组织分散酶 DISPASE® I、DISPASE® II
DISPASE® 是切断肽链的中性、非极性氨基酸N 末端的金属蛋白酶,能够把上皮细胞从组织上剥离成片状。以前技术人员一直把它用于原代培养的细胞分离以及分散。近年,在再生医学和组织工程的领域上也有广泛应用,可以和胶原酶配合使用。此酶分离细胞迅速有效又温和,细胞能保持完整,不会给细胞膜带来伤害,无动物源原料,不含支原体或动物病毒污染,对于血清成分、酶浓度、处理事件、温度、pH非常稳定。
DISPASE®Ⅰ | DISPASE® Ⅱ | |
特性 | 结晶酶,无菌产品 | 粉末酶,非无菌产品 |
包装 | 6小瓶 | 1 g |
酶活性 | 10,000-13,000 PU/小瓶 | 300,000-360,000 PU/g |
添加剂等 | 含有醋酸钙 | 含有糊精和醋酸钙 |
储存·有效期 | 生产后在2~10℃下可储存2年(未开封); 开封溶解后请冻存在-20℃以下,并在6个月内使用。 |
◆优点、特色
● DISPASE® 是来源于Paenibacillus sp. (旧名:Bacillus polymyxa )的中性金属蛋白酶。活性中心有Zn2+,比Ca2+ 稳定。
● 酶活性几乎不受血清成分影响,因此不论是否有血清,都可以使用本产品。同时可简单地通过添加EDTA或者稀释反应液来停止酶反应。
● 可以很好地分解构成基底膜的Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白,让上皮细胞从组织上剥离成片状。
● 与胰蛋白酶、胶原酶等蛋白酶的作用不同,造成的细胞损伤更少,可温和地分散细胞。
● 由于作用条件的范围广泛,可以在不同的酶浓度、处理时间、温度以及pH 条件下,使酶发生作用。
● 细胞培养温度一般在37℃,酶在此温度下非常稳定。根据细胞种类的不同,可以往培养基里添加本产品,进行悬浮培养。
● 本产品不含支原体。
● 本产品没有使用动物源原料。
◆案例、应用
酶浓度 | 100 ~ 2,000 PU/mL |
溶解液 | 含有Ca2+ 的缓冲液或者培养基(可含有血清) |
反应时间 | 30 分钟~几天 |
反应温度 | 室温~ 37℃ |
反应pH | 6.5 ~ 9.0 |
抑制因子 | EDTA, Fe3+, Fe2+, Ni2+, Cu2+, Al3+, Zn2+ |
※ 1PU 的定义是使用酪蛋白分解法1 分钟内分离1 微克酪氨酸的酶活性。
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1.Matsumura T, et al. Jpn. J. Exp. Med. 45, 377-382 (1975).
2.Matsumura T, et al. Jpn. J. Exp. Med. 45, 383-392 (1975).
3.Rheinwald JG, et al. Cell. 6, 317-330 (1975).
4.Green H, et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 76, 5665-5668 (1979).
5.Kawakita T,et al. Invest. Ophthalmol. vis. Sci. 50, 4611-4617 (2009).
6.Kitano Y, et al. Br J Dermatol. 108, 555-560 (1983).
7.Thomson J.A, et al. Science. 282, 1145-1147 (1998).
8.Yan X, et al. Stem Cells Dev. 19,469-480 (2010).
9.Kurt S. Stenn et al. J. Invest. Dermatol. 93, 287-290 (1989).
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
386-02271 | DISPASE® Ⅰ 分散酶® |
1g | 10,000 PU x 6 Vial 培养用 |
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383-02281 | DISPASE® Ⅱ 分散酶®Ⅱ |
1g | 10,000 PU x 6 Vial 培养用 |
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