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LabAssay™ Cholestrol
LabAssay™ 胆固醇检测试剂盒

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LabAssay™ Cholesterol

LabAssay™ 胆固醇检测试剂盒

血清中的胆固醇浓度与肝脏和肠道中的胆固醇生成、吸收、分解代谢及血液中的脂蛋白代谢密切相关。本产品为基于N-乙基-N-（2-羟基-3-磺丙基）-3,5-二甲氧基苯胺钠（DAOS）的蓝色显色酶法试剂。微孔板法可用于测定小鼠、人血清中的总胆固醇。

◆检测原理

显色试剂作用于样品后，样品中的胆固醇酯类被胆固醇酯酶分解为游离的胆固醇和脂肪酸。生成的胆固醇与原有的游离胆固醇共同被胆固醇氧化酶氧化，同时产生过氧化氢。生成的过氧化氢在过氧化物酶（HRP）的作用下，使得DAOS和4-氨基安替比林进行定量氧化缩合，生成蓝色色素。通过测定这种蓝色色素的吸光度，可计算出样品中总胆固醇的浓度。

◆试剂盒组成

１．缓冲液——150 mL×1瓶

２．显色剂——150 mL用×1瓶

３．标准液——5 mL×1瓶

◆试剂盒性能

●　标准曲线范围：50～592.2 mg/dL（mg/100 mL）

●　测定时间：约10 min

●　样品：血清、血浆（小鼠、大鼠、人）

●　所需样品量：2 μL

●　测定波长：主波长600 nm、副波长700 nm

◆标准曲线示例

◆检测操作方法

微孔板法

根据下表条件，在孔板内进行反应。

	Tests	标准	空白
显色剂	300 μL	300 μL	300 μL
待测物	样品 2 μL	标准溶液 2 μL	－
	充分混合，在37℃加热５min。以空白为对照，测定样品和标准溶液的吸光度。主波长600 nm／副波长700 nm

◆加标回收测试

胆固醇的加标回收测试，将已知含量的标准品加标到人、小鼠、大鼠样品中，n=2。

人样品

人样品	添加量（mg/dL）	测定值（mg/dL）	回收量（mg/dL）	回收率（%）
血清样品	0	166.4
	47.6	219.1	52.6	110.60%
	99.7	276.2	109.7	110.00%
	150.4	326.3	159.9	106.30%
	201.3	378.3	211.9	105.20%
血浆样品（EDTA）	0	130.2
	47.6	181	50.8	106.60%
	99.7	237.8	107.6	107.90%
	150.4	280.5	150.3	100.00%
	201.3	343.2	213	105.80%

小鼠样品

小鼠样品	添加量（mg/dL）	测定值（mg/dL）	回收量（mg/dL）	回收率（%）
血清样品	0	86.1
	47.6	136.1	50	105.00%
	99.7	188.6	102.5	102.80%
	150.4	239.3	153.2	101.90%
	201.3	288.1	202	100.30%
血浆样品（EDTA）	0	35.5
	47.6	84.5	49.1	103.10%
	99.7	134.4	98.9	99.20%
	150.4	188.9	153.5	102.10%
	201.3	230.6	195.1	96.90%

大鼠样品

大鼠样品	添加量（mg/dL）	测定值（mg/dL）	回收量（mg/dL）	回收率（%）
血清样品	0	69.9
	47.6	121.5	51.6	108.30%
	99.7	161.8	91.9	92.10%
	150.4	220.8	150.8	100.30%
	201.3	276.8	206.9	102.70%
血浆样品（EDTA）	0	42.6
	47.6	91.8	49.2	103.30%
	99.7	137.6	95	95.30%
	150.4	180.1	137.5	91.50%
	201.3	235.8	193.2	96.00%

◆样品检测示例

人血清样品

样品批次	测定值（mg/dL）		平均值（mg/dL）	SD	CV（%）
人血清	191.7	173.6	182.7	12.8	7
人血浆（EDTA）	143.2	143.1	143.2	0.02	0

混合人血清，男性
序号	平均值	SD	CV（%）
1	0.687	0.001	0.2
混合人K2EDTA血浆，男性
序号	平均值	SD	CV（%）
1	※0.352	0.003	0.8

大鼠血清（10%稀释）

序号	测定值（mg/dL）		平均值（mg/dL）	SD	CV（%）
1	60	67.1	63.6	5.03	7.9
2	84.6	89	86.8	3.12	3.6
3	90.7	80.8	85.8	7	8.2
4	82.1	72.3	77.2	6.88	8.9
5	89.3	93.9	91.6	3.24	3.5

大鼠血浆（EDTA）

序号	测定值（mg/dL）		平均值（mg/dL）	SD	CV（%）
1	42.9	38.6	40.8	3.03	7.4
2	59.3	54.3	56.8	3.56	6.3
3	51.1	46.3	48.7	3.38	6.9
4	45.2	40.2	42.7	3.58	8.4
5	59.2	63.7	61.5	3.15	5.1

20% 稀释健康大鼠血清, Sprague Dawley，雄性
序号	平均值	SD	CV（%）
1	※0.300	0	0
2	※0.371	0.004	1.1
3	※0.289	0.017	5.8
4	※0.365	0	0.1
5	※0.382	0.029	7.6

