抗层粘连蛋白抗体，豚鼠
Anti Laminin, Guinea Pig
层粘连蛋白是组成细胞外基质（ECM）的糖蛋白，参与细胞粘附、迁移和增殖等。此外，层粘连蛋白和Ⅳ型胶原蛋白等被认为是基底膜（Basement membrane）的主要组成成分。FUJIFILM Wako可提供多重染色用的豚鼠抗层粘连蛋白抗体。
层粘连蛋白（Laminin）是一种分子量约为900 kDa的糖蛋白，由α、β和γ三个糖链聚集在一起形成十字结构。α链、β链和γ链分别存在多个分子种类，层粘连蛋白的类型根据其组合方式来命名（例如，α1、β1和γ1组成的层粘连蛋白称为层粘连蛋白-111）。
层粘连蛋白是众所周知的细胞外基质 (ECM) ，已知参与细胞粘附、迁移和增殖。特别是，层粘连蛋白和IV型胶原蛋白被认为是基底膜的主要成分。
在中枢神经系中，层粘连蛋白几乎只在血管周边的基底膜中表达，被用作血管的标志物。既往的研究显示，脑血管基底膜内层（内皮侧）含有层粘连蛋白-411和-511，而外层（脑实质侧）含有层粘连蛋白-211和-1111），参与血脑屏障（BBB: Blood-Brain Barrier）的形成与功能。
“抗层粘连蛋白，豚鼠”是豚鼠来源的层粘连蛋白多克隆抗体，可用于免疫组织染色中的多重染色2-6）。
层粘连蛋白的基本构造
基于文献1)作图
◆抗体信息
抗体种类 | 多克隆抗体 |
抗原 | 从Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 小鼠肉瘤的基底膜中分离的层粘连蛋白 |
免疫动物 | 豚鼠 |
组成 | 使用PBS稀释抗血清 |
标记 | 未标记 |
交叉性 | 小鼠、大鼠 |
应用 | 免疫组织化学染色（冰冻切片）1:500 （※ 推荐后固定时间为6h） |
◆Protocol（示例）
1. 灌注固定：使用0.1%柠檬酸钠/PBS灌注除血后，4% PFA灌注
2. 后固定： 4% PFA （推荐6 h）
3. 蔗糖替换：30%蔗糖/PBS（4℃，过夜~约2天）
4. 制备冰冻切片：去除蔗糖后，制备冰冻包埋块，并用低温切片机制备30 μm厚的切片
5. 甘氨酸处理：25 mM甘氨酸PBS（20 min左右）
6. 封闭：5% 正常山羊血清，0.3% Triton X-100/PBS（4℃，过夜）
7. 一抗：抗层粘连蛋白, 豚鼠（1︰500），1% 正常山羊血清，0.3% TritonX-100/PBS（4℃，过夜~2 天）
8. 清洗：0.3% TritonX-100/PBS (5 min×3次)
9. 二抗：Alexa Fluor® 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG (H+L) (1:500) （产品编号： 568-77901)，1% 正常山羊血清，0.3%
TritonX-100/PBS (室温，2 h)
10. 清洗：0.3% TritonX-100/PBS (5 min×3次)
11. 封装： 4℃下避光存储
◆数据
性能数据
▼ 免疫组织染色
| 物种：小鼠 部位：海马体 样品：冰冻切片 抗体浓度：1:500 <数据提供> 京都工艺纤维大学 应用生物学系 宮田老师 |
| 物种：小鼠 部位：延髓最后区 样品：冰冻切片 抗体浓度：1:500 <数据提供> 京都工艺纤维大学 应用生物学系 宮田老师 |
◆FAQ
关于Protocol
Q：使用哪种二抗比较好？
A：FUJIFILM Wako拥有以下二抗的实绩：
Alexa Fluor® 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG (H+L)（Jackson ImmunoResearch公司，产品编号：568-77901）
Alexa Fluor® 594 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG (H+L) （Jackson ImmunoResearch公司, 生产商编号： 106-585-003）
关于应用
Q：可以用于什么动物？
A：已确认可用于小鼠和大鼠，暂未确认是否可用于其他动物。
Q：能识别什么亚型？
A：虽然与各亚型的交叉反应性尚未得到证实，但本抗体使用从Engelbreth-Holm-Swarm (EHS)小鼠肉瘤基底膜中分离的层粘连蛋白作为抗原，因此推测其主要识别层粘连蛋白-111。
