ISOGEN、ISOGEN-LS

RNA提取试剂

ISOGEN

（从左到右200 mL，100 mL，50 mL）

ISOGEN

　　ISOGEN是从人、动物、植物及细菌提取RNA试剂。可通过液相分离方法从同一样本中分离DNA及蛋白质。可通过一系列的操作分离RNA、DNA、蛋白质，有助于分析珍贵的样本。操作简单，便于样本数量较多的检测。

　　适用样本：组织、细胞、植物、细菌

ISOGEN-LS

　　ISOGEN-LS是从血液或血清等容量较大（＞100 µL：使用1.5 mL塑料（离心）管进行处理），难以浓缩的液体样本中提取RNA的试剂。是将ISOGEN针对液体试剂进行改良。除了加入到样本的ISOGEN-LS量比不一样以外，得到的结果与使用 ISOGEN时一样。

　　适用样本： 全血、液体样本

◆原理

　　本产品是含有苯酚及硫氰酸胍的均一液体。往样本加入ISOGEN或ISOGEN-LS后使其溶解或均匀化，再加入氯仿进行离心分离，匀浆就会分离成水相、中间相及有机相。水相中只有RNA，DNA及蛋白质存在于中间相及其以下。首先，取出水相，加入异丙醇使RNA沉淀。往剩余的中间相及有机相里加入乙醇使DNA沉淀，加入异丙醇使蛋白质沉淀，从而依次分离出RNA、DNA及蛋白质。

◆特点

　　・主要成分为苯酚及硫氰酸胍的均一溶液

　　・便于液层分离的染色溶液（ISOGEN : 蓝色、ISOGEN-LS : 红色）

　　・可通过一系列的操作分离RNA、DNA、蛋白质

　　・操作简单、迅速 （RNA分离用时: 约1个小时、DNA : +2小时、蛋白质: +2.5小时）

　　・高回收率、组织及培养细胞样本请使用ISOGEN

　　・血液等容量大，难以浓缩的液体样本请使用ISOGEN-LS

◆产品列表

运输方法

　　本品在室温下运输。产品到达后，在2~10℃条件下保存即可正常使用。

◆使用案例

操作步骤

ISOGEN及ISOGEN-LS的操作流程请参考产品说明。

实验数据一览

　　·　取量的标准

　　·　＜ISOGEN＞ISOGEN法与硫氰酸胍-氯化铯（GT-CsCl）超速离心法比较

　　·　＜ISOGEN＞ISOGEN法分离总RNA电泳

　　·　＜ISOGEN＞ISOGEN法分离RNA、DNA及蛋白质Northern、Southern、Western印迹法

　　·　＜ISOGEN-LS＞ISOGEN法分离hepatitis C viral （HCV） RNA的RT-PCR

◆注意事项

　　·　如果您对试剂的基本的知识不了解，请不要使用。

　　·　ISOGEN及ISOGEN-LS是非医疗用医剧毒物（苯酚制剂），请小心操作。

　　·　使用时请穿着适当的防护设备（手套、眼镜等）。

　　·　如果接触皮肤或眼睛，请用大量的水冲洗15分钟或以上，并及时就诊。

　　·　请按照说明书进行操作。

　　·　对于因不按照说明书操作而导致的事故，Nippon Gene不负任何责任。

◆备注

　　本产品是实验研究用试剂，请勿用作医疗用途。

◆资料 Data Sheet

产品手册

　　·　ISOGEN,ISOGEN-LS　产品说明书（H18年7月修订版） （PDF 92KB）

SDS（Safety Data Sheet）

　　·　ISOGEN 　安全标签（PDF）

　　·　ISOGEN-LS 　安全标签（PDF）

◆相关产品

　　·　ISOGEN II total RNA及small RNA抽提试剂　

　　·　ISOGEN with Spin Column RNA抽提试剂

　　·　Ethachinmate 用于从微量样本抽提RNA的酒精沉淀共沉淀剂

　　·　缓冲剂

　　·　Deoxyribonuclease（RT Grade）for Heat Stop

　　·　Deoxyribonuclease（RT Grade）

　　·　DNase I (RNase free)

Q：从革兰氏阳性菌提取RNA的方法

A：总体来说，革兰氏阳性菌的细胞壁较厚，普通的操作流程回收到的RNA的量比革兰氏阴性菌少。因此，使用玻璃珠（0.1 - 0.15 mm）破坏

　   革兰氏阳性菌的细胞壁后，用ISOGEN提取RNA。

　   使用ISOGEN从革兰氏阳性菌抽提RNA - CN.pdf

Q：从酵母提取RNA的方法

A：酵母的细胞壁较厚，仅仅进行普通的ISOGEN/ISOGEN-LS处理，难以回收RNA。因此，使用作用于β -1,3结合的葡萄糖聚合物的 Zymolyase

　   对细胞壁进行溶解，提取RNA。

　   使用ISOGEN／ISOGEN-LS从酵母抽提RNA -CN.pdf

Q：从骨头提取RNA的方法

A：使用ISOGEN从大鼠脊椎提取总 RNA，并检测其回收量及纯度。　　

　   使用ISOGEN从骨头抽提RNA  - CN.pdf

Q：可以分开提取小RNA和高分子RNA吗？

A：本产品无法分开回收小RNA和高分子RNA，但是本产品的升级产品ISOGEN II可以分开回收高分子RNA（＞200 bases）和小RNA

　   （＜200 bases）。

        分离操作流程（前往ISOGEN II 产品页面链接）

参考文献

　　[ 1 ]　Chomczynski, P. and Sacchi, N.: Anal.Biochem., 162, 156 （1987）

　　[ 2 ]　Chomczynski, P.: BioTechniques, 15, 532 （1993）

　　[ 3 ]　Chomczynski, P., Bowser-Finn, R. and Sabatini, N.: The Jounal of NIH Research, 6,83 （1994）

　　[ 4 ]　Chomczynski, P. and Mackey, K., BioTechniques, 19, 942-945 （1995）

License

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