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亲和性标签抗体结合琼脂糖珠
重组蛋白纯化用

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重组蛋白纯化用

亲和性标签抗体结合琼脂糖珠

◆亲和性标签抗体结合琼脂糖珠

可确认比A公司产品具有同等甚至以上的抗原回收性能！！

＜使用载体量＞
抗DYKDDDDK标签抗体琼脂糖珠(Wako): 20 μL / assay
A社 Affinity Beads: 20 μL /assay
＜抗原添加量＞
含DYKDDDDK标签融合蛋白的大肠杆菌细胞溶解液20 mg/assay
＜免疫沉淀条件＞
4℃、3 小时
＜洗脱方法＞
150 μg/mL DYKDDDDK肽 (产品编号：044-30951) 20 μL /assay
→ 4℃、孵化30 分钟
添加20 μL / assay 的2%SDS sample buffer → 煮沸5分钟。

＜SDS-PAGE＞
样品电泳量：10 μL
＜检测方法＞
银染法
配制可过量表达DYKDDDDK标签融合蛋白（约19 kDa）的大肠杆菌裂解液，分别用本产品和A公司产品免疫沉淀后，用DYKDDDDK肽进行抗原洗脱。将得到的抗原样品用SDS-PAGE分离、银染色后，比较抗原回收率。

产品名称	子类克隆号	规格	产品编号	包装
DYK标签：DYKDDDK
抗DYKDDDDK标签抗体琼脂糖珠 Anti DYKDDDDK tag Antibody Beads	小鼠IgG_2b 1E6	免疫化学用	012-22781	2 mL(Net 1 mL)
			018-22783	10 mL(Net 5 mL)
			016-22784	50 mL(Net 25 mL)
识别N端、C端、Internal的DYKDDDDK标签使用载体：4%琼脂糖溶液组成：1×PBS (pH 7.4), 50 w/v% glycerol, 0.02 w/v% sodium azide 抗体结合量：7.5 mg/mL 结合容量：1mL本产品可结合约1.0 mg的DYKDDDDK标签融合蛋白。
His标签：HHHHHH（6×Histidine）