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ISOSPIN Plant RNA
从植物组织提取RNA试剂盒

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ISOSPIN Plant RNA



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  ISOSPIN Plant RNA用于从植物组织提取和纯化RNA。本产品的原理是在离液剂离子条件下,RNA吸附于二氧化硅。无需苯酚和氯仿等有毒有机溶剂。所使用的离心柱最大限度地确保了柱容积,内封的硅胶模确保足够的RNA吸附容量和高洗脱率。
  本试剂盒采用离心法去除杂物,在硅胶模上进行 DNase I 处理,提取和纯化高纯度RNA用时仅约1小时。



◆特点


  • 高纯度 RNA

       离心法去除杂物和硅基质膜上的 DNase I 处理能提取出高纯度RNA。

  • 无需使用过滤器

       无需使用过滤器样品均匀化或过滤时后。本试剂盒用离心法去除杂物沉淀。

  • 无需苯酚、氯仿

       无需使用苯酚、氯仿等有毒有机溶剂。

  • 包装附有 DNase I

       试剂盒内含有 DNase I (RNase free),不需另外购买。



◆产品列表


ISOSPIN Plant RNA (50次用量)

产品

容量

保存

备注

PT Extraction Buffer

30 mL x 1支

室温


PT Binding Buffer

40 mL x 1支

室温

含乙醇

PT Wash1 Buffer

40 mL x 1支

室温

含乙醇(清洗液)

PT Wash2 Buffer

40 mL x 1支

室温

含乙醇(清洗液)

DNase I (RNase free)

2,000 units x 1支

-20°C


10× DNase I Buffer

1 mL x 1支

-20°C


ddWater (RNase free)

1 mL x 8支

室温

调制DNase I 溶液・洗提

离心柱

50 支 x 1袋

冷藏

上端组成:吸附柱
下端组成:收集管



运送方法


  NIPPON GENE提供直送服务,将室温品和冷藏品的试剂盒、-20°C的产品、放入干冰的泡沫箱一同放入纸箱,在常温下进行运输。



◆使用实例


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Data.1 RNA的回收量标准


  本产品可提取的RNA的回收量标准如下表。


样品


菠菜(叶)

0.5 μg RNA/mg 组织

青花菜(芽)

1.0 μg RNA/mg组织

卷心菜(种子)

1.3 μg RNA/mg组织

卷心菜(芽)

1.4 μg RNA/mg组织

卷心菜(叶)

0.1 μg RNA/mg组织

竹子(叶)

0.3 μg RNA/mg组织

郁金香(球根)

0.2 μg RNA/mg组织



Data.2 从卷心菜(十字花科)种子及从叶子提取RNA


  使用ISOSPIN Plant RNA与其他公司产品按照步骤提取卷心菜的种子(约 4 mg)和叶(约 30 mg)的RNA。用吸收光谱和凝胶电泳对提取出的RNA进行比较。以提取出的总RNA为模板逆进行转录,使用GeneAce SYBRR qPCR Mix α Low ROX对获得的cDNA进行实时qPCR。


实验条件


1.  样品量
  ・种子(约4 mg)
  ・叶(约30 mg)

2.  变性凝胶电泳
  ・凝胶:1% Agarose S(甲醛变性)
  ・RNA添加量:种子(1 μg)/叶(0.5 μg)
  ・RNA Ladder:与RNA添加量等量

3.  实时qPCR
  ・试剂:GeneAce SYBRR qPCR Mix α Low ROX
  ・装置:ABI 7500 Fast
  ・模板cDNA:以提取出的总RNA为模板进行逆转录
  ・扩增片段长度:441 bp
  ・实验次数: n=3


结果


  从吸收光谱结果看,在A230峰值上ISOSPIN Plant RNA比A公司低,说明本产品更能有效去除多糖类杂物(图1)。

卷心菜种子

卷心菜叶

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图1 吸收光谱


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【RNA添加量】

  种子(1 μg)/叶子(0.5 μg)


【Marker】
  RNA Ladder(与RNA的添加量等量)
  1% Agarose S(甲醛变性)


图2 变性凝胶电泳


卷心菜种子

卷心菜叶

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图3 实时qPCR


【试剂】

  GeneAce SYBR® qPCR Mix α Low ROX

【模板】

  以提取出的总RNA为模板进行逆转录

【装置】ABI 7500 Fast

【扩增片段长度】441 bp

【循环数】n=3


红色: ISOSPIN Plant RNA
绿色: A公司产品



Data.3 从竹子(禾本科)愈伤组织提取RNA


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竹子愈伤组织

(淡竹培养细胞系Pn(rpc00047)形成)

