LabAssay™ ATX
自分泌运动因子（ATX: Autotaxin）是从人恶性黑色素瘤细胞的培养上清中分离出的一种分子量为125 kDa的糖蛋白，也是一种细胞迁移促进因子。肝纤维化等肝脏疾病会抑制ATX的代谢，从而导致血液ATX水平升高。
本产品可检测血清、血浆、细胞培养上清中的ATX。使用酶标仪即可快速简便地检测样品中的ATX。
※LabAssay™系列是研究用试剂，不可用于诊断。
◆试剂盒组成
150 tests | |
反应液 | 16 mL |
底物溶液 | 1支（8 mL用） |
ATX标准品 | 2支 |
缓冲液 | 5 mL |
反应终止液 | 16 mL |
◆试剂盒性能
物种 | 人、小鼠、大鼠 |
样品 | 血清、血浆（肝素）、细胞培养上清※ |
标准曲线范围 | 1.72-55 U/L |
所需样品量 | 10 μL |
检测时间 | 约40 min |
检测方法 | 显色法（主波长546 nm/副波长700 nm） |
※ 能否检测因培养基而异。当使用细胞培养上清作为样品时，请先对培养基进行加标回收测试或稀释线性实验。
◆标准曲线示例
◆原理
样品中的ATX具有溶血磷脂酶D活性，可水解溶血磷脂酰胆碱，生成胆碱。由此产生的胆碱在胆碱氧化酶（COD）的作用下被氧化，生成过氧化氢。生成的胆碱在胆碱氧化酶（COD）的作用下被氧化，生成过氧化氢。生成的过氧化氢被定量氧化，并在过氧化物酶（POD）的作用下与 N-乙基-N-（3-磺丙基）-3-甲基苯胺（TOPS）和 4-氨基安替比林缩合，生成蓝紫色色素。最后，加入反应终止液终止反应，测量吸光度以确定样品中的ATX活性。
◆数据
精确度测试（批内差异）
使用本产品分别对人、小鼠、大鼠的2种浓度血清、血浆（肝素）样品进行5次重复检测，确认再现性（精确度）。
n＼ID | 人 | 小鼠 | 大鼠 | |||||||||
血清1 | 血清2 | 血浆1 | 血浆2 | 血清1 | 血清2 | 血浆1 | 血浆2 | 血清1 | 血清2 | 血浆1 | 血浆2 | |
1 | 24.5 | 6.31 | 26.3 | 6.75 | 36.4 | 6.64 | 35 | 5.92 | 25.6 | 9.95 | 24.2 | 10.3 |
2 | 24.5 | 6.55 | 26.4 | 6.94 | 37.3 | 6.58 | 35 | 5.92 | 24 | 9.82 | 24 | 10.3 |
3 | 25.1 | 6.44 | 26.8 | 6.89 | 36.3 | 6.73 | 34.9 | 5.97 | 23.9 | 10.2 | 24.7 | 10.6 |
4 | 25.2 | 6.61 | 26.8 | 7.06 | 37.2 | 6.7 | 34.9 | 5.95 | 24.5 | 10 | 24.5 | 10.5 |
5 | 25.1 | 6.43 | 26.7 | 6.86 | 36.2 | 6.66 | 34.9 | 5.93 | 24.5 | 10 | 24.5 | 10.5 |
mean | 24.9 | 6.47 | 26.6 | 6.9 | 36.7 | 6.66 | 34.9 | 5.94 | 24.5 | 10 | 24.4 | 10.4 |
SD | 0.35 | 0.12 | 0.23 | 0.11 | 0.53 | 0.058 | 0.055 | 0.024 | 0.67 | 0.14 | 0.28 | 0.13 |
CV(%) | 1.4 | 1.8 | 0.88 | 1.6 | 1.4 | 0.86 | 0.16 | 0.4 | 2.8 | 1.4 | 1.1 | 1.3 |
【结果】
人样品的CV（%）为0.88-1.8％，小鼠样品的CV（%）为0.16-1.4％，大鼠样品的CV（%）为1.1-2.8％，结果良好。
再现性测试（批间差异）
使用本产品在4天内分别对3种不同浓度的人、小鼠、大鼠血清、血浆（肝素）样品进行3次重复检测。
检测单位：U/L
Day＼ID | 人 | 小鼠 | 大鼠 | |||||||||||||||
血清1 | 血清2 | 血清3 | 血浆1 | 血浆2 | 血浆3 | 血清1 | 血清2 | 血清3 | 血浆1 | 血浆2 | 血浆3 | 血清1 | 血清2 | 血清3 | 血浆1 | 血浆2 | 血浆3 | |
0 | 24.4 | 18.2 | 13.7 | 26.3 | 18.7 | 14 | 41.1 | 20.6 | 9.88 | 39.8 | 20 | 9.32 | 21.7 | 15.9 | 11.8 | 21.2 | 15.1 | 10.6 |
