生命科学
化学
分析
仪器
耗材
LabAssay™ HDL胆固醇
LabAssay™ HDL-Cholesterol

0617071937878417.jpg

LabAssay™ HDL胆固醇

LabAssay™ HDL-Cholesterol




胆固醇(Cholesterol)以脂蛋白的微粒形式在体内循环。脂蛋白种类多样,其中HDL(High Density Lipoprotein)可将组织、外周细胞及血液中多余的胆固醇运送到肝脏,防止血液中的胆固醇增加,从而抑制脂质代谢异常及动脉硬化。HDL-胆固醇水平降低常见于冠心病、高脂血症、吸烟、肥胖、糖尿病和肝病患者,同时也是冠心病的主要风险因素之一。


04544497_img01.jpg


本产品可检测血液(血清/血浆)中的HDL-胆固醇,使用微孔板可快速简便地检测样品中的HDL-胆固醇,且无需离心分离脂蛋白。

※LabAssay™ 系列产品仅供实验研究用,不能用于临床诊断。



◆试剂盒性能


  物种

  人、小鼠、大鼠

  样品

  血清、血浆

  标准曲线范围

  6.25-200 mg/dL

  所需样品量

  5 μL

  检测时间

  20 min

  检测法

  显色法 (主波长 600 nm/副波长 700 nm)



◆标准曲线示例


04544497_img02.png



◆原理


第一反应阶段(清除非HDL胆固醇)


前处理液中的亲水基和疏水基可保护样品中的HDL免受胆固醇氧化酶(CO)和胆固醇酯酶(CHE)的影响。此外,HDL以外的脂蛋白,如乳糜微粒(CM)、极低密度脂蛋白(VLDL)和低密度脂蛋白(LDL)(非高密度脂蛋白胆固醇)中的胆固醇会在CO和CHE的作用下分解为脂肪酸和Δ4- 胆甾烯酮,同时生成过氧化氢。而生成的过氧化氢会在过氧化氢酶的作用下被分解为水。


清除非HDL胆固醇.jpg



第二反应阶段(HDL-胆固醇显色)


反应试剂发挥作用时,HDL中的胆固醇在CO和CHE的作用下生成过氧化氢。生成的过氧化氢在过氧化物酶(POD)的作用下会使N-(3-硫代丙基)-3-甲氧基-5-甲基苯胺(HMMPS)和4-氨基安替比林发生定量氧化缩合,生成一种蓝色色素。通过检测这种蓝色的吸光度,可确定样品中的HDL-胆固醇浓度。


HDL-胆固醇显色.jpg



◆数据


精确度测试(批内差异)


使用本产品分别对人、小鼠、大鼠的2种浓度血清样品进行5次重复检测,确认精确度。


n\ID

小鼠

大鼠

ID1 (mg/dL)

ID2 (mg/dL)

ID1 (mg/dL)

ID2 (mg/dL)

ID1 (mg/dL)

ID2 (mg/dL)

1

82.3

33.3

72

21.2

55

21.4

2

82.5

32.2

73.2

20.7

53.5

21.5

3

82.2

32.9

72.1

21.2

54

21.1

4

81.9

33.4

71.4

22.1

54.3

22.8

5

82.2

32.9

72.8

21.3

55.8

22.1

平均值

82.2

32.9

72.3

21.3

54.5

21.8

SD

0.22

0.47

0.71

0.5

0.9

0.68

CV(%)

0.26

1.4

0.98

2.4

1.7

3.1


【结果】

人血清的CV(%)为 0.26-1.4%,小鼠血清的CV(%)为 0.98-2.4%,大鼠血清的CV(%)为 1.7-3.1%,结果良好。

 


再现性测试(批间差异)


使用本产品在4天内分别对3种不同浓度的人、小鼠、大鼠血清样品进行3次重复检测。


Day\ID

小鼠

大鼠

ID1 (mg/dL)

