抑制外泌体等细胞外囊泡（EV）的吸附
EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂
实验中导致外泌体等细胞外囊泡（EV: Extracellular Vesicle）减少的原因多种多样，其中，对样品管等实验耗材的吸附是EV损失的主要原因，EV研究的指南《MISEV2023》中也指出，纯化后的EV易吸附于储存容器1）。使用蛋白质低吸附管可有效防止EV吸附样品管2-3），但实验中使用的塑料制品不止样品管，还有移液器枪头和离心管等，要将这些耗材全部替换为低吸附耗材并不容易。
添加保存稳定剂至样品或纯化EV溶液中在可操作性和多功能性方面提供了出色的解决方案。FUJIFILM Wako开发的EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂（产品编号：058-09261）仅需添加至样品或纯化EV溶液中，即可抑制样品管、移液器枪头和离心管上的吸附。另外，本产品也具有保护EV免受冻融损伤的作用。FUJIFILM Wako还提供专用于动物给药和通过TFF纯化EV的EV-Save™ 系列产品。
产品阵容
◆EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定试剂（超滤用）
本产品是一款可抑制EV吸附于样品管或移液枪枪头等实验耗材的聚合物试剂。可抑制实验中以及保存过程中产生的EV损失，从而提高回收率。此外，它还具有保护EV免受冻融伤害的效果。建议在EV的过滤、纯化和保存前添加本产品至样品中。
特点
● 抑制样品管和移液器枪头等的EV吸附
● 保护EV免受反复冻融的损伤
● 操作简便，仅需将EV-Save™（超滤用）直接添加至样品或纯化EV溶液中即可
推荐样品
● 细胞培养上清
● 纯化EV溶液
※ 在血清、血浆和干扰物质含量高的样品中，难以获得理想的防吸附效果。
对实验分析的影响
已确认添加EV-Save™不影响以下实验的外泌体分析：
- Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)
- WB
- ELISA
- 微阵列
- 细胞培养
※ EV-Save™（超滤用）（产品编号：058-09261）含有聚合物。若聚合物会影响后续的实验结果，请勿使用本产品。
数据
▼吸附抑制效果
添加EV-Save™（超滤用）至使用PS亲和法纯化的COLO201细胞来源EV，静置3 min。然后，移至新的样品管中，重复本步骤。使用PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Anti Mouse IgG POD)检测样品管内的EV含量（CD63信号）。 【结果】 将样品移至新样品管时，CD63的信号减弱。但通过添加了EV-Save™（超滤用）几乎完全抑制移液引起的信号减弱。 |
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▼冷冻保护效果
添加EV-Save™（超滤用）至使用PS亲和法纯化的COLO201细胞来源EV后进行冻融。使用PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Anti Mouse IgG POD)检测样品管内的EV含量（CD63信号），使用透射电子显微镜分析EV的形态。
（1）ELISA | （2）电子显微镜 |
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【结果】 未添加EV-Save™（超滤用）的样品冻融后，CD63信号减弱。但通过添加EV-Save™（超滤用）可抑制冻融引起的信号减弱。电子显微镜下也可以观察EV-Save™（超滤用）抑制了粒子数的减少。 | |
◆EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂（in vivo 用）
本产品的组成成分仅使用具有药物添加剂实例的成分，是一款可用于EV给药实验动物的EV吸附抑制剂和冷冻保护剂。
特点
● 抑制样品管和移液器枪头等的EV吸附
● 保护EV免受反复冻融的损伤
● 操作简便，仅需将EV-Save™直接添加至样品或纯化EV溶液中即可
● 组成成分使用可排出体外的分子量以及具有药物添加剂实例的成分
推荐样品
● 细胞培养上清
● 纯化EV溶液
※ 在血清、血浆和干扰物质含量高的样品中，难以获得理想的抗吸附效果
对实验分析的影响
已确认添加EV-Save™不影响以下实验分析的外泌体分析：
- Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)
- WB
- ELISA
- 微阵列
- 细胞培养
※ 超滤时请选择EV-Save™（超滤用）（产品编号：058-09261）
数据
▼吸附抑制效果
添加EV-Save™（超滤用）和EV-Save™（in vivo 用）至PS亲和法纯化的COLO201细胞来源外泌体，在4℃下存储16 h。然后使用PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP)检测样品管内的CD9信号。
【结果】 未添加EV-Save™的样品中，CD9信号减弱，但添加了EV-Save™（超滤用）和EV-Save™（in vivo 用）的样品后可抑制信号减弱。 |
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▼冷冻保护效果
添加EV-Save™（超滤用）和EV-Save™（in vivo 用）至PS亲和法纯化COLO201细胞来源EV，反复冻融1或3次。使用PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP)检测样品管内的EV含量（CD9信号）。
【结果】 未添加EV-Save™的样品中，冻融后CD9信号减弱。但添加EV-Save™（超滤用）和EV-Save™（in vivo 用）后可抑制信号减弱。 |
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◆EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂（TFF用）
切向流过滤法（TFF）作为一种高效的方法被用于细胞外囊泡（EV）浓缩和缓冲液置换。TFF通过将样品与滤膜平行流动来防止样品在滤膜上堆积，尽可能地减少样品损失。另外，EV等易吸附的样品由于膜吸附和过滤操作中的物理应力，回收率可能会降低。
本产品旨在通过减轻TFF处理过程中的物理应力以及膜的吸附来提高EV回收率。使用本产品可实现高效、稳定的EV回收。
特点
● 抑制使用TFF进行EV纯化、浓缩和缓冲液置换过程中的EV损伤和EV对滤膜的吸附
● 操作简便，仅需向样品添加本产品和平衡缓冲液
● 本产品可防止因吸附于试管而导致的EV损失，并防止冻融损伤，过滤后(TFF)的EV溶液可以直接保存。
（注：仅在缓冲液交换过程中添加本产品才能达到此效果）
推荐样品
● 纯化的EV
● 细胞培养上清
※ 在血清、血浆和杂志含量高的样品中，难以获得理想的防吸附效果。
性能数据
▼提高缓冲液置换过程中纯化的 EV 的回收率
