D/L-氨基酸(手性氨基酸)LC/MS 分析用衍生试剂
(R)-BiAC法(手性氨基酸LC/MS分析)
氨基酸是广泛存在于生物体内和自然界中的化合物。它存在着两种对映异构体,即L-氨基酸和D-氨基酸,但几乎主要是以L-氨基酸的形式存在。近年研究表明,微量存在的D-氨基酸与记忆、学习能力等有关1),因此,D-氨基酸与L-氨基酸的分离分析越发重要。
(R)-BiAC是一种衍生化试剂,可用于柱前衍生化法对D/L-氨基酸(手性氨基酸)进行LC/MS分析。使用(R)-BiAC试剂无需使用专用设备,即可高分辨率、短时间(12 min)地进行手性氨基酸分析。
1)Hashimoto, A., Oka, T.: Prog. Neurobiol., 52, 325 (1997).
◆特点
无需专用设备,可使用LC/MS检测手性氨基酸!
使用(R)-BiAC进行柱前衍生化,无需专用设备,使用LC/MS即可检测手性氨基酸。
约12 min即可实现20种D/L氨基酸同时分析!
可短时间内同时分析多种手性氨基酸。
可实现手性氨基酸的高灵敏度检测!
可提高MS的电离效率,还能以atto mol水平的灵敏度检测手性氨基酸。
◆衍生化步骤
试剂制备
(R)-BiAC试剂:(R)-BiAC 5 mg + 乙腈1 mL
硼酸缓冲液:APDS标签硼酸盐缓冲液(产品编号:019-23151)1+乙腈1
衍生化
◆20种氨基酸的手性分析示例1)
LC/MS/MS 色谱图
成分名 | 检测离子(m/z) | 成分名 | 检测离子(m/z) | 成分名 | 检测离子(m/z) |
Ala | 384.1 | Ile | 426 | Thr | 414 |
Arg | 235.2 | Leu | 426 | Trp | 499 |
Asn | 427 | Lys | 368.4 | Tyr | 476 |
Asp | 428.2 | Met | 444 | Val | 412 |
Gln | 441 | Phe | 460.1 | Cys2 | 415.9 |
Glu | 442 | Pro | 410.2 | Gly | 371 |
His | 225.6 | Ser | 400 |
检测条件
[仪器]
Shimadzu Nexera ×2 HPLC System / Sciex Triple Quad™ 6500
[HPLC条件]
色谱柱:YMC Triart-phenyl 2.1 mm × 50 mm (1.9 μm)
柱温:40℃
洗脱剂:A) 0.1% HCOOH in 10 mM HCOONH3 aq., B) CH3CN: H2O= 95︰5
梯度:
Time (min.) | B conc. (%) |
0-3 | 14-16 |
3-5 | 16-28 |
5-9.3 | 28-33 |
9.3-11.0 | 33-50 |
11.0-11.4 | 50-90 |
11.4-12.9 | 90 |
流速:0.4 mL/min
[MS]
模型:SRM
1) 唐川幸聖, 原田真志: 和光純薬時報, 87(1), 5 (2019).
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
012-19851 | Acetonitrile 乙腈 |
1 L | LC/MS用 氨基酸分析用 |
- |
018-19853 | Acetonitrile 乙腈 |
3 L | LC/MS用 氨基酸分析用 |
- |
019-23151 | APDSTAG Wako Borate Buffer APDS标签硼酸盐缓冲液 |
1 L | 氨基酸自动分析用 | - |
063-04533 | Formic Acid (abt. 99%) 甲酸( 约99%) |
1 mL×5A | LC/MS用 | - |
067-04531 | Formic Acid (abt. 99%) 甲酸( 约99%) |
50 mL | LC/MS用 | - |
025-19761 | (R)-BiAC | 5 mg | 氨基酸分析用 | - |
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