  

使用ISOSPIN Plant RNA与其他公司产品,按照步骤对各样品量竹子愈伤组织提取RNA。通过吸收光谱和凝胶电泳对提取出的RNA进行比较。以提取出的总RNA为模板进行逆转录,使用 GeneAce SYBRR qPCR Mix α Low ROX 对获得的 cDNA 进行实时 qPCR。


  ※本实验使用的竹子愈伤组织由富山县立大学荻田信二郎博士(现公立大学法人县立广岛大学)提供。竹子愈伤组织委托理化学研究所 BioResource Center 获得的淡竹培养细胞系Pn(rpc00047)培养形成的。



实验条件


1.  样品量
  ① 约 65 mg
  ② 约 50 mg
  ③ 约 40 mg


2.  琼脂糖凝胶电泳
  ・凝胶:0.8% 琼脂糖 S/TAE
  ・RNA添加量:最终提取量的1/10(5 μL)
  ・Marker:OneSTEP Marker6(5 μL)


3.  实时qPCR
  ・试剂:GeneAce SYBR® qPCR Mix α Low ROX
  ・装置:ABI 7500 Fast
  ・模板cDNA:以提取的总RNA为模板进行逆转录
  ・扩增片段长度:197 bp
  ・循环数: n=3


结果


  从吸收光谱结果看,在A230峰值上ISOSPIN Plant RNA比A公司低,说明更能有效去除多糖类杂物(图1)。根据琼脂糖凝胶电泳比较结果显示,ISOSPIN Plant RNA更有效提取出RNA(图2)。


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图1 吸收光谱

图2 变性凝胶电泳


【凝胶】

  0.8% 琼脂糖 S/TAE

【RNA添加量】

  最终提取量的1/10(5 μL)

【Marker】

  OneSTEP Marker6(5 μL)


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【试剂】GeneAce SYBR® qPCR Mix α Low ROX


【装置】ABI 7500 Fast


模板cDNA】以提取出的总RNA为模板进行逆转录


【扩增片段长度】197 bp


【循环数】n=3

图3 实时qPCR




Data.4 从郁金香(百合科)球根中提取RNA


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提取液的粘性状态
左:ISOSPIN Plant RNA
右:B公司产品


  使用 ISOSPIN Plant RNA 与B公司产品,按照步骤对郁金香球根(100 mg)提取RNA。通过吸收光谱和凝胶电泳对提取出的RNA进行比较。以提取出的总RNA为模板进行逆转录,使用 GeneAce SYBRR qPCR Mix α Low ROX 对获得的 cDNA 进行实时qPCR。

  郁金香球根样品粘性高,提取困难。郁金香球根在液氮中碎成粉末状后,取1.5 mL移至离心管,并在各公司提取Buffer中用研磨棒磨碎,右图将离心管倒置比较溶液的粘性。



实验条件


1.  样品量

  100 mg

2.  琼脂糖凝胶电泳
  RNA添加量:最终提取量的1/10(5 μL)


结果


  ISOSPIN Plant RNA 也能从粘性高的郁金香球根提取出RNA。


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 最终提取量的1/10(5 μl)

图1吸收光谱

图2 琼脂糖凝胶电泳



◆备注

  

  · 本产品仅用于实验研究,不能作医药及其他目的使用。





◆资料 Data Sheet


产品指南

  ·ISOSPIN Plant RNA(PDF 299KB)


SDS(Safety Data Sheet)

  ·ISOSPIN Plant RNA (PDF)


宣传册子

  ·ISOSPIN Plant RNA宣传册子(PDF 2.7MB)



◆相关产品


  ·Collection Tube(收集管单品套装)

  ·ISOSPIN Cell & Tissue RNA (提取动物细胞、动物组织的RNA)

  ·ISOSPIN Plasmid (提取大肠杆菌质粒)

  ·ISOSPIN PCR Product (纯化PCR产物)

  ·ISOSPIN Agarose Gel (纯化琼脂糖凝胶的DNA)

  ·ISOSPIN Blood & Plasma DNA (提取血液、血清、血浆的DNA)




产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
310-08171 ISOSPIN Plant RNA 50次用量 - -

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