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LabAssay™ 游离胆固醇检测试剂盒
生化检测用试剂盒(实验研究用)

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LabAssay™游离胆固醇检测试剂盒




人血液中的胆固醇主要以低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL),以及少量极低密度脂蛋白(VLDL)的形式存在,总胆固醇中约2/3为酯型,1/3为游离型。游离胆固醇是指未与脂肪酸结合的胆固醇,在维持细胞膜柔韧性、信号传递和激素合成中发挥至关重要的作用。游离胆固醇的平衡对维持细胞的正常功能至关重要,其水平异常可作为多种疾病的判断指标。

胆固醇酯一般约占总胆固醇的70%~80%。该比例降低常见于急慢性肝炎、肝硬化、肾病综合征、慢性炎症性疾病等。因此,检测胆固醇酯比值可作为肝实质损伤的评估指标。

本产品是一款用于检测样本中游离胆固醇的试剂盒。采用微孔板法,可快速简便地定量检测样本中的游离胆固醇。

【注意】LabAssay™系列仅供实验研究用,不可用于疾病诊断



检测原理


向样本中加入显色试剂后,样本中的游离胆固醇在胆固醇氧化酶(CO)的作用下被氧化,同时生成过氧化氢。生成的过氧化氢在过氧化物酶(POD)的催化作用下,与DAOS和4-氨基安替比林发生定量氧化缩合反应,生成蓝色醌类色原。通过检测该蓝色色原的吸光度,即可计算出样本中的游离胆固醇浓度。


 03142_img17 拷贝.jpg


◆试剂盒性能


  检测对象及样本

  人血清/血浆(EDTA,肝素)
  小鼠 血清/血浆(EDTA,肝素)
  小鼠 血清/血浆(EDTA,肝素)
  大鼠 血清/血浆(EDTA,肝素)
  犬 血清/血浆(EDTA,肝素)
  猫 血清/血浆(EDTA,肝素)
  培养基(D-MEM,RPMI)

  标准曲线范围

  10-233 mg/dL

  样本量

  10 μL

  检测时间

  约20分钟

  检测波长

  600 nm


※ 对添加标准品的培养基作为添样本进行验证

检测可行性因培养基、细胞种类和培养条件等因素而异。使用细胞培养上清作为样本时,请在实验前,在所用培养基中进行加标回收试验和稀释线性试验。



标准曲线示例


2017739901531984.png



选择LabAssay™游离胆固醇检测试剂盒的四个理由


1. 仅需少量样本即可快速检测!

    仅需10 μL样本量,支持动态监测和多项目检测!检测时间仅需20分钟! 

2. 支持多种样本类型

    除人样本外,已积累小鼠、大鼠、犬、猫及培养基的评估数据!

3. 检测结果与自动化设备用试剂高度相关

4. 可计算胆固醇酯比值



◆数据


批内精密度试验


使用本产品,分别对两种不同浓度的人血清/血浆(EDTA)样本进行5次检测,评估试剂精密度。


n\ID

人血清

人血浆(EDTA)

ID1(g/dL)

ID2(g/dL)

ID3(g/dL)

ID4(g/dL)

1

35.3

145

39.8

137

2

36.1

146

39.4

140

3

35.9

145

39.9

139

4

35.5

146

39.8

140

5

35.5

146

39.4

138

mean

35.7

145.6

39.7

138.8

SD

0.329

0.548

0.241

1.3

CV(%)

0.9

0.4

0.6

0.9


【结果】

人血清的CV值(%)为0.4-0.9%,人血浆(EDTA)的CV值为0.6-0.9%,批内精密度良好。



批间精密度试验


使用本产品,连续4天对两种不同浓度的人血清/血浆(EDTA)进行重复性检测,确认批间精密度。


Day\ID

人血清

人血浆(EDTA)

ID9(g/dL)

ID10(g/dL)

ID11(g/dL)

ID12(g/dL)

1

152

51.2

119

39.1

2

151

52.7

121

41.2

3

152

51.2

127

40.3

4

145

53.6

123

41.8

mean

150

52.2

123

40.6

SD

3.37

1.18

3.42

1.17

CV(%)

2.2

2.3

2.8

2.9


【结果】

人血清的CV值(%)为2.2-2.3%,人血浆(EDTA)的CV值为2.8-2.9%,批间精密度良好。



稀释线性测试


使用产品附带的标准品稀释液,对人,小鼠,大鼠,犬,猫的血清/血浆(EDTA),以及添加了标准品的D-MEM培养基,RPMI培养基倍比稀释后,进行双重复检测,确认线性。


