从土壤提取RNA试剂盒
ISOIL for RNA
ISOIL for RNA适用于从土壤样品提取RNA。可利用磁珠对细胞壁较厚的微生物进行强力的破坏，并利用试剂进行溶菌裂解，从而提取其RNA。RNA提取液添加氟化物，可从非火山灰土壤及火山灰土壤提取RNA。进行纯化时，采取有效去除阻碍酶反应的腐殖质等杂质，可简单地纯化出高纯度RNA。提取到的土壤RNA可用于RT PCR-DGGE分析及RT real-time PCR。
本产品十分适合从日本土壤提取RNA，仅需约4小时即可提取大量的高纯度RNA。
使用时，需配合磁珠式破碎装置（适用2 mL试管）使用。
◆特点
• 适用于火山灰土壌（火山灰土等）
• 有效提取高纯度RNA
• 操作用时仅需约4小时
◆产品内容
ISOIL for RNA （50次用量）
产品 | 包装 | 保存 | 备注 |
Beads Tube R （ISOIL for RNA） | 50 瓶 | 室温 | 2 mL容量的试管中含有磁珠。 |
Sodium Silicofluoride Solution | 10 mL × 1 | 室温 | 非医疗用剧毒物 |
Lysis Solution R | 1.25 mL × 3 | 室温 | |
Lysis Solution 20S | 25 mL × 1 | 室温 | Lysis Solution 20S有可能析出白色结晶，不影响其品质及性能。如发生此情况，请65°C条件下，对整个容器进行孵化（适当混合），待结晶完全溶解后使用。 |
Purification Solution R | 25 mL × 1 | 室温 | Purification Solution R有可能析出白色结晶不影响其品质及性能。如发生此情况，请65°C条件下，对整个容器进行孵化（适当混合），待结晶完全溶解后使用。 |
Precipitation Solution R | 35 mL × 1 | 室温（冷藏） | 开封后需冷藏（2～10°C）。Precipitation Solution R较容易发霉，如发现溶液中有浮游物，请停止使用，并购买新的试剂盒。 |
Ethachinmate | 100 μL × 1 | 室温（冷藏） | 开封后需冷藏（2～10°C）。 |
3M Sodium Acetate（pH5.2） | 500 μL × 1 | 室温 | |
TE（pH8.0） | 10 mL × 1 | 室温 | |
Deoxyribonuclease（RT Grade） | 250 units × 1 | -20°C | |
10× DNase（RT Grade）Buffer | 1 mL × 1 | -20°C | |
2 mg/mL BSA Solution | 1 mL × 1 | -20°C |
◆使用例子
操作流程
▶ *1）～*17） 注释请参照产品手册。
操作实例 从英石火山灰土壤提取RNA（电泳结果及RT-PCR）
从8种土壤样品提取RNA。 分别使用ISOIL for RNA从0.5 g、0.25 g的含有英石的火山灰土壤中提取RNA ，配制成溶液（10 μL）后，4.7 μL用于电泳取样后，0.5 g的土壤样品为冷藏（4℃）一周，0.25 g的土壤样品为冷藏（4℃）三周。
从0.5 g的样品提取RNA溶液
▶ 一般情况下，可以从土壤中提取RNA，但有些土壤种类难以提取。
从0.25 g的样品提取RNA溶液
▶ 对于难以从0.5 g样品提取RNA的土壤，减少样品品量，即可回收更多的RNA。
将实验中的0.5 g土壤样品RNA溶液作为模板，使用RT-PCR扩增16S rRNA（约 200 base）将获得的PCR产物进行电泳。
RNA 溶液的RT-PCR
Lane 1 东大弥生农场对照区土壌 （英石火山灰土壤、火山灰土壌）
Lane 2 东大牧场 牧草地 （英石火山灰土壤、火山灰土壌）
Lane 3 筑波 农业环境技术研究所 （英石火山灰土壤、火山灰土壌）
Lane 4 东大田无牧草地 （英石火山灰土壤、火山灰土壌）
Lane 5 草地试验场常年採草地土壌 （灰色低地土、含有一部分火山灰土壌）
Lane 6 千叶农试森林土壌 （英石火山灰土壤、火山灰土壌）
Lane 7 兵库农试森林土壌 （褐色森林土、非火山灰土壌）
Lane 8 富山县 射水市 片口田土壌 （非火山灰土壌）
M RNA Ladder
M11 Marker 11（pUC19/Msp I digest）
▶ 即使是难以从0.5 g样品提取RNA的土壤，也可从RNA 溶液获得RT-PCR产物。
◆备注
• 本产品是实验研究试剂。请勿用于医疗及其他用途。
• 如果您对试剂的基本的知识不了解，请不要使用。
• Sodium Silicofluoride Solution（氟硅酸钠溶液）为非医疗用剧毒物（苯酚制剂），请小心操作
• 使用时请穿着适当的防护设备（手套、眼镜等）。
• 请按照说明书进行操作。
• 对于因不按照说明书操作而导致的事故，Nippon Gene不负任何责任。
License
Nippon Gene 公司正向独立行政法人科学技术振兴机构（JST）申请ISOIL for RNA土壌RNA提取法的专利。土壌RNA的提取法及纯化法已获得JST的认可。
◆资料 Data Sheet
产品手册
· ISOIL for RNA 第一版 （PDF 192 KB）
SDS(Safety Data Sheet)
◆相关产品
· 土壌提取DNA试剂盒 ISOIL for Beads Beating
· 土壌（5g）提取DNA试剂盒 ISOIL Large for Beads ver.2
Q: 按照操作流程进行了DNase 处理，RNA 溶液里有DNA残留。
A: 某些土壤样品难以去除杂质（尤其是英石火山灰土壤），阻碍DNase处理等酶反应。建议使用RNA 提取・纯化试剂盒 ISOGEN II。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 312-07411 | ISOIL for RNA | 50次用量 | - | - |
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