健康大鼠K2EDTA血浆，Sprague Dawley，雄性
序号	平均值	SD	CV（%）
1	※0.333	0.004	1.2
2	※0.356	0.003	0.8
3	※0.325	0.02	6
4	※0.218	0.005	2.6
5	0.515	0.01	1.9

小鼠血清（20%稀释）

序号	测定值（mg/dL）		平均值（mg/dL）	SD	CV（%）
1	95.4	89.3	92.4	4.31	4.7
2	85.3	84.5	84.9	0.58	0.7
3	68.6	71	69.8	1.71	2.5
4	80.9	73.6	77.3	5.22	6.8
5	64.8	66.8	65.8	1.45	2.2

小鼠血浆（EDTA）

序号	测定值（mg/dL）		平均值（mg/dL）	SD	CV（%）
1	41.2	39.1	40.1	1.51	3.8
2	43.7	40.8	42.2	2.01	4.8
3	35.8	38.7	37.2	2.08	5.6
4	43.1	41.4	42.2	1.23	2.9
5	39.3	40.7	40	0.99	2.5

20% 稀释健康小鼠血清，CD-1（ICR），雄性
序号	平均值（mEq/L）	SD	CV（%）
1	1.118	0.001	0.1
2	0.788	0.007	0.9
3	0.715	0.022	3.1
4	0.794	0.002	0.2
5	0.829	0.005	0.6

健康小鼠血浆K2EDTA, CD-1（ICR），雄性
序号	平均值	SD	CV(%)
1	※0.309	0.002	0.6
2	※0.320	0.002	0.6
3	※0.205	0.004	2
4	※0.179	0.008	4.6
5	※0.305	0.017	5.6

健康比格犬EDTA血浆，雄性
序号	平均值（mEq/L）	SD	CV(%)	年龄
1	0.442	0.0033	0.7	4
2	0.427	0.011	2.6	6
3	※0.308	0.0037	1.2	10
4	0.478	0.0123	2.6	12
5	0.473	0.005	1	6
6	※0.367	0.0047	1.2	11
7	0.78	0.0133	1.7	10
8	0.411	0.0387	9.4	12

健康比格犬血清，雄性
序号	平均值（mEq/L）	SD	CV（%）	年龄
1	0.656	0.0027	0.4	4
2	0.665	0.032	4.8	6
3	0.425	0.009	2	6
4	※0.38	0.0057	1.5	11
5	0.882	0.007	0.8	12
6	0.599	0.006	1.1	6
7	1.006	0.0267	2.7	10
8	0.506	0.006	1.2	4

健康短毛猫EDTA血浆，雄性
序号	平均值（mEq/L）	SD	CV（%）	年龄
1	1.099	0.0103	0.9	0.5
2	※0.174	0.0033	2	1
3	※0.241	0.0043	1.7	3
4	※0.320	0.0067	2.2	0.5
5	※0.359	0.006	1.7	3
6	※0.197	0.012	6.2	3
7	※0.215	0.024	11.1	0.5
8	※0.131	0.016	12.3	1

健康短毛猫血清，雄性
序号	平均值(mEq/L)	SD	CV(%)	年龄
1	0.717	0.0117	1.6	3
2	0.635	0.01	1.6	3
3	1.004	0.0053	0.5	6
4	0.981	0.0093	0.9	4
5	0.636	0.017	2.7	6
6	1.193	0.0267	2.3	6
7	1.022	0.0893	8.8	1
8	※0.382	0.0157	4.1	1

◆稀释线性度测试

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※ 产品已更新，旧编号为：294-65801

参考文献

1.	Kobayashi, Y. et al. : J. Pharmacogn. Nat. Prod., online (2015). Effects of Morus alba L. (Mulberry) Leaf Extract in Hypercholesterolemic Mice on Suppression of Cholesterol Synthesis 　※小鼠肝脏提取物
2.	Gao, F. et al. : Evid. Based Complement. Alternat. Med., 2015, 801291(2015). Effect of Keishibukuryogan on Genetic and Dietary Obesity Models　※大鼠肝组织提取物
3.	Yoshioka, H. and Onosaka, S. : Fundam. Toxicol. Sci., 3, 151(2016). Zinc sulfate pretreatment prevents carbon tetrachloride-induced lethal toxicity through metallothionein-mediated suppression of lipid peroxidation in mice　※小鼠血浆
4.	Fujii, N. et al. : Aging Cell, 16, 508　(2017).　Sterol regulatory element-binding protein-1c orchestrates metabolic remodeling of white adipose tissue by caloric restriction※大鼠血浆
5.	Ushio, M. et al. : Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab., 305, E293 (2013). Ezetimibe prevents hepatic steatosis induced by a high-fat but not a high-fructose diet　※小鼠组织提取物
6.	Kobayashi, Y. et al. : Biosci. Biotechnol. Biochem., 74, 2385 (2010). Ameliorative Effects of Mulberry (Morus alba L.) Leaves on Hyperlipidemia in Rats Fed a High-Fat Diet: Induction of Fatty Acid Oxidation, Inhibition of Lipogenesis, and Suppression of Oxidative Stress　※大鼠组织提取物

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
635-50981	LabAssay™ Cholestrol LabAssay™ 胆固醇检测试剂盒	500 tests	for Cellbiology	-

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