进一步发展干细胞研究
CultureSure™ CEPT Cocktail(1,000×)
CEPT是美国国立卫生研究院（NIH）开发的小分子混合物。由4种成分组成，并取其组成成分（Chroman 1、Emricasan、Polyamines、Trans-ISRIB）的开头字母命名为“CEPT”。
研究表明，CEPT可防止人ES/iPS细胞（人多能干细胞；hPSCs）在细胞传代中的细胞应激和DNA损伤1）。与强效ROCK抑制剂Y-27632相似，可提高细胞传代和冻存时hPSCs的存活率。
此外，与基于hPSCs的胚状体和类器官形成、单细胞克隆和基因编辑等干细胞研究中所用的现有培养方法相比，CEPT还可改善细胞存活率1，2，3）。
FUJIFILM Wako已上线经无菌测试且无需制备的即用型CEPT Cocktail溶液。本产品为经过滤器灭菌的溶液，可直接添加至培养基使用。有助于再生医疗研究。
◆特点
● 从DNA损伤等细胞应激中保护ES/iPS细胞，维持细胞结构与功能
● 已进行过滤灭菌的即用型混合溶液
● 已通过内毒素测试以及支原体阴性检测的CultureSure系列
◆测试项目
● 浓度（HPLC）：已通过测试
● 外观：液体
● 内毒素：<3 EU/mL
● 已完成无菌测试
● 已完成支原体阴性测试
◆使用方法
以1/1,000的量添加本品至培养基，充分混合后使用。
※使用注意
● 本产品为冻存品（-20°C）。为避免反复冻融，建议根据使用量分装冻存。
● 溶解时可能会出现沉淀，并非产品质量问题，请直接使用。
（沉淀于37°C下静置1~2 h可能会溶解，请避免反复冷冻和加热。）
◆适用范围
样品：人ES/iPS细胞
应用：
◆性能数据
添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure® hPSC Δ培养基，在37°C，5% CO2的条件下培养人iPS细胞201B7株（6孔板 1 well=9.5cm2）。
培养经过16 h以后，更换不含CEPT或Y-27632的培养基，每2~3天更换培养基，继续培养。
培养第8天时，确认细胞后，使用4%多聚甲醛固定细胞，ALP染色后，计数细胞集落。
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单细胞克隆测试
添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure® hPSC Δ培养基，在37°C，5% CO2的条件下培养人iPS细胞201B7株（96孔板）。
培养经过16 h以后，更换不含CEPT或Y-27632的培养基，每2~3天更换培养基，继续培养。
培养第13天时，确认细胞后，使用4%多聚甲醛固定细胞，ALP染色后，计数形成细胞集落的孔数与空孔数。
通过所有孔数与细胞集落形成孔数之比，计算细胞集落形成率。
【结果】
细胞接种数少时，添加CEPT的组比添加Y-27632的组形成的细胞集落更多。
未分化人iPS细胞的维持确认
【细胞株】人iPS细胞201B7株
【培养基】StemSure® hPSC培养基Δ+35 ng/mL bFGF
Red: rBC2LCN-635（人iPS细胞膜染色）
Blue: DAPI (细胞核染色)
※ BC2LCN是一种对存在与人ES/iPS细胞的膜表面的糖链具有高亲和性的重组凝集素
添加CEPT时
| 添加Y-27632时
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【结果】
添加CEPT时与添加Y-27632时都未观察到细胞形态的差异，均可确认未分化维持状态。
◆产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 产品等级 | 产品规格 |
| 033-26071 | CultureSure™ CEPT Cocktail(1,000×) CultureSure™ CEPT混合物（1,000×） | 细胞培养用 | 300 μL |
相关产品
产品编号 | 产品名称 | 产品等级 | 产品规格 |
StemSure® hPSC Medium Δ | 细胞培养用 | 100 mL | |
100 mL×4 | |||
bFGF Solution, MF | 细胞培养用 | 50 μL | |
50 μL×4 | |||
StemSure® Freezing Medium | 细胞培养用 | 100 mL | |
StemSure® hPSC Remover (rBC2LCN-PE38 ) | 细胞培养用 | 100 μL | |
CultureSure™ 10mmol/L Y-27632 Solution, Animal-derived-free | 细胞培养用 | 1 mL | |
300 μL | |||
Y-27632, MF | 细胞培养用 | 5 mg | |
25 mg | |||
CultureSure™ Y-27632 | 细胞培养用 | 1 mg | |
5 mg | |||
25 mg | |||
100 mg |
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FAQ
◆产品应用和实验操作
Q1. 可用于制备哪些种类的类器官？
A1. 已有制备大脑、肠道和肾脏类器官的实验数据
Q2. 使用CEPT Cocktail进行3D培养的优点
A2.
l 优化细胞聚集和存活
l 改善重复性
l 细胞分化过程中的应激抑制
l 改善三维结构与自组织
Q3. 用于iPSC的传代时，应何时添加CEPT Cocktail至培养基？
A3. 请在iPSC传代后的最初24 h期间使用添加了CEPT的培养基进行培养。
Q4. 用于复苏iPSC时，应何时添加CEPT Cocktail至培养基？
A4. 请将CEPT Cocktail添加至冻存液进行冻存。细胞复苏，细胞接种后的24 h内都应在含有CEPT Cocktail的培养基中培养。
Q5. 是否有参考文献？
A5. 请参考以下论文：
● | Chen, Y. et al. : Nat. Methods, 18(5), 528 (2021). |
● | Tristan, C.A. et al. : Stem Cell Reports, 16(12), 3076 (2021). |
● | Tristan, C.A. et al. : Nat. Protoc., 18(1), 58 (2022). Efficient and safe single-cell cloning of human pluripotent stem cells using the CEPT cocktail. |
● | Deng, T. et al. : Stem Cell Reports, 18(4), 1030 (2023). |
◆产品相关
Q1. 是否为无动物源溶液？
A1. 本产品为无动物源溶液，如需出具相关证书，请联系富士胶片和光的客服。
参考文献
1） Chen, Y. et al. : Nat. Methods, 18(5), 528 (2021).
2） Tristan, C.A. et al. : Stem Cell Reports, 16, 3076 (2021).
3） Tristan, C.A. et al. : Nat.Protoc., 18, 48 (2022).
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