使用MassivEV™ EV Purification Column PS（产品编号：131-19491）从骨髓来源间充质干细胞（BMMSC）和脂肪组织来源间充质干细胞（ADMSC）的细胞培养上清中纯化EV。然后，使用Repligen的TFF系统，更换添加了本产品1/100量的HBS 缓冲液进行缓冲液交换。使用PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒（链霉亲和素HRP）（产品编号：298-80601，检测抗体使用抗CD63或抗CD81抗体），评估缓冲液置换后的EV回收率。，EV粒子粒径分布则使用Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)进行检测。
（1）ELISA
【结果】
通过添加本产品，可以观察到基于TFF置换缓冲液中EV的回收率升高。
（2）NTA
【结果】
添加本产品后，纯化EV粒子粒径分布并未观察到明显变化。
▼提高基于TFF从细胞培养上清中纯化EV的回收率
使用TFF将细胞培养上清浓缩20倍，然后用100倍的缓冲液进行置换。将本品以1/100的量添加至细胞培养上清液和置换缓冲液中。使用CD63和CD81的ELISA试剂盒检测EV的回收率，使用Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)检测EV粒子粒径分布。
(1) ELISA
【结果】
通过添加本产品，可以观察到从细胞上清中纯化EV的回收率有所提升。
(2) NTA
【结果】
添加本产品后， EV的粒子粒径分布并未观察到明显变化。
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点击此处查看相关产品页面：EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂（TFF用）
参考文献
1. Welsh, J. A. et al.: J. Extracell. Vesicles, 13(2), e12404(2024).
Minimal information for studies of extracellular vesicles (MISEV2023): From basic to advanced approaches
2. Evtushenko, E. G. et al.: PloS One, 15(12), e0243738(2020).
Adsorption of extracellular vesicles onto the tube walls during storage in solution
3. 吉岡祐亮、落谷孝広編: 「決定版エクソソーム実験ガイド」, p.51 (羊土社) (2020).
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 058-09261 | EV-Save™ Extracellular Vesicle Blocking Reagent EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂（超滤用） |
1 mL | 基因研究用 | - |
| 050-09461 | EV-Save™ Extracellular Vesicle Blocking Reagent for in vivo EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂（动物体内实验用） |
1 mL | 基因研究用 | - |
| 059-09671 | EV-Save™ Extracellular Vesicle Blocking Reagent for TFF EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂（TFF用） |
20 mL | 基因研究用 | - |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 294-84101 | MagCapture(TM) Exosome Isolation Kit PS Ver.2 MagCapture™外泌体提取试剂盒PS Ver.2 |
2 Tests | 基因研究用 | - |
| 290-84103 | MagCapture(TM) Exosome Isolation Kit PS Ver.2 MagCapture™外泌体提取试剂盒PS Ver.2 |
10 Tests | 基因研究用 | - |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 293-96401 | MagCapture (TM) EV Isolation Kit PS for HTS HTS用MagCapture™ EV提取试剂盒PS |
96 Tests | 基因研究用 | - |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 131-19491 | MassivEV™ EV Purification Column PS MassivEV™ 细胞外囊泡（EV）纯化分离柱 PS |
1 mL | 基因研究用 | - |
| 137-19493 | MassivEV™ EV Purification Column PS MassivEV™ 细胞外囊泡（EV）纯化分离柱 PS |
5 mL | 基因研究用 | - |
| 295-96601 | MassivEV™ Purification Buffer Set MassivEV™ 细胞外囊泡（EV）纯化缓冲液套装 |
1mL×10回用(5mL×2回用) | 基因研究用 | - |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 294-84601 | microRNA Extractor(R) Kit for Purified EV 纯化细胞外囊泡（EV）用miRNA提取试剂盒 |
20 Tests | 基因研究用 | - |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 297-79201 | PS Capture(TM) Exosome ELISA Kit (Anti Mouse IgG POD) PS Capture™外泌体ELISA试剂盒（抗小鼠IgG POD） |
96 Tests | 基因研究用 | - |
| 298-80601 | PS Capture(TM) Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP) PS Capture™外泌体ELISA Kit （链霉亲和素HRP） |
96 Tests | 基因研究用 | - |
| 296-83701 | CD9-Capture Human Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP) CD9-Capture 人外泌体ELISA试剂盒（链霉亲和素HRP） |
96 Tests | 基因研究用 | - |
| 290-83601 | CD63-Capture Human Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP) CD63-Capture 人外泌体ELISA试剂盒（链霉亲和素HRP） |
96 Tests | 基因研究用 | - |
| 292-83801 | CD81-Capture Human Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP) CD81-Capture 人外泌体ELISA试剂盒（链霉亲和素HRP） |
