进一步发展干细胞研究
CultureSure™ CEPT Cocktail(1,000×)
CEPT是美国国立卫生研究院（NIH）开发的小分子混合物。由4种成分组成，并取其组成成分（Chroman 1、Emricasan、Polyamines、Trans-ISRIB）的开头字母命名为“CEPT”。
研究表明，与基于hPSCs的胚状体和类器官形成、单细胞克隆和基因编辑等干细胞研究中所用的现有培养方法相比，CEPT还可改善细胞存活率1-5）。
※ 本产品基于NIH的许可进行生产和销售。
◆特点
● 从DNA损伤等细胞应激中保护ES/iPS细胞，维持细胞结构与功能
● 已进行过滤灭菌的即用型混合溶液
● 已通过内毒素测试以及支原体阴性检测的CultureSure系列
◆测试项目
● 浓度（HPLC）：已通过测试
● 外观：液体
● 内毒素：<3 EU/mL
● 已完成无菌测试
● 已完成支原体阴性测试
◆使用方法
以1/1,000的量添加本品至培养基，充分混合后使用。
※使用注意
● 本产品为冻存品（-20°C）。为避免反复冻融，建议根据使用量分装冻存。
● 溶解时可能会出现沉淀，并非产品质量问题，请直接使用。
（沉淀于37°C下静置1~2 h可能会溶解，请避免反复冷冻和加热。）
◆适用范围
样品：人ES/iPS细胞
应用：
◆性能数据
细胞集落形成能力实验
细胞株 | 人iPS细胞201B7株 |
培养基 | StemSure® hPSC培养基Δ+35 ng/mL bFGF |
涂层 | Matrigel® hESC-Qualified Matrix |
接种细胞数 | 2,000 cells/well、1,000 cells/well（6孔板） |
培养时间 | 8天 |
添加剂 | 细胞接种时分别添加Y-27632、CEPT，过夜后使用不含添加剂的培养基培养 |
【结果】
细胞接种数少时（1,000 cells/well），添加CEPT的组比添加Y-27632的组形成的细胞集落更多。
未分化人iPS细胞的维持确认
添加CEPT时
| 添加Y-27632时
|
Red: rBC2LCN-635（人iPS细胞膜染色）
Blue: DAPI (细胞核染色)
※ BC2LCN是一种对存在与人ES/iPS细胞的膜表面的糖链具有高亲和性的重组凝集素
细胞株 | 人iPS细胞201B7株 |
培养基 | StemSure® hPSC培养基Δ+35 ng/mL bFGF |
涂层 | Matrigel® hESC-Qualified Matrix |
接种细胞数 | 5,000 cells/well（12孔板） |
培养时间 | 7天 |
添加剂 | 细胞接种时分别添加Y-27632、CEPT，过夜后使用不含添加剂的培养基培养 |
【结果】
添加CEPT时与添加Y-27632时都未观察到细胞形态的差异，均可确认未分化状态的维持。
传代培养时的细胞集落形成能力
细胞株 | 人iPS细胞253G4株 |
培养基 | StemSure® hPSC培养基Δ+40 ng/mL bFGF |
涂层 | Matrigel® hESC-Qualified Matrix |
接种细胞数 | 1,000 cells/well（6孔板） |
培养时间 | 7天 |
添加剂 | 细胞接种时分别添加Y-27632、CEPT，过夜后使用不含添加剂的培养基培养 |
【结果】
在人iPS细胞传代时，将其分别接种至含有Y-27632和CEPT的培养基中。培养7天后，确认到使用CEPT的组比使用Y-27632的组具有更好的细胞集落形成能力。此外，FUJIFILM Wako的CEPT也表现出与其他品牌CEPT 相同的性能。
从冻存中复苏时的细胞集落形成能力
细胞株 | 人iPS细胞253G4株 |
培养基 | StemSure® hPSC培养基Δ＋40 ng/mL bFGF |
涂层 | Matrigel® hESC-Qualified Matrix |
接种细胞数 | 1,000 cells/well（6孔板） |
培养时间 | 7天 |
添加剂 | 细胞接种时分别添加Y-27632、CEPT，过夜后使用不含添加剂的培养基培养 |
【结果】
将冻存的人iPS细胞解冻，分别接种至含有Y-27632和CEPT的培养基中。培养7天后，确认到使用CEPT的组比使用Y-27632的组具有更好的细胞集落形成能力。此外，FUJIFILM Wako的CEPT也表现出与其他品牌CEPT相同的性能。
单细胞克隆中的有效性
细胞株 | 人iPS细胞201B7株 |
培养基 | StemSure® hPSC培养基Δ+35 ng/mL bFGF |
涂层 | Matrigel® hESC-Qualified Matrix |
接种细胞数 | 1 cell/well（96孔板） |
培养时间 | 9天 |
添加剂 | 细胞接种时分别添加Y-27632、CEPT，过夜后使用不含添加剂的培养基培养 |
【结果】
CEPT Cocktail在高应激条件下表现出显著的细胞保护作用，单细胞克隆的克隆效率明显提高。
点击此处下载产品宣传页：CultureSure™ CEPT Cocktail(1,000×)
点击此处下载产品宣传页：iPSC用小分子宣传册
点击此处查看相关产品单页： CEPT Application Note
FAQ
◆产品应用和实验操作
Q1. 可用于制备哪些种类的类器官？
A1. 已有制备大脑、肠道和肾脏类器官的实验数据
Q2. 使用CEPT Cocktail进行3D培养的优点
A2.
