LabAssay™ Triglyceride
LabAssay™ 甘油三酯检测试剂盒
甘油三酯是由１分子甘油和３分子脂肪酸通过酯键结合而成的中性脂肪。甘油三酯、胆固醇、磷脂、游离脂肪酸和脂溶性维生素作为脂溶性物质存在于血液中。
本产品采用基于N-乙基-N-（２-羟基-３-磺丙基）-３,５-二甲氧基苯胺钠（DAOS）的蓝色显色酶法。通过微孔板法，可检测小鼠血清中甘油三酯的含量，亦可检测人血清中的甘油三酯。
◆检测原理
样品中的甘油三酯在脂蛋白脂肪酶（lipoprotein lipase，简称LPL）的作用下，分解为甘油和脂肪酸。生成的甘油在ATP存在下，通过甘油激酶（GK）的作用，转化为３-磷酸甘油。生成的3-磷酸甘油在3-磷酸甘油氧化酶（glycerol-３-phosphate oxidase，简称GPO）的作用下被氧化，同时生成过氧化氢。生成的过氧化氢在过氧化物酶（POD）的作用下，定量氧化缩合DAOS和４-氨基安替比林，产生蓝色色素。通过测定这种蓝色色素的吸光度，可计算样品中甘油三酯的浓度。
◆试剂盒组成
１．缓冲液（50 mmol/L Good’s buffer（PIPES）、pH=6.5）——105 mL×1瓶
２．显色剂（色原底物）——105 mL用×1瓶
３．标准液（31.2 mg/dL甘油）——4 mL×1瓶
◆试剂盒性能
● 标准曲线范围——100～888 mg/dL（mg/100mL）
● 检测时间——约10 min
● 样品量——2 μL
● 测定波长——主波长600 nm、 副波长700 nm
● 检测对象——小鼠、大鼠、人、猫、狗
● 检测样品——血清、血浆、培养上清
◆标准曲线示例
◆检测操作方法
样品 | 标准 | 空白 | |
显色剂 | 300 μL | 300 μL | 300 μL |
待测物 | 样品 2 μL | 标准溶液 2 μL | － |
充分混合、在37℃加热５min。以空白为对照，测定600 nm※ 处样品和标准溶液的吸光度。 | |||
※ 双波长检测时，主波长600 nm／副波长700 nm。
◆数据
加标回收测试
人样品
样品 | 添加量（mg/dL） | 实测值（mg/dL） | 回收量（mg/dL） | 回收率（%） |
血清 | － | 126 | － | － |
145 | 267 | 141 | 97.2 | |
218 | 323 | 196 | 89.9 | |
291 | 389 | 263 | 90.4 | |
363 | 455 | 329 | 90.6 | |
血浆（EDTA） | － | 136 | － | － |
150 | 276 | 140 | 93.3 | |
225 | 329 | 193 | 85.8 | |
300 | 414 | 278 | 92.7 | |
374 | 460 | 324 | 86.6 | |
血浆（肝素） | － | 135 | － | － |
150 | 269 | 134 | 89.3 | |
226 | 320 | 186 | 82.3 | |
301 | 394 | 260 | 86.4 | |
376 | 457 | 322 | 85.6 |
小鼠样品
样品 | 添加量（mg/dL） | 实测值（mg/dL） | 回收量（mg/dL） | 回收率（%） |
血清 | － | 133 | － | － |
129 | 268 | 136 | 105 | |
194 | 342 | 209 | 108 | |
258 | 409 | 276 | 107 | |
323 | 448 | 315 | 97.5 | |
血浆（EDTA） | － | 139 | － | － |
129 | 288 | 149 | 116 | |
193 | 342 | 203 | 105 | |
258 | 409 | 270 | 105 | |
322 | 446 | 307 | 95.3 | |
血浆（肝素） | － | 151 | － | － |
132 | 292 | 141 | 107 | |
198 | 349 | 198 | 100 | |
264 | 423 | 272 | 103 | |
329 | 442 | 291 | 88.4 |
大鼠样品
样品 | 添加量（mg/dL） | 实测值（mg/dL） | 回收量（mg/dL） | 回收率（%） |
血清 | － | 130 | － | － |
131 | 257 | 127 | 97 | |
196 | 307 | 177 | 90.3 | |
262 | 370 | 240 | 91.6 | |
327 | 413 | 283 | 86.5 | |
血浆（EDTA） | － | 128 | － | － |
