生命科学
化学
分析
仪器
耗材
EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂(TFF用)

EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂(TFF用)0117540403445623.jpg





切向流过滤法(TFF)作为一种高效的方法被用于细胞外囊泡(EV)浓缩和缓冲液置换。TFF通过将样品与滤膜平行流动来防止样品在滤膜上堆积,尽可能地减少样品损失。另外,EV等而易吸附的样品由于膜吸附和过滤操作中的物理应力,回收率可能会降低。

EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂(TFF用)旨在通过减轻TFF处理过程中的物理应力以及膜的吸附来提高EV回收率。使用本产品可实现高效、稳定的EV回收。



◆特点


● 抑制使用TFF进行EV纯化、浓缩和缓冲液置换过程中的EV损伤和EV对滤膜的吸附

● 操作简便,仅需向样品添加本产品和平衡缓冲液

● 本产品可防止因吸附于试管而导致的EV损失,并防止冻融损伤,过滤后(TFF)的EV溶液可以直接保存。

   (注:仅在缓冲液交换过程中添加本产品才能达到此效果)



◆推荐样品


● 纯化的EV

● 细胞培养上清

在血清、血浆和干扰物质含量高的样品中,抗吸附效果可能会降低



◆推荐TFF模块


MicroKros mPES 100 kDa (Repligen,厂家编号:C02-E100-05-N)


已确认可使用以下模块:

● Pellicon XL UF Mod Biomax 100 kD 0.005m2 (Millipore)

● Single-Use Discover 12” 100 kD 0.5 mm (Sartorius)

 

请注意,以下模块无法使用:

● Minimate TFF Capsules with Omega Membrane - 100K (Cytiva)

● TFF-Easy - tangential flow filtration EV concentrator (HansaBio)



◆数据


性能数据


▼提高缓冲液置换过程中纯化的 EV 的回收率


使用MassivEV™ EV Purification Column PS(产品编号:131-19491)从骨髓来源间充质干细胞(BMMSC)和脂肪组织来源间充质干细胞(ADMSC)的细胞培养上清中纯化EV。然后,使用Repligen的TFF系统,更换添加了本产品1/100量的HBS 缓冲液进行缓冲液交换。使用PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(链霉亲和素HRP)(产品编号:298-80601,检测抗体使用抗CD63或抗CD81抗体),评估缓冲液置换后的EV回收率。,EV粒子粒径分布则使用Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)进行检测。


(1)ELISA


图片1.png


【结果】

通过添加本产品,可以观察到基于TFF置换缓冲液中EV的回收率升高。


(2)NTA


0117540347282119.png

Input


0117540348491778.png

未添加本产品


0117540348861697.png

添加本产品


【结果】

添加本产品后,纯化EV粒子粒径分布并未观察到明显变化。



▼提高基于TFF从细胞培养上清中纯化EV的回收率

使用TFF将细胞培养上清浓缩20倍,然后用100倍的缓冲液进行置换。将本品以1/100的量添加至细胞培养上清液和置换缓冲液中。使用CD63和CD81的ELISA试剂盒检测EV的回收率,使用Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)检测EV粒子粒径分布。


(1) ELISA


0117540356309992.png


0117540359985664.png


【结果】

通过添加本产品,可以观察到从细胞上清中纯化EV的回收率有所提升。


(2) NTA


0117540361848062.png

未添加本产品


0117540361846055.png

添加本产品


【结果】

添加本产品后, EV的粒子粒径分布并未观察到明显变化。



▼纯化的EV吸附抑制和冷冻保护效果


(1)吸附抑制效果

分别将EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂(产品编号:058-09261,下文写作“常规产品”)和EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂(TFF用)(下文写作“本产品”)以1/100的量添加至纯化的EV溶液中。之后转移至微管,保存48小时。使用CD63和CD81的ELISA试剂盒检测EV的含量。


0117540370532513.png


0117540370538583.png


(2)冷冻保护效果

使用TFF,从骨髓来源间充质干细胞(BMMSC)的培养上清中纯化EV。将本产品以1/100的量添加至纯化的EV溶液中,然后进行3次冻融(从-20℃至室温)。使用CD63和CD81的ELISA试剂盒检测冻融前后的EV含量。


0117540375851905.png


0117540375856472.png


【结果】

本产品具有吸附抑制效果和冷冻保护效果,是EV保存的理想选择。


点击此处查看相关产品页面


◆FAQ


Q1:这个产品测试过哪些细胞培养基上清类型?

A1:FUJIFILM Wako从以下细胞培养上清中纯化EV并通过TFF进行缓冲液交换,确认到了本产品的吸附抑制效果:

● 骨髓来源间充质干细胞(BMMSC)

● 脂肪细胞来源间充质干细胞(ADMSC)

● HEK293

 

Q2:除HBS缓冲液之外,其他的缓冲液也有吸附抑制效果吗?

A2:在FUJIFILM Wako的产品中,除了HBS缓冲液以外,已确认PBS缓冲液也表现出了同样的吸附抑制效果。



产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
059-09671 EV-Save™ Extracellular Vesicle Blocking Reagent for TFF
EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂(TFF用)
20 mL

相关产品
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
058-09261 EV-Save™ Extracellular Vesicle Blocking Reagent
EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂(超滤用)
1 mL 基因研究用
050-09461 EV-Save™ Extracellular Vesicle Blocking Reagent for in vivo
EV-Save™ 细胞外囊泡保存稳定剂(动物体内实验用)
1 mL 基因研究用

免责声明

1. 本公司密切关注本网站发布的内容,但不保证发布内容的准确性、完整性、可靠性和最新性等。

2. 本公司不保证使用本网站期间不会出现故障或计算机病毒污染的风险。

3. 无论何种原因,使用本网站时给用户或第三方造成的任何不利或损害,本公司概不负责。此外,对于用户与其他用户或第三方之间因本网站发生的任何交易、通讯

3. 纠纷,本公司概不负责。

4. 本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗,仅可用于科研等非医疗目的。如任何用户将本网站提供的产品和服务用临床诊断或治

4. 疗,以及他特定的用途或行为,本公司概不保证其安全性和有效性,并且不负任何相关的法律责任。

关注微信公众号及时获取最新资讯
生物微信号
化学分析微信号