ID2 (mg/dL)

ID3 (mg/dL)

ID1 (mg/dL)

ID2 (mg/dL)

ID3 (mg/dL)

ID1 (mg/dL)

ID2 (mg/dL)

ID3 (mg/dL)

1

79.2

47

25.2

77.7

44.6

26.3

56

39.7

19

2

77.6

45.4

23.6

74.2

42.2

25.2

58.4

39.6

18.2

3

80.5

48.8

24.8

79.9

45.2

26.8

60.5

41.5

19

4

79.2

46.9

25.1

80.5

44.4

26.5

59.1

40.5

18.8

平均值

79.1

47

24.7

78.1

44.1

26.2

58.5

40.3

18.8

SD

1.2

1.4

0.74

2.9

1.3

0.7

1.9

0.88

0.38

CV(%)

1.5

3

3

3.7

3

2.7

3.2

2.2

2


【结果】

人血清样品的CV(%)为 1.5-3.0%、小鼠血清样品的 CV(%)为 2.7-3.7%,大鼠血清样品的 CV(%)为 2.0-3.2%,所有结果均良好。

 


稀释线性试验


使用产品附带的标准品稀释液,按倍数稀释2种浓度的人血清/血浆(EDTA)、小鼠血清/血浆(EDTA)和大鼠血清/血浆(EDTA)后,进行检测并确认线性关系(平行检测两次)。


1117338854384424.jpg


1117338854726292.jpg


1117338854977794.jpg


【结果】

检测范围内均显示出良好的线性关系。

 


加标回收测试

向人血清/血浆(EDTA)、小鼠血清/血浆(EDTA)和大鼠血清/血浆(EDTA)中添加3种浓度的标准品,进行加标回收测试(平行检测两次)。




添加量(mg/dL)

实测值(mg/dL)

回收量(mg/dL)

回收率(%)

血清

-

39.5

-

-

11.3

50.3

10.8

95.6

22.5

61.8

22.3

99.1

28.2

67.1

27.6

97.9

血浆

(EDTA)

-

36

-

-

7.72

43.8

7.8

101

15.4

50.4

14.4

93.5

19.3

54.3

18.3

94.8



小鼠



添加量(mg/dL)

实测值(mg/dL)

回收量(mg/dL)

回收率(%)

血清

-

11.7

-

-

11.8

22.5

10.8

91.5

35.4

47

35.3

99.7

59.1

67.4

55.7

94.2

血浆

(EDTA)

-

10.5

-

-

9.34

19.2

8.7

93.1

28

36.6

26.1

93.2

46.7

54.9

44.4

95.1



大鼠



添加量(mg/dL)

实测值(mg/dL)

回收量(mg/dL)

回收率(%)

血清

-

15.6

-

-

15.6

30

14.4

92.3

31.2

45

29.4

94.2

39.1

51.4

35.8

91.6

血浆

(EDTA)

-

13

-

-

13.2

25.3

12.3

93.2

19.9

32.8

19.8

99.5

33.1

44

31

93.7


【结果】

均得到良好的回收率。

 


实际样品的检测


使用本产品检测人血清/血浆、小鼠(ICR)血清/血浆样品和大鼠(SD)血清/血浆。




样品No.

检测值 (mg/dL)

平均值 (mg/dL)

SD

CV(%)

血清

1

58.2

57.9

58.1

0.2

0.37

2

44.1

45.2

44.7

0.8

1.7

3

45.7

45.7

45.7

0

0

4

35.3

34.3

34.8

0.7

2

5

34.9

34.3

34.6

0.4

1.2

血浆
    (EDTA)

1

104

105

105

0.71

0.68

2

44.7

45.5

45.1

0.57

1.3

3

46.2

46.4

46.3

0.14

0.31

4

34.5

35.3

34.9

0.57

1.6

5

33.4

33.9

33.7

0.35

1.1



小鼠



样品No.