135 | 256 | 128 | 94.8 | |
203 | 312 | 183 | 90.1 | |
271 | 374 | 245 | 90.4 | |
338 | 401 | 272 | 80.5 | |
血浆（肝素） | － | 123 | － | － |
134 | 257 | 134 | 100 | |
201 | 305 | 182 | 90.5 | |
268 | 365 | 242 | 90.3 | |
335 | 400 | 278 | 83 |
◆样品检测示例
人血清样品
测定值（mg/dL） | 平均值 | SD | CV（%） | ||
人血清 | 123 | 129 | 126 | 4.2 | 3.3 |
人血浆（EDTA） | 137 | 135 | 136 | 1.3 | 0.92 |
大鼠血清
序号 | 测定值（mg/dL） | 平均值 | SD | CV（%） | |
1 | 54.5 | 53.1 | 53.8 | 1 | 1.9 |
2 | 153 | 153 | 153 | 0.41 | 0.27 |
3 | 105 | 95.8 | 100 | 6.4 | 6.3 |
4 | 120 | 125 | 123 | 4.1 | 3.4 |
5 | 102 | 107 | 104 | 3.7 | 3.5 |
大鼠血浆（EDTA）
序号 | 测定值（mg/dL） | 平均值 | SD | CV（%） | |
1 | 56.8 | 64.3 | 60.6 | 5.3 | 8.8 |
2 | 73.2 | 67.2 | 70.2 | 4.3 | 6.1 |
3 | 95.1 | 85.5 | 90.3 | 6.8 | 7.5 |
4 | 68.5 | 63.8 | 66.2 | 3.3 | 5 |
5 | 76.2 | 68.9 | 72.5 | 5.1 | 7.1 |
小鼠血清
序号 | 测定值（mg/dL） | 平均值 | SD | CV（%） | |
1 | 80.8 | 77.9 | 79.3 | 2 | 2.6 |
2 | 78.4 | 76.7 | 77.6 | 1.2 | 1.6 |
3 | 81.3 | 75.6 | 78.4 | 4.1 | 5.2 |
4 | 57.4 | 60.3 | 58.8 | 2 | 3.5 |
5 | 48.7 | 53.3 | 51 | 3.3 | 6.4 |
小鼠血浆（EDTA）
序号 | 测定值（mg/dL） | 平均值 | SD | CV（%） | |
1 | 28.8 | 31.7 | 30.2 | 2 | 6.7 |
2 | 132 | 145 | 139 | 9.5 | 6.9 |
3 | 62.7 | 68 | 65.4 | 3.8 | 5.8 |
4 | 29.5 | 25.8 | 27.6 | 2.6 | 9.5 |
5 | 58.8 | 55.1 | 56.9 | 2.7 | 4.7 |
◆稀释线性度测试
人血清
大鼠血清
小鼠血清
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参考文献
1. | Gao, F. et al. : Evid. Based Complement. Alternat. Med., 2015, 801291 (2015). ※大鼠肝组织提取物 |
2. | Funakoshi, T. et al. : Biochem. Biophys. Rep., 13, 39 (2018). ※大鼠原代肌肉卫星细胞 |
3. | Moser, V. A. and Pike, C. J. : eNeuro, 4, e0077-17 (2017). ※小鼠血浆 |
4. | Fujii, N. et al. : Aging Cell, 16, 508 (2017). ※大鼠血浆 |
5. | Wang, F. et al. : J. Mol. Endocrinol., 52, 133 (2014). ※大鼠血浆 |
6. | Kato, H. et al. : J. Hepatol., 60, 1032 (2014). ※小鼠肝脏提取物 |
7. | Fujimori, K. et al. : Prostaglandins. Other. lipid. Mediat., 94, 96 (2011). ※小鼠培养细胞提取 |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 291-94501 | LabAssay™ Triglyceride LabAssay ™ 甘油三酯检测试剂盒 |
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