参考文献
1. Halder, S. K. et al.: Neural Regen. Res., 18(12), 2557(2023).
The importance of laminin at the blood-brain barrier
2. Morita, S. et al.: Cell Tissue Res., 363, 497(2016).
Heterogeneous vascular permeability and alternative diffusion barrier in sensory circumventricular organs of adult mouse brain
3. Nishikawa, K. et al.: J. Neuroendocrinol., 29(2), (2017).
Structural Reconstruction of the Perivascular Space in the Adult Mouse Neurohypophysis During an Osmotic Stimulation
4. Takagi, S. et al.: J. Neuroimmunol., 331, 74(2019).
Microglia are continuously activated in the circumventricular organs of mouse brain
5. Muneoka, S. et al.: J. Neuroimmunol., 331, 58(2019).
TLR4 in circumventricular neural stem cells is a negative regulator for thermogenic pathways in the mouse brain
6. Murayama, S. et al.: J. Neuroimmunol., 334, 576973(2019).
Activation of microglia and macrophages in the circumventricular organs of the mouse brain during TLR2-induced fever and sickness responses
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 010-28821 | 抗层粘连蛋白抗体，豚鼠 Anti Laminin, Guinea Pig |
50 μL | 免疫化学用 | - |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 012-28521 | Anti Iba1, Rabbit Monoclonal Antibody (6A4), recombinant 抗Iba1，重组兔源单克隆抗体(6A4) |
20 μL | 免疫化学用 | - |
| 018-28523 | Anti Iba1, Rabbit Monoclonal Antibody (6A4), recombinant 抗Iba1，重组兔源单克隆抗体(6A4) |
100 μL | 免疫化学用 | - |
| 019-19741 | Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry) 抗Iba1，兔源（免疫细胞化学用） |
50 μg | 免疫化学用 | - |
| 013-27691 | Anti Iba1, Rabbit(for Paraffin Section) 抗Iba1，兔源（石蜡切片用） |
50 μg | 免疫化学用 | - |
| 016-20001 | Anti Iba1, Rabbit (for Western Blotting) 抗Iba1，兔源（免疫印迹用） |
50 μg | 免疫化学用 | - |
| 016-26461 | Anti Iba1, Rabbit, Biotin-conjugated 抗Iba1，兔源（结合生物素） |
100 μL | 免疫化学用 | - |
| 282-37691 | Anti Iba1, Rabbit, Green Fluorochrome(488)-conjugated (Prototype) 抗Iba1，兔源（结合绿色荧光染料488）（Prototype） |
100 μL | 免疫化学用 | - |
| 011-28013 | Anti Iba1, Rabbit, SPICA DyeTM 568-conjugated 抗Iba1，兔源多克隆抗体（结合SPICA Dye™ 568） |
10 μL | 免疫化学用 | - |
| 015-28011 | Anti Iba1, Rabbit, SPICA DyeTM 568-conjugated 抗Iba1，兔源多克隆抗体（结合SPICA Dye™ 568） |
100 μL | 免疫化学用 | - |
| 012-28401 | Anti Iba1, Rabbit, SPICA Dye(TM) 594-conjugated 抗Iba1，兔源（结合SPICADye™594） |
100 μL | 免疫化学用 | - |
| 013-26471 | Anti Iba1, Rabbit, Red Fluorochrome(635)-conjugated 抗Iba1，兔源（结合红色荧染料635） |
100 μL | 免疫化学用 | - |
| 011-27991 | Anti Iba1, Goat 抗Iba1，山羊源多克隆抗体 |
100 μL | 免疫化学用 | - |
| 012-26723 | Anti Iba1, Monoclonal Antibody(NCNP24) 抗Iba1，单克隆抗体（NCNP24）（鼠源） |
10 μL | 免疫化学用 | - |
| 016-26721 | Anti Iba1, Monoclonal Antibody(NCNP24) 抗Iba1，单克隆抗体（NCNP24）（鼠源） |
50 μL | 免疫化学用 | - |
| 017-27591 | Anti Human Iba1, Monoclonal Antibody(NCNP27) 抗人Iba1，单克隆抗体（NCNP27）（鼠源） |
10 μL | 免疫化学用 | - |
| 013-27593 | Anti Human Iba1, Monoclonal Antibody(NCNP27) 抗人Iba1，单克隆抗体（NCNP27）（鼠源） |
50 μL | 免疫化学用 | - |
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