检测值 (mg/dL)

平均值 (mg/dL)

SD

CV(%)

血清

1

74.1

76.2

75.2

1.5

2

2

71.9

71.7

71.8

0.14

0.2

3

77.2

80.3

78.7

2.2

2.8

4

86.5

87.7

87.1

0.85

0.97

5

68.2

69.3

68.7

0.78

1.1

血浆
    (EDTA)

1

40.6

40.3

40.5

0.21

0.52

2

25.5

26

25.8

0.35

1.4

3

50.1

48.6

49.4

1.1

2.1

4

27.2

28.9

28.1

1.2

4.3

5

24.2

25.7

25

1.1

4.3



大鼠



样品No.

检测值 (mg/dL)

平均值 (mg/dL)

SD

CV(%)

血清

1

22.5

20.5

21.5

1.4

6.6

2

31.8

30.7

31.3

0.78

2.5

3

32.7

33.2

33

0.35

1.1

4

22.4

22.5

22.5

0.071

0.31

5

25.5

25.8

25.7

0.21

0.83

血浆
    (EDTA)

1

13.2

13.3

13.3

0.071

0.53

2

13.3

13.1

13.2

0.14

1.1

3

13.1

11.4

12.3

1.2

9.8

4

13.6

13.6

13.6

0

0

5

15.4

16.4

15.9

0.71

4.4



关于样品


Q1 使用哪种样品比较合适?

A1 请尽量使用新鲜的血清/血浆样品,避免使用反复冻融的样品,否则可能会导致脂蛋白变性。


Q2 使用哪种血浆抗凝剂比较合适?

A2 可使用肝素、柠檬酸盐或EDTA,它们在正常的使用量下几乎不会影响检测值。


Q3 如何检测超过检测范围上限的样品?

A3 对于超过检测范围上限的样品,请使用生理盐水稀释后再进行检测。将得到的值乘以稀释倍数即可得出检测值。


Q4 如何检测甘油三酯水平较高(1000mg/dL)的血清样品?

A4 对于甘油三酯水平超过1000mg/dL的血清样品,请使用生理盐水稀释后再进行检测。将得到的值乘以稀释倍数即可得出检测值。

 


关于试剂盒使用


Q1 使用本试剂盒检测时需要什么器具和装置?

A1 使用本产品时所需的器具和装置如下。

● 微孔板(透明,96 孔)

● 微量移液器

● 恒温水浴锅(37°C)

 ● 微孔板摇床(混匀仪)

● 酶标仪(600 nm/700 nm滤光片)


Q2 标准品中应添加多少纯净水?

A2 标准品中添加的纯净水量因批次不同而有所差异,具体请参考试剂盒附带的说明书中的指定量。



产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
299-96501 LabAssay™ HDL胆固醇 
LabAssay™ HDL-Cholesterol
100 tests 细胞生物学用 -

相关产品
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
635-50981 LabAssay (TM) Cholesterol
LabAssay™ 胆固醇
500 tests - -
291-96701 LabAssay™ LDL-Cholesterol
LabAssay™ LDL胆固醇
100 tests 细胞生物学用 -

免责声明

1. 本公司密切关注本网站发布的内容,但不保证发布内容的准确性、完整性、可靠性和最新性等。

2. 本公司不保证使用本网站期间不会出现故障或计算机病毒污染的风险。

3. 无论何种原因,使用本网站时给用户或第三方造成的任何不利或损害,本公司概不负责。此外,对于用户与其他用户或第三方之间因本网站发生的任何交易、通讯

3. 纠纷,本公司概不负责。

4. 本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗,仅可用于科研等非医疗目的。如任何用户将本网站提供的产品和服务用临床诊断或治

4. 疗,以及他特定的用途或行为,本公司概不保证其安全性和有效性,并且不负任何相关的法律责任。

关注微信公众号及时获取最新资讯
生物微信号
化学分析微信号