1 | 24.6 | 18.3 | 13.8 | 26.5 | 18.7 | 14 | 40.9 | 20.4 | 9.82 | 39.5 | 19.9 | 9.31 | 22 | 16 | 11.9 | 21.3 | 15.2 | 10.8 |
2 | 23.6 | 17.5 | 13.8 | 25.4 | 18.3 | 14.6 | 40 | 20.2 | 10.1 | 40.1 | 20.2 | 9.9 | 22.7 | 16.6 | 13 | 22.3 | 15.6 | 11.7 |
3 | 23.6 | 17.5 | 13.8 | 25.4 | 18.3 | 14.6 | 39.4 | 20.1 | 10.1 | 39.4 | 20.1 | 9.88 | 22.8 | 16.9 | 13.1 | 22.5 | 15.7 | 11.8 |
mean | 24.1 | 17.9 | 13.8 | 25.9 | 18.5 | 14.3 | 40.4 | 20.3 | 10 | 39.7 | 20.1 | 9.6 | 22.3 | 16.4 | 12.5 | 21.8 | 15.4 | 11.2 |
SD | 0.53 | 0.43 | 0.05 | 0.58 | 0.23 | 0.35 | 0.79 | 0.22 | 0.15 | 0.32 | 0.13 | 0.33 | 0.54 | 0.48 | 0.7 | 0.67 | 0.29 | 0.61 |
CV(%) | 2.2 | 2.4 | 0.36 | 2.3 | 1.2 | 2.4 | 2 | 1.1 | 1.5 | 0.8 | 0.64 | 3.5 | 2.4 | 2.9 | 5.6 | 3.1 | 1.9 | 5.5 |
【结果】
人样品的CV（%）为0.36%-2.2%、小鼠血清样品的 CV（%）为0.64-3.5%，大鼠血清样品的 CV（%）为1.9-5.6%，所有结果均良好。
稀释线性实验
使用产品附带的标准品稀释液，按倍数稀释2种浓度的人血清/血浆（肝素）、小鼠血清/血浆（肝素）和大鼠血清/血浆（肝素）后，进行检测并确认线性关系（平行检测两次）。
加标回收测试
向人血清/血浆（肝素）、小鼠血清/血浆（肝素）和大鼠血清/血浆（肝素）中添加3种浓度的标准品，并进行加标回收测试（平行检测两次）。
人
添加量(U/L) | 实测值(U/L) | 回收量(U/L) | 回收率(%) | |
血清 | - | 5.95 | - | - |
8.05 | 13.8 | 7.85 | 97.5 | |
24.2 | 28.2 | 22.3 | 92.1 | |
40.3 | 44.9 | 39 | 96.8 | |
血浆 (肝素) | - | 7.29 | - | - |
7.69 | 14.6 | 7.31 | 95.1 | |
23.1 | 28.6 | 21.3 | 92.2 | |
38.5 | 46.9 | 39.6 | 103 |
小鼠
添加量(U/L) | 实测值(U/L) | 回收量(U/L) | 回收率(%) | |
血清 | - | 10.1 | - | - |
6.08 | 16.8 | 6.7 | 110 | |
12.2 | 21.6 | 11.5 | 94.3 | |
24.3 | 32.8 | 22.7 | 93.4 | |
血浆 (肝素) | - | 11.2 | - | - |
6.57 | 17.6 | 6.4 | 97.4 | |
13.1 | 23.8 | 12.6 | 95.9 | |
26.3 | 36.4 | 25.2 | 95.9 |
大鼠
添加量(U/L) | 实测值(U/L) | 回收量(U/L) | 回收率(%) | |
血清 | - | 10.5 | - | - |
7.42 | 18 | 7.5 | 101 | |
14.8 | 24.3 | 13.8 | 93 | |
29.7 | 38.5 | 28 | 94.4 | |
血浆 (肝素) | - | 10.7 | - | - |
7.48 | 18 | 7.3 | 97.6 | |
15 | 24.2 | 13.5 | 90.2 | |
29.9 | 38.1 | 27.4 | 91.6 |
【结果】
均得到良好的回收率。
与其他公司产品的相关性
分别使用本产品和其他公司产品R对同一人血清/血浆（肝素）样品进行检测，确认检测值的相关性。检测方法以各试剂盒的检测操作方法为准。
Sample No. | 血清 | Sample No. | 血浆（肝素） | ||