l 优化细胞聚集和存活
l 改善重复性
l 细胞分化过程中的应激抑制
l 改善三维结构与自组织
Q3. 用于iPSC的传代时，应何时添加CEPT Cocktail至培养基？
A3. 请在iPSC传代后的最初24 h期间使用添加了CEPT的培养基进行培养。
Q4. 用于复苏iPSC时，应何时添加CEPT Cocktail至培养基？
A4. 请将CEPT Cocktail添加至冻存液进行冻存。细胞复苏，细胞接种后的24 h内都应在含有CEPT Cocktail的培养基中培养。
Q5. 是否有参考文献？
A5. 请参考以下论文：
● | Chen, Y. et al. : Nat. Methods, 18(5), 528 (2021). |
● | Tristan, C.A. et al. : Stem Cell Reports, 16(12), 3076 (2021). |
● | Tristan, C.A. et al. : Nat. Protoc., 18(1), 58 (2022). Efficient and safe single-cell cloning of human pluripotent stem cells using the CEPT cocktail. |
● | Deng, T. et al. : Stem Cell Reports, 18(4), 1030 (2023). |
◆产品相关
Q1. 是否为无动物源溶液？
A1. 本产品为无动物源溶液，如需出具相关证书，请联系富士胶片和光的客服。
参考文献
1） Chen, Y. et al. : Nat. Methods, 18(5), 528 (2021).
2） Tristan, C.A. et al. : Stem Cell Reports, 16, 3076 (2021).
3） Tristan, C.A. et al. : Nat.Protoc., 18, 48 (2022).
4） Deng, T. et al. : Stem Cell Reports, 18, 1030 (2023).
5） Takeshi, W. et al. : Regenerative Medicine, 18(3), 219 (2023).
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 033-26071 | CultureSure™ CEPT Cocktail(1,000×) CultureSure™ CEPT混合物（1,000×） |
300 μL | 细胞培养用 | - |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 197-17571 | StemSure® hPSC Medium Δ StemSure®人多能干细胞培养基 |
100 mL | 细胞培养用 | - |
| 193-17573 | StemSure® hPSC Medium Δ StemSure®人多能干细胞培养基 |
100 mL×4 | 细胞培养用 | - |
| 062-06661 | bFGF Solution, MF 成纤维细胞生长因子溶液（碱性） |
50 μL | 细胞培养用 | - |
| 068-06663 | bFGF Solution, MF 成纤维细胞生长因子溶液（碱性） |
50 μL×4 | 细胞培养用 | - |
| 195-16031 | StemSure® Freezing Medium StemSure® 细胞冻存液 |
100 mL | 细胞培养用 | - |
| 192-19081 | StemSure® hPSC Remover (rBC2LCN-PE38 ) StemSure® hPSC未分化干细胞清除剂 |
100 μL | 细胞培养用 | - |
| 035-24593 | CultureSure™ 10mmol/L Y-27632 Solution, Animal-derived-free CultureSure™ 10mmol/l Y-27632 溶液，无动物源 |
1 mL | 细胞培养用 | - |
| 039-24591 | CultureSure™ 10mmol/L Y-27632 Solution, Animal-derived-free CultureSure™ 10mmol/l Y-27632 溶液，无动物源 |
300 μL | 细胞培养用 | - |
| 259-00613 | Y-27632, MF 选择性强效ROCK抑制剂 |
5 mg | 细胞培养用 | - |
| 257-00614 | Y-27632, MF 选择性强效ROCK抑制剂 |
25 mg | 细胞培养用 | - |
| 030-24021 | CultureSure™ Y-27632 CultureSure™ Y-27632（选择性ROCK抑制剂） |
1 mg | 细胞培养用 | - |
| 036-24023 | CultureSure™ Y-27632 CultureSure™ Y-27632（选择性ROCK抑制剂） |
5 mg | 细胞培养用 | - |
| 034-24024 | CultureSure™ Y-27632 CultureSure™ Y-27632（选择性ROCK抑制剂） |
25 mg | 细胞培养用 | - |
| 030-24026 | CultureSure™ Y-27632 CultureSure™ Y-27632（选择性ROCK抑制剂） |
100 mg | 细胞培养用 | - |
| 免责声明 |
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