2017739946866914.jpg

2017739947073920.jpg

2017739947302118.jpg

2017739947468023.jpg

2017739947725294.jpg

2017739947914866.jpg

2517744192852056.jpg

2017739948777283.jpg

2017739948308235.jpg

2017739950266044.jpg

2017739951795019.jpg

2017739951996691.jpg


【结果】

所有样本在检测范围内均呈现良好的线性。



加标回收试验


分别向人,小鼠,大鼠,犬,猫的血清/血浆(EDTA)以及培养基(D-MEM,RPMI)中添加三种浓度的标准品,并进行双重复检测。


人 样本

2317742357645886.png

小鼠(BALB/c)样本

2317742358137925.png

大鼠(SD大鼠)样本

2317742358256637.png

犬(比格犬)样本

2317742358405133.png

猫(日本猫)样本

2317742358545082.png

培养基

2317742358682873.png


【结果】

所有样本均呈现良好的回收率。



与全自动生化分析仪用试剂的相关性


使用本产品(LabAssay™游离胆固醇)和全自动生化分析仪用试剂,对人血清/血浆(EDTA)中的游离胆固醇进行检测,并确认相关性。


2017739978109428.png


【结果】

确认LabAssay™游离胆固醇和全自动生化分析仪用试剂的检测值呈高度相关性。



样本检测实例


小鼠(BALB/c)样本

2317742502723904.png


大鼠(SD大鼠)样本

2317742503509008.png

犬(比格犬)样本

2317742504165020.png

猫(日本猫)样本

2317742504375504.png



胆固醇酯比值计算示例 


使用LabAssay™ 游离胆固醇(本产品)与 LabAssay™ 总胆固醇(产品编号:293-93601),可计算血液中的胆固醇酯比值(酯比)。酯比是指胆固醇酯占总胆固醇的百分比。由于胆固醇酯可通过总胆固醇值减去游离胆固醇值计算得出,因此酯比可按以下公式计算。下表为人、小鼠、大鼠、犬、猫样本的计算结果示例。


【计算公式】

2317742462974904.png



人 样本

2317742479615941.png


小鼠(BALB/c)样本

2317742483412920.png

大鼠(SD大鼠)样本

2317742483583204.png


犬(比格犬)样本

2317742483797222.png

猫(日本猫)样本

2317742483966274.png


※ 总胆固醇使用本公司LabAssay™ 胆固醇检测试剂盒(产品编号293-93601)检测。


FAQ



关于样本


Q:建议使用何种血浆抗凝剂?

A:EDTA,肝素,柠檬酸盐均可使用。正常用量对检测值几乎无影响。

 


Q:如何检测超过上限值的样本?

A:超检测上限的样本请用生理盐水进行稀释。稀释后的样本检测值乘以稀释倍数即为检测值。

 


Q:干扰物质(如溶血,乳糜,抗坏血酸,胆红素等)是否存在影响?

A:溶血样本的检测值仅供参考。当干扰物质浓度低于下表所示范围,检测值的波动在5%以内。


干扰物质的影响

溶血

≤50 mg/dL无影响

乳糜

≤500 FTU无影响

抗坏血酸

≤50 mg/dL无影响

胆红素-F

≤10 mg/dL无影响

胆红素-C

≤25 mg/dL无影响

 

 

关于试剂盒的使用


Q:使用本产品检测时所需的器具和设备?

A:使用本产品时,需要准备以下器具和设备

● 透明96孔微孔板

● 微量移液器

● 移液枪

● 微量离心管

● 恒温箱(37°C)

● 微孔板振荡器(孔板混匀仪)

● 微孔板读数仪(吸光度540 nm滤光器)

 


Q:应如何使用标准品?

A:本产品不同批次需添加的纯化水量不同。请根据《标准品原液制备》所写的纯化水的量溶解标准品,溶解后请当天使用。(请勿保存)

 


Q:请说明各试剂的保存方法以及大致使用期限。

A:显色试剂:一瓶显色剂溶解于一瓶缓冲液后即可使用,开封后可于2-10°C保存四周。

      标准品:可直接使用。开封后请在2-10°C保存。配置的各浓度标准液请尽快使用,请勿保存。



产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
297-98501 LabAssay(TM) Free Cholesterol
LabAssay(TM)游离胆固醇检测试剂盒
350 tests 细胞生物学用

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