LBIS® C-Peptide-Mouse (U type)
LBIS® 小鼠 C-肽 ELISA 试剂盒（U 型）
胰岛素是细胞中的单链胰岛素原合成后，形成二硫键，通过酶分解激活，裂解成Ｃ肽与胰岛素。小鼠、大鼠的胰岛素的氨基酸序列相同，但Ｃ肽部分稍有不同。小鼠Ｃ肽１是 29 个氨基酸，２是 31 个的单链肽。Ｃ肽是从胰岛素原分离后，与胰岛素一同分泌生成的。长期以来，人们一直认为Ｃ肽没有生物活性，仅在合成胰岛素过程中，保证Ａ链和Ｂ链正确折叠以及二硫键正确配对时起作用。近年，随着研究的不断深入，证明了Ｃ肽具有多种生物学作用。首先，10－9M 的Ｃ肽能与内皮细胞、肾小管上皮细胞和成纤维细胞表面的Ｇ蛋白偶联受体结合。激活细胞中钙离子依赖性的信号、激活 Na＋-K＋-ATPase、促进内皮细胞的 NO 合成、与受体的结合有立体结构特异性；与胰岛素、胰岛素原、IGF-I、-II、NPY 之间无交叉反应。而且通过对缺少Ｃ肽的Ⅰ型糖尿病患者注射Ｃ肽类药物，能起到增强骨骼肌以及皮肤的血液循环、降低肾小球超滤的风险、抑制白蛋白从尿液中的排泄、改善神经机能的作用。但对身体健康的人来说，这类药物没有此等功效。因此，建议Ⅰ型糖尿病患者可以在注射胰岛素的同时，投放Ｃ肽，有利于防止并发症的发生。
Ｃ肽的Ｃ末端的五肽（27-31）在与受体的结合中起着重要的作用，缺少这部分的 Des（27-31）Ｃ肽就会失去它的作用。这种五肽可以完全取代Ｃ肽和受体的结合，激活 Na+-K+ATPase。有报告指出新生大鼠中 Des（27-31）Ｃ肽的存在量约占Ｃ肽总量的37%，而在成年大鼠中只占8.5%。
Ｃ肽在血液中的寿命是胰岛素的好几倍。在临床上，可以通过测量Ｃ肽在血液中的浓度来观察胰岛素的合成和分泌功能。且Ｃ肽在尿液中多量排除，一定程度上与血液中Ｃ肽的平均值相关，所以也可以通过尿液来检测。
作为人工胰岛中胰岛素分泌的指标，Ｃ肽测量是有效的。由于在培养液中经常添加胰岛素，如果要测量培养后培养液中的胰岛素的话，就不能很好地区别出分泌的胰岛素和添加的胰岛素，必须减掉培养开始时胰岛素的量。这种情况下，如果分泌的胰岛素量过少，测量误差的影响会增大，从而不能做出正确的判断。这时候，如果测量Ｃ肽，因为Ｃ肽与胰岛素是等摩尔分泌的，所以能够正确判断分泌的胰岛素。
本公司的整套产品能够识别Ｃ肽１、２的交叉部分，可以测量Ｃ肽的总量。
◆特点
● 短时间测定（完全反应时间：５小时）
● （标准用量 10 μL）可测
● 使用对环境无害的防腐剂
● 全部试剂均为液体，可直接使用
● 精密的测定密度和高再现性
◆构成
组成 | 状态 | 容量 |
(A) 抗体固相化 96 孔板 | 洗净后使用 | 96 wells（8×12）/1 块 |
(B) 标准溶液（6,000 pg/mL） | 稀释后使用 | 500 μL/1 瓶 |
(C) 缓冲液 | 即用 | 60 mL/1 瓶 |
(D) 抗C-肽抗体生物素结合 | 稀释后使用 | 100 μL/1 瓶 |
(E) 过氧化物・抗生物素蛋白结合物 | 稀释后使用 | 100 μL/1 瓶 |
(F) 显色液（TMB） | 即用 | 12 mL/1 瓶 |
(H) 反应停止液（1M H2SO4）※小心轻放 | 即用 | 12 mL/1 瓶 |
( I ) 浓缩洗净液（10×） | 稀释后使用 | 100 mL/1 瓶 |
封板膜 | 4 张 | |
使用说明书 | 1 份 |
◆样本
小鼠的血清或血浆
10 μL/well（用本品配备的缓冲液稀释后、50 μL 分注在孔板中。）
◆测定范围
46.9~3,000 pg/mL（标准曲线范围）
234.5~15,000 pg/mL（检体量 10 μL 的时候）
◆Validation data
精度测试（组内变异）
样本 | A | B |
1 | 976 | 238 |
2 | 969 | 230 |
3 | 965 | 230 |
4 | 1023 | 235 |
5 | 977 | 231 |
6 | 1018 | 228 |
7 | 1038 | 229 |
8 | 995 | 225 |
mean | 995 | 231 |
SD | 27.7 | 4.10 |
CV(%) | 2.78 | 1.78 |
单位：pg/mL
重复性测试（组间变异）
测量日/检体 | C | D | E |
第0天 | 1502 | 301 | 60.9 |
第1天 | 1500 | 302 | 63.8 |
第2天 | 1499 | 301 | 62.2 |
第3天 | 1501 | 300 | 58.8 |
mean | 1500 | 301 | 61.4 |
SD | 1.12 | 0.66 | 2.13 |
CV(%) | 0.07 | 0.22 | 3.46 |
单位：pg/mL, n=4
加标回收测试
样本F
添加量 | 实测值 | 回收量 | 回收率(%) |
0.00 | 300 | – | – |
265 | 551 | 250 | 94 |
398 | 683 | 382 | 96 |
531 | 827 | 527 | 99 |
单位：pg/mL, n=2
样本G
添加量 | 实测值 | 回收量 | 回收率(%) |
0.00 | 58.2 | – | – |
28.9 | 86.7 | 28.5 | 99 |
38.6 | 98.2 | 40.0 | 104 |
77.4 | 139 | 80.8 | 104 |
单位：pg/mL, n=2
稀释直线性测试
用稀释缓冲液分三次连续稀释２个血清检体的结果，直线回归方程的 R2 是 1.00 。
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参考文献
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| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 635-07239 | （AKRCP-031）LBIS® Mouse C-peptide ELISA kit (U-type) LBIS®小鼠 C-肽 ELISA试剂盒（U型） |
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