从植物组织提取RNA试剂盒
ISOSPIN Plant RNA
ISOSPIN Plant RNA用于从植物组织提取和纯化RNA。本产品的原理是在离液剂离子条件下，RNA吸附于二氧化硅。无需苯酚和氯仿等有毒有机溶剂。所使用的离心柱最大限度地确保了柱容积，内封的硅胶模确保足够的RNA吸附容量和高洗脱率。
本试剂盒采用离心法去除杂物，在硅胶模上进行 DNase I 处理，提取和纯化高纯度RNA用时仅约１小时。
◆特点
• 高纯度 RNA
离心法去除杂物和硅基质膜上的 DNase I 处理能提取出高纯度RNA。
• 无需使用过滤器
无需使用过滤器样品均匀化或过滤时后。本试剂盒用离心法去除杂物沉淀。
• 无需苯酚、氯仿
无需使用苯酚、氯仿等有毒有机溶剂。
• 包装附有 DNase I
试剂盒内含有 DNase I （RNase free），不需另外购买。
◆产品列表
ISOSPIN Plant RNA (50次用量) | |||
产品 | 容量 | 保存 | 备注 |
PT Extraction Buffer | 30 mL x 1支 | 室温 | |
PT Binding Buffer | 40 mL x 1支 | 室温 | 含乙醇 |
PT Wash1 Buffer | 40 mL x 1支 | 室温 | 含乙醇（清洗液） |
PT Wash2 Buffer | 40 mL x 1支 | 室温 | 含乙醇（清洗液） |
DNase I (RNase free) | 2,000 units x 1支 | -20°C | |
10× DNase I Buffer | 1 mL x 1支 | -20°C | |
ddWater (RNase free) | 1 mL x 8支 | 室温 | 调制DNase I 溶液・洗提 |
离心柱 | 50 支 x 1袋 | 冷藏 | 上端组成：吸附柱 |
运送方法
NIPPON GENE提供直送服务，将室温品和冷藏品的试剂盒、－20°C的产品、放入干冰的泡沫箱一同放入纸箱，在常温下进行运输。
◆使用实例
Data.1 RNA的回收量标准
本产品可提取的RNA的回收量标准如下表。
样品
菠菜（叶） | 0.5 μg RNA/mg 组织 |
青花菜（芽） | 1.0 μg RNA/mg组织 |
卷心菜（种子） | 1.3 μg RNA/mg组织 |
卷心菜（芽） | 1.4 μg RNA/mg组织 |
卷心菜（叶） | 0.1 μg RNA/mg组织 |
竹子（叶） | 0.3 μg RNA/mg组织 |
郁金香（球根） | 0.2 μg RNA/mg组织 |
Data.2 从卷心菜（十字花科）种子及从叶子提取RNA
使用ISOSPIN Plant RNA与其他公司产品按照步骤提取卷心菜的种子（约 4 mg）和叶（约 30 mg）的RNA。用吸收光谱和凝胶电泳对提取出的RNA进行比较。以提取出的总RNA为模板逆进行转录，使用GeneAce SYBRR qPCR Mix α Low ROX对获得的cDNA进行实时qPCR。
实验条件
1. 样品量
・种子（约4 mg）
・叶（约30 mg）
2. 变性凝胶电泳
・凝胶：1% Agarose S（甲醛变性）
・RNA添加量：种子（1 μg）/叶（0.5 μg）
・RNA Ladder：与RNA添加量等量
3. 实时qPCR
・试剂：GeneAce SYBRR qPCR Mix α Low ROX
・装置：ABI 7500 Fast
・模板cDNA：以提取出的总RNA为模板进行逆转录
・扩增片段长度：441 bp
・实验次数： n=3
结果
从吸收光谱结果看，在A230峰值上ISOSPIN Plant RNA比A公司低，说明本产品更能有效去除多糖类杂物（图1）。
卷心菜种子 | 卷心菜叶 |
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图1 吸收光谱 | |
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| 【RNA添加量】 种子（1 μg）／叶子（0.5 μg） 【Marker】 |
图2 变性凝胶电泳 | ||
卷心菜种子 | 卷心菜叶 |
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图3 实时qPCR | |
【试剂】 GeneAce SYBR® qPCR Mix α Low ROX 【模板】 以提取出的总RNA为模板进行逆转录 【装置】ABI 7500 Fast 【扩增片段长度】441 bp 【循环数】n=3 | 红色： ISOSPIN Plant RNA |
