ISOHAIR
ISOHAIR 100次用量
从人的毛发及指甲提取DNA 是法医领域一项非常重要的技术。该技术可以简单迅速地提取DNA，从分子生物学领域来说，与至今一直使用的血液及组织等主要实验材料相比，受病毒感染的可能性较低，获得实验材料途径简单。
ISOHAIR是从人毛发、指甲提取DNA的试剂盒。毛发及指甲的主要成分角蛋白，难以分解，完全溶解毛发必须使用含有一般蛋白质分解酶缓冲剂，进行长时间的孵化。本产品只需30分钟左右，即可完全溶解毛发。操作简单，而且总时间仅需1小时左右即可提取DNA。提取人基因组DNA也非常方便。此外，本产品亦可用于提取小鼠体毛及指甲DNA。
◆特点
• 可从人的毛发及指甲提取 DNA
• 操作简单，提取 DNA 仅需１小时左右
• 亦可提取小鼠体毛及指甲DNA
◆产品列表
保存方法
冷冻保存（-20°C）
ISOHAIR （10回用、100回用） | |||
产品 | 容量 （10次用量） | 容量 （100次用量） | 备注 |
Extraction Buffer | 1 mL x 2 | 20 mL x 1 | 可能会有白色结晶析出，但是不影响品质。若有此情况出现，请进行50℃的热水浴，待结晶完全溶解后即可使用。 |
Enzyme Solution | 100 µL x 1 | 1 mL x 1 | |
Lysis Solution | 80 µL x 1 | 0.8 mL x 1 | |
Ethachinmate | 20 µL x 1 | 0.2 mL x 1 | |
3M Sodium Acetate (pH5.2) | 200 µL x 1 | 2 mL x 1 | |
TE (pH8.0) | 200 µL x 1 | 1 mL x 2 | |
◆使用实例
操作流程
◆实验数据
下表实例的详细情况请参考 ISOHAIR实验数据汇总（PDF 744 KB）。
[人 毛发] | 1. 检测出线粒体 DNA 2. 检测出 p53 基因 3. 检测 MCT118 4. 使用 T4 gene 32 protein，缓和 PCR 阻碍 5. 从毛发提取到的 DNA 量 6. 毛发的部位及 DNA 量 7. 脱毛后经过时间及 DNA 量 8. PCR 条件 |
[人 指甲] | 1. 检测出线粒体 DNA 2. 检测出 p53 基因 3. 检测 MCT118 |
[小鼠 体毛] | 1. 检测出线粒体 DNA 2. 检测出 p53 基因 |
[小鼠 指甲] | 1. 检测出线粒体 DNA 及 p53 基因 |
[人的毛发、指甲、口腔粘膜] | 1. 使用人的毛发、指甲、口腔粘膜进行实验的实例 |
◆备注
• 本产品为实验研究用试剂。请勿用于医疗或其他用途。
• 感谢独立行政法人水产综合研究中心中央水产研究所 小林敬典老师的指导。
Q： DNA 提取试剂盒「ISOHAIR」与「ISOHAIR EASY」的区别是什么？
A： 「ISOHAIR」与「ISOHAIR EASY」的区别如下表所示。ISOHAIR EASY 可从发根简单地提取 DNA，必须使用有发根的样品。
ISOHAIR | ISOHAIR EASY | |
样品 | ・人毛发： 前2～6 cm。（亦可使用自然脱落的毛发） 使用指甲钳剪取指甲，再使用剪刀剪取边约1 mm的缘部分， 剪取2个（0.5 mg）左右。 使用剪刀剪取一撮(约5 mg)体毛。 剪取1～2 mm长度的指甲。 | ・人的发根： 脱落的毛发可能无法提取足够的核酸。）
|
操作用时 | ・约１小时 | ・约 30 分钟 |
提取结果 | ・溶解毛发
| ・使用 ISOHAIR EASY 进行孵化时，肉眼看不出变化。 （肉眼看上去还没有溶解，实际上已有 DNA 析出） |
Q： 可以从牛毛提取 DNA 吗？
A： 使用「ISOHAIR」提取牛（荷斯坦牛、黑毛和牛）的头顶部分的毛发根部１cm处的DNA，取提取到的DNA的1/2进行了琼脂糖凝胶电泳。
成功提取了可用于 PCR 的 DNA。
参考文献
[ 1 ] Wilson, M. R. Polanskey, D. Butler, J., Dizinno, J. A. Replogle, J. and Budowle, B. BioTechniques, 18 (4), 662-669(1995)
[ 2 ] 笠井賢太郎,「蛋白质 核酸 酶」, 41 (5), 738-743(1996)
[ 3 ] 吉井富夫, 田村一雄, 石山いく夫,「日法医志」, 46 (5), 313-316(1992)
[ 4 ] Higuchi, R. von Beroldingen, C. H. Sensabaugh, G. F. and Erlish, H. A. NATURE, 332 (7), 543-546(1988)
[ 5 ] 吉井富夫, 田村一雄, 谷口高広, 秋山勝則, 石山いく夫,「日法医志」, 47 (4), 323-329(1993)
[ 6 ] Gill, P. Jeffreys, A. J. and Werrett, D. J. NATURE, 318 (12), 577-579(1985)
[ 7 ] 安積順一, 森田匡彦, 美作宗太郎, DNA多态性, 7, 26-28 (1999)
[ 8 ] 辻洋子, 西尾元, 松井清司, 鈴木広一, DNA多态性, 7, 29-33 (1999)
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