胶原（产品）进行电泳。结果显示，产品是高纯度的I型胶原蛋白（95％以上）。
2. 检测变性温度
使用浓度为5 mM的乙酸溶解产品至浓度为0.1 mg/mL，然后以0.25 °C/min的速率从20 °C升温至50 °C。并使用圆二色光谱仪（日本分光，JASCO J600）检测221 nm处圆二色性（circular dichroism）分子的椭圆率变化。
变性温度：42.2 °C
3. 氨基酸组成分析和胶原纯度检测
将产品在6N盐酸，110 °C水解24 h后，使用氨基酸分析仪（Hitachi L-8900）检测各氨基酸的含量。另外，从所得的Hyp量计算胶原量，并求出全部蛋白中的胶原纯度。
氨基酸种类 | 每千个残基的氨基酸残基数 |
Hyp | 99.1 |
Asp | 44.5 |
Thr | 16.3 |
Ser | 31.8 |
Glu | 70.7 |
Pro | 122.9 |
Gly | 335.5 |
Ala | 113.1 |
Cys | 0.2 |
Val | 23.6 |
Met | 4.8 |
Ile | 9.8 |
Tyr | 1.2 |
Phe | 11.7 |
Hyl | 7.7 |
Lys | 29.3 |
His | 5 |
Arg | 51.8 |
Pro+Hyp | 222 |
Lys+Hyl | 37 |
Hyp % | 44.6 |
Hyl % | 20.8 |
胶原纯度：96%
▍ 产品列表
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
Skin collagen, Low endotoxin Porcine skin, Pepsin-solubilized 低内毒素猪皮来源胶原（可溶性胃蛋白酶） | 100 mL |
◆低内毒素明胶
明胶是使胶原蛋白特有的三链螺旋立体结构变性以恢复其天然构象的产物。当纤维状胶原变性时会变得相对可溶。FUJIFILM Wako可提供使用Nippi超净室生产的低内毒素医用猪皮来源High-grade明胶和Medigelatin系列产品。可广泛应用于注射剂用稳定剂、给药基质、再生医学等领域。
▍ 特点
● 猪皮来源
● 冻干品
● 生产过程中过滤灭菌（0.2 μm 过滤）
● 低内毒素 (10 EU/g以下)
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各种明胶对巨噬细胞（小鼠来源）NO产生的影响 | 各种明胶产品的分子量分布 |
HMG-BP：Nippi 低内毒素明胶产品（MediGelatin HMG-BP）
▍ 产品相关
明胶HMG-BP
● 碱处理猪皮明胶
● 可凝胶化（250 g以上的高胶冻强度）
● 等电点（pI）：≈5
● 生产过程包括病毒灭活步骤
● 皮内反应测试阴性/抗原性测试阴性
● 1g、5g包装：符合日本药典“纯化明胶”标准
● 40 g包装：符合日本药典“生产专用”标准（已在日本原薬等登録原簿MF登记（228MF40025））
High-grade明胶系列
APAT
● 酸处理猪皮明胶
● 中等分子量（约60 kDa）的非胶凝明胶
● 符合日本药典“纯化明胶”标准
AP
● 酸处理猪皮明胶
● 小分子量（约8 kDa）非胶凝明胶
● 拥有作为注射用稳定剂的使用实例
● 1g、10g包装：符合日本药典“纯化明胶”标准
● 100 g包装：符合日本药典“生产专用”标准
▍ 产品列表
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
MediGelatin gelatin HMG-BP, M.W.100,000 | 1 g | |
5 g | ||
40 g | ||
High Grade gelatin AP, M.W.8,000±2,000 | 1 g | |
10 g | ||
100 g |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
参考文献
“MediGelatin HMG-BP”
1. | 局部止血剂：明胶双层切片 Takagi T, Tsujimoto H, Torii H, Ozamoto Y, Hagiwara A. Two-layer sheet of gelatin: A new topical hemostatic agent. Asian J Surg. 41, 124-130 (2018) PubMed PMID: 27816406 |
2. | 骨髓来源CD90阳性细胞的培养基质 Kim YK, Nakata H, Yamamoto M, Miyasaka M, Kasugai S, Kuroda S. Osteogenic potential of mouse periosteum-derived cells sorted for CD90 in vitro and in vivo. Stem Cells Transl Med. 5, 227-234 (2016) PubMed PMID: 26718647 |
3. | 防粘连材料：热交联明胶膜 Tsujimoto H, Tanzawa A, Miyamoto H, Horii T, Tsuji M, Kawasumi A, Tamura A, Wang Z, Abe R, Tanaka S, Yamanaka K, Matoba M, Torii H, Ozamoto Y, Takamori H, Suzuki S, Morita S, Ikada Y, Hagiwara A. Biological properties of a thermally crosslinked gelatin film as a novel anti-adhesive material: Relationship between the biological properties and the extent of thermal crosslinking. J Biomed Mater Res B Appl Biomater. 103, 1511-1518 (2015) PubMed PMID: 25449656 |
4. | 覆膜支架（自膨式人工血管）移植用缓释剂 Watanabe Y, Miyagawa S, Fukushima S, Daimon T, Shirakawa Y, Kuratani T, Sawa Y. Development of a prostacyclin-agonist-eluting aortic stent graft enhancing biological attachment to the aortic wall. J Thorac Cardiovasc Surg. 148, 2325-2334 (2014) PubMed PMID: 25224552 |
5. | 牙周成纤维细胞、间充质基质细胞和原代骨细胞的培养基质 Rungsiyanont S, Dhanesuan N, Swasdison S, Kasugai S. Evaluation of biomimetic scaffold of gelatin-hydroxyapatite crosslink as a novel scaffold for tissue engineering: biocompatibility evaluation with human PDL fibroblasts, human mesenchymal stromal cells, and primary bone cells. J Biomater Appl. 27, 47-54 (2012) PubMed PMID: 21343214 |
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