Data.3 从竹子（禾本科）愈伤组织提取RNA
竹子愈伤组织
（淡竹培养细胞系Pn(rpc00047)形成）
使用ISOSPIN Plant RNA与其他公司产品，按照步骤对各样品量竹子愈伤组织提取RNA。通过吸收光谱和凝胶电泳对提取出的RNA进行比较。以提取出的总RNA为模板进行逆转录，使用 GeneAce SYBRR qPCR Mix α Low ROX 对获得的 cDNA 进行实时 qPCR。
※本实验使用的竹子愈伤组织由富山县立大学荻田信二郎博士（现公立大学法人县立广岛大学）提供。竹子愈伤组织委托理化学研究所 BioResource Center 获得的淡竹培养细胞系Pn（rpc00047）培养形成的。
实验条件
1. 样品量
① 约 65 mg
② 约 50 mg
③ 约 40 mg
2. 琼脂糖凝胶电泳
・凝胶：0.8% 琼脂糖 S/TAE
・RNA添加量：最终提取量的1/10（5 μL）
・Marker：OneSTEP Marker6（5 μL）
3. 实时qPCR
・试剂：GeneAce SYBR® qPCR Mix α Low ROX
・装置：ABI 7500 Fast
・模板cDNA：以提取的总RNA为模板进行逆转录
・扩增片段长度：197 bp
・循环数： n=3
结果
从吸收光谱结果看，在A230峰值上ISOSPIN Plant RNA比A公司低，说明更能有效去除多糖类杂物（图1）。根据琼脂糖凝胶电泳比较结果显示，ISOSPIN Plant RNA更有效提取出RNA（图2）。
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图1 吸收光谱 | 图2 变性凝胶电泳 |
【凝胶】 0.8% 琼脂糖 S/TAE | 【RNA添加量】 最终提取量的1/10（5 μL） | 【Marker】 OneSTEP Marker6（5 μL） |
| 【试剂】GeneAce SYBR® qPCR Mix α Low ROX 【装置】ABI 7500 Fast 【模板cDNA】以提取出的总RNA为模板进行逆转录 【扩增片段长度】197 bp 【循环数】n=3 |
图3 实时qPCR |
Data.4 从郁金香（百合科）球根中提取RNA
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提取液的粘性状态
左：ISOSPIN Plant RNA
右：B公司产品
使用 ISOSPIN Plant RNA 与B公司产品，按照步骤对郁金香球根（100 mg）提取RNA。通过吸收光谱和凝胶电泳对提取出的RNA进行比较。以提取出的总RNA为模板进行逆转录，使用 GeneAce SYBRR qPCR Mix α Low ROX 对获得的 cDNA 进行实时qPCR。
郁金香球根样品粘性高，提取困难。郁金香球根在液氮中碎成粉末状后，取1.5 mL移至离心管，并在各公司提取Buffer中用研磨棒磨碎，右图将离心管倒置比较溶液的粘性。
实验条件
1. 样品量
100 mg
2. 琼脂糖凝胶电泳
RNA添加量：最终提取量的1/10（5 μL）
结果
ISOSPIN Plant RNA 也能从粘性高的郁金香球根提取出RNA。
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最终提取量的1/10（5 μl） | |
图1吸收光谱 | 图2 琼脂糖凝胶电泳 |
◆备注
· 本产品仅用于实验研究，不能作医药及其他目的使用。
◆资料 Data Sheet
产品指南
SDS(Safety Data Sheet)
宣传册子
·ISOSPIN Plant RNA宣传册子（PDF 2.7MB）
◆相关产品
·Collection Tube（收集管单品套装）
·ISOSPIN Cell & Tissue RNA （提取动物细胞、动物组织的RNA）
·ISOSPIN Plasmid （提取大肠杆菌质粒）
·ISOSPIN PCR Product （纯化PCR产物）
·ISOSPIN Agarose Gel （纯化琼脂糖凝胶的DNA）
·ISOSPIN Blood & Plasma DNA （提取血液、血清、血浆的DNA）
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 310-08171 | ISOSPIN Plant RNA | 50次用量 | - | - |
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