本产品 (U/L) | 其他公司产品R (ng/mL) | 本产品 (U/L) | 其他公司产品R (ng/mL) | ||
1 | 8.03 | 209 | 15 | 8.49 | 193 |
2 | 8.92 | 202 | 16 | 8.76 | 198 |
3 | 7.1 | 162 | 17 | 7.11 | 156 |
4 | 7.52 | 148 | 18 | 7.13 | 142 |
5 | 6.53 | 133 | 19 | 6.79 | 139 |
6 | 9.29 | 201 | 20 | 9.01 | 200 |
7 | 7.88 | 184 | 21 | 7.6 | 181 |
8 | 7.19 | 176 | 22 | 6.84 | 167 |
9 | 6.44 | 174 | 23 | 6.64 | 168 |
10 | 11.8 | 281 | 24 | 12.1 | 309 |
11 | 6.65 | 140 | 25 | 6.81 | 129 |
12 | 6.65 | 144 | 26 | 6.59 | 137 |
13 | 7.31 | 166 | 27 | 7.17 | 162 |
14 | 7.5 | 145 | 28 | 7.3 | 145 |
红字: 标准曲线范围内可检测的样品及稀释20倍后对范围外的样品进行检测
【结果】
本产品与其他公司产品R之间相关性高。另外，直接使用其他公司产品R对实际样品进行检测时，其数值会超出标准曲线范围，因此需要对所有样品进行稀释。而本产品无需稀释即可在标准曲线范围内进行检测。
关于样品
Q1 使用哪种样品比较合适？
A1 请尽量使用新鲜的血清/血浆样品。如无法在短时间内进行检测，请将样品冷冻保存后进行检测。另外，溶血样品可能对检测值造成影响。
Q2 可以用于细胞培养上清的检测吗？
A2 可以，但加标回收测试中的回收率会因培养基不同而有所差异、稀释线性实验中的高浓度部分也可能会出现高数值。使用细胞培养上清作为样品时，请提前对使用的培养基进行加标回收测试和稀释线性实验。
Q3 使用哪种血浆抗凝剂比较合适？
A3 肝素在正常用量下不会对检测值造成影响，而EDTA会对检测值造成影响，因此请避免使用。
Q4 如何检测超过检测范围上限的样品？
A4 对于超过检测范围上限的样品，请使用生理盐水稀释后再进行检测。将得到的值乘以稀释倍数即可得出检测值。
Q5 抗坏血酸会影响检测值吗？
A5 抗坏血酸低于10 mg/dL时不会对检测值造成影响。
关于试剂盒使用
Q1 使用本试剂盒检测时需要什么器具和装置？
A1 使用本产品时所需的器具和装置如下。
l 微孔板（透明，96 孔）
l 微量移液器
l 恒温水浴锅（37°C）
l 微孔板摇床（混匀仪）
l 酶标仪（546 nm/700 nm吸光度过滤器）
Q2 标准品中应添加多少纯净水？
A2 标准品中添加的纯净水量因批次不同而有所差异，请务必对各个批次进行确认。
请前往以下页面输入批次号进行确认：
https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/purified_water/index.html
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 293-96901 | LabAssay™ ATX | 150 tests | 细胞生物学用 | - |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 297-94601 | LabAssay™ Ammonia LabAssay™ 氨检测试剂盒 |
700 tests | 细胞生物学用 | - |
| 633-51021 | LabAssay™ ALP LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒 |
500 tests | - | - |
| 299-96501 | LabAssay™ HDL-Cholesterol | 100 tests | 细胞生物学用 | - |
| 291-96701 | LabAssay™ LDL-Cholesterol | 100 tests | 细胞生物学用 | - |
| 291-93901 | LabAssay (TM) Creatinine LabAssay™ 肌酐检测试剂盒 |
500 tests | 细胞生物学用 | - |
| 免责声明 |
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