重组蛋白纯化用
亲和标签抗体结合磁珠
◆抗DYKDDDDK tag抗体磁珠
已固定识别DYKDDDDK肽单抗的磁珠悬浮液。可用于检测大肠杆菌、酵母、哺乳动物表达的DYKDDDDK标签融合蛋白。
特点
● 非特异性结合少
● 可回收N端、C端、Internal全部蛋白
● 可用DYKDDDDK肽、SDS溶液洗脱
● 无需离心处理，可减少样品损耗，简单替换溶液
1. 抗DYKDDDDK标签抗体磁珠的性能
| 把各DYKDDDDK tag融合蛋白分别加入细胞溶解液中进行免疫沉淀后，通过Western blotting比较抗原回收量。 经4%SDS样品缓冲液洗脱和SDS-PAGE后，用Western blotting法，加过氧化酶标签抗体（产品编号：015-22391）进行发光检测。 |
2. 洗脱法比较抗原回收性能
| 将DYKDDDDK标签融合蛋白加入细胞溶解液中，分别加入磁珠吸附后，利用各种洗脱法回收抗原量并用Western Blotting法进行比较。 用过氧化酶标签抗体（产品编号：015-22391）进行发光检测。 |
3. 非特异性吸附蛋白的比较
| 在不含DYKDDDDK tag的细胞溶解液中分别添加磁珠并进行免疫沉淀后，比较非特异性吸附蛋白。 用4%SDS样品缓冲液洗脱、电泳后，用银染色、抗小鼠IgG、过氧化酶标签抗体进行Western Blotting比较。 无法检测出非特异性吸附质。 |
产品名称 | 子类 | 规格 | 产品编号 | 包装 |
DYK标签：DYKDDDK | ||||
抗DYKDDDDKtag抗体磁珠 Anti DYKDDDDK tag Magnetic Beads | 小鼠 IgG2b 1E6 | 免疫化学用 | 200 μL | |
2.5 mL | ||||
2.5 mL×5 | ||||
溶液组成：10 mg/mL Anti-DYKDDDDK Magnetic Beads, 1×TBS(pH 7.4), 50 w/v % glycerol, 0.05 w/v % sodium azide | ||||
◆相关产品
内参照
下表为Western Blot实验中参照用单抗一览表。
产品名称 | 规格 | 产品编号 | 包装 |
抗β肌动蛋白单抗 | 免疫化学用 | 200 μg | |
1 mg | |||
5 mg | |||
抗β肌动蛋白单抗,过氧化物酶标记 Anti β-Actin, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated | 免疫化学用 | 200 μL | |
抗α-微管蛋白, 单抗 Anti α-Tubulin, Monoclonal Antibody | 免疫化学用 | 10 μg | |
200 μg | |||
1 mg | |||
Anti β-Tubulin, Monoclonal Antibody | 免疫化学用 | 10 μg | |
200 μg | |||
1 mg | |||
Anti GAPDH, Monoclonal Antibody | 免疫化学用 | 200 μg | |
1 mg | |||
5 mg | |||
Anti GAPDH, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated | 免疫化学用 | 200 μL |
蛋白酶抑制剂系列
产品名称 | 规格 | 产品编号 | 包装 |
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 I，无动物源成分（通用型） Protease Inhibitor Cocktail Set I, Animal-derived-free (for general use) (×100), Lyophilized | 通用型 | 1 mL用 | |
1 mL用×5 | |||
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒III, DMSO溶液（不含EDTA）（×100） | 动物细胞 | 1 mL | |
1 mL×5 | |||
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒V （无EDTA）（×100） | 2D电泳 | 1 mL | |
1 mL×5 | |||
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 VI，DMSO溶液，用于植物（×100） | 植物细胞 | 1 mL | |
1 mL×5 | |||
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒VII，DMSO溶液，组氨酸标签蛋白（×100） | His Tag 纯化※ | 1 mL | |
1 mL×5 |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
亲和标签比较表
亲和标签 | |||
氨基酸序列 | (YPGQ)5V | GVAMPGAEDDVV | HHHHHH |
残基数 | 21 | 12 | 6 |
分子量 (kDa) | 2.34 | 1.16 | 0.84 |
等电点（pI） | 5.52 | 3.49 | 7.21 |
配体 | TARGET tag | PA tag | Ni, Co, Zn, Cu |
亲和珠回收 | 40% Propyleneglycol, | 3M MgCl2, MES(pH6.0) | 0.5M Imididazole(pH7.4) |
单抗边界强度 （KD（M）） | 1.0×10-8 | 4.9×10-10 | Ni-NTA: |
单抗 Clone No. | P20.1(Mouse) | NZ-1(Rat) | Merck:HIS. H8(Mouse) |
亲和力 | ++++ | +++++ | +++ |
提纯成本 | + | + | + |
多肽洗脱 | +++ | +++ | Imidazole |
背景 （培养上清） | + | + | +++++ |
背景 （细胞裂解物） | + | + | ++++ |
亲和标签 | ||||
氨基酸序列 | DYKDDDDK | EQKLISEEDL | YPYDVPDYA | - |
残基数 | 8 | 10 | 9 | 218 |
分子量 (kDa) | 1.01 | 1.20 | 1.10 | 26 |
等电点（pI） | 3.97 | 4.00 | 3.56 | - |
配体 | DYKDDDDK tag | c-Myc tag | HA tag | GST |
亲和珠回收 | Tris-HCl, | Tris-HCl, | Tris-HCl, | Glutathione, |
单抗边界强度 （KD（M）） | 2.8×10-8 | 2.2×10-9 | 2.8×10-9 | Glutathione: |
单抗 Clone No. | M2(Mouse) | 9E10(Mouse) | 3F10(Mouse) | Wako:5A7(Mouse) |
亲和力 | ++++ | ++++ | ++++ | ++++ |
提纯成本 | ++ | ++ | ++ | + |
多肽洗脱 | +++ | ++ | ++ | Glutathione |
背景 （培养上清） | ++++ | +++ | +++ | ++++ |
背景 （细胞裂解物） | ++++ | ++++ | +++ | ++++ |
本比较表为Wako独家调查的数据。样品、检测方法和手法的不同，特异性也会有所变化，因此无法保证各个亲和标签的功能。
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