mR1ECM（大鼠胚胎体外培养）

　　使用前请保存在4℃，为避免产品质量下降，打开后请一次性使用完。

◆促进排卵与交配

每隔48小时注射血清促性腺激素（PMSG）（150IU / kg /大鼠）和人体绒膜促性腺激素（hCG）（75IU / kg /大鼠）至成熟雌性Wistar大鼠（8-12周龄）腹膜内以诱导超排卵。经人体绒膜促性腺激素（hCG）处理后成熟雌性Wistar大鼠（8-12周龄）与雄鼠交配，第二天，确认阴栓以确保交配成功。交配成功的小鼠将用于试验研究，可在阴栓确认的当天收集原核期胚胎，并在确认成功第二天收集2细胞期胚胎。

◆推荐试验安排时间表

血清促性腺激素（PMSG）：11:00 -13:00

人体绒膜促性腺激素（hCG）：11:00 -13:00（注射血清促性腺激素48h后）

◆采集时间

原核期胚胎：15：00-16：00（阴栓确认当天）

2细胞期胚胎：15：00-16：00（阴栓确认第二天）

◆滴剂准备

将三滴mR1ECM（每滴100μL）滴在培养皿上，然后用液体石蜡覆盖培养皿，使用前将其放在5％CO2培养箱中静置至少30分钟以使气体平衡。

◆胚胎采集（冲洗输卵管）

所有解剖器均用酒精消毒。

◆加热培养基至37℃用于冲卵

（M2产品编号： CSR-R-M083 和 CSR-R-M084 ，PB1产品编号：CSR-R-P138 和CSR-R-P185）

1. 对一只成熟雌性大鼠实施安乐死后，使用剪刀和镊子取出子宫、卵巢与部分脂肪。在滤纸上切除输卵管，并清除血液。

2. 将毛细玻璃管或冲洗针插入需要收集的输卵管伞，并冲卵至培养基。*收集原核阶段受精的卵母细胞时，请用透明质酸酶（终浓度：0.1％）培养基

    用于冲卵（M2或PB1）。

3. 将胚胎转移到mR1ECM滴剂。

4. 最终得到2细胞期胚胎。

相关资料

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mR1ECM

产品编号：CSR-R-M174 规格：10*5ML（每盒装有5瓶5ml 的mR1ECM，共计2盒10瓶） 应用：用于大鼠体外培养 成分：NaCl, KCl, CaCl2, MgCl2, NaHCO3, Na Lactate, Na-Pyruvate, Glucose, PVA, L-Glutamine, Ess AA, Non Ess AA 其他：严格按照ISO 9001（全球质量管理标准）控制生产 注意事项：本产品不适用于以前购买过ARK相关产品的用户。 保存：4℃ 有效期：1年

参考文献：

[1]　She-Hoon Oh et al.,, BIOLOGY OF REPRODUCTION 59, 884.889 (1998)<链接>
[2]　YueZhouetal.,genesis 36:129.133 (2003)<链接>

[3]　Toshihiro Aotoetal.,Transgenic Res 20:1245.1252, DOI 10.1007/s11248-011-9492-z (2011)<链接>