96 Tests | 基因研究用 | - |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 297-79701 | PS Capture™ Exosome Flow Cytometry Kit PS Capture™外泌体流式试剂盒 |
300 Tests | 基因研究用 | - |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 014-27763 | Anti CD9, Monoclonal Antibody (1K) 抗CD9单克隆抗体（1K） |
100 μL | 免疫化学用 | - |
| 013-27951 | Anti CD9, Rat Monoclonal Antibody (30B) , Biotin Conjugated | 20 μL | 免疫化学用 | - |
| 019-27953 | Anti CD9, Rat Monoclonal Antibody (30B) , Biotin Conjugated | 100 μL | 免疫化学用 | - |
| 013-28171 | Anti CD9, Rat Monoclonal Antibody(77B) | 20 μL | 免疫化学用 | - |
| 019-28173 | Anti CD9, Rat Monoclonal Antibody(77B) | 100 μL | 免疫化学用 | - |
| 017-28211 | Anti CD9, Rat Monoclonal Antibody(77B), Biotin-conjugated | 50 μL | 免疫化学用 | - |
| 012-27063 | Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13) 抗CD63单抗（3-13） |
100 μL | 免疫化学用 | - |
| 019-27713 | Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13), Biotin Conjugated 抗CD63单克隆抗体（3-13），生物素偶联 |
100 μL | 免疫化学用 | - |
| 014-27643 | Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13), Fluorescein Conjugated 抗CD63，单克隆抗体（3-13），荧光素结合 |
100 Tests | 免疫化学用 | - |
| 011-27751 | Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13), Red Fluorochrome(635) Conjugated 抗CD63单克隆抗体（3-13），红色荧光染料（635）偶联 |
25 Tests | 免疫化学用 | - |
| 017-27753 | Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13), Red Fluorochrome(635) Conjugated 抗CD63单克隆抗体（3-13），红色荧光染料（635）偶联 |
100 Tests | 免疫化学用 | - |
| 011-27773 | Anti CD81, Monoclonal Antibody (17B1) 抗CD81单克隆抗体（17B1） |
100 μL | 免疫化学用 | - |
| 014-28221 | Anti CD81, Rat Monoclonal Antibody(9B) | 20 μL | 免疫化学用 | - |
| 010-28223 | Anti CD81, Rat Monoclonal Antibody(9B) | 100 μL | 免疫化学用 | - |
| 011-28111 | Anti CD81, Rat Monoclonal Antibody (9B), Biotin-conjugated | 50 μL | 免疫化学用 | - |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 343-09661 | ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 外泌体膜染色荧光试剂盒（Green） |
5 samples | 基因研究用 | - |
| 340-09671 | ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red 外泌体膜染色荧光试剂盒（Red） |
5 samples | 基因研究用 | - |
| 347-09681 | ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Deep Red 外泌体膜染色荧光试剂盒（Deep Red） |
5 samples | 基因研究用 | - |
| 344-09691 | ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 外泌体蛋白质荧光染色试剂盒（Green） |
5 samples | 基因研究用 | - |
| 347-09701 | ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red 外泌体蛋白质荧光染色试剂盒（Red） |
5 samples | 基因研究用 | - |
| 344-09711 | ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Deep Red 外泌体蛋白质荧光染色试剂盒（Deep Red） |
5 samples | 基因研究用 | - |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 052-09301 | Exosomes, from COLO201 cells, purified COLO201来源外泌体（已纯化） |
50 μL | 基因研究用 | - |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 132-19345 | MSCultureTM High Growth Basal Medium MSCulture™ 生长用基础培养基 |
500 mL | 细胞培养用 | - |
| 133-19331 | MSCultureTM High Growth Supplement MSCulture™ 生长用补充剂 |
5 mL | 细胞培养用 | - |
| 053-09451 | EV-Up(TM) EV Production Basal Medium for MSC, AF EV-Up™ 间充质干细胞外泌体生产用基础培养基，无动物源成分 |
95 mL | 细胞培养用 | - |
| 298-84001 | EV-Up(TM) MSC EV Production Supplement, AF EV-Up™ 间充质干细胞外泌体生产用添加剂，无动物源成分 |
100 mL用 | 细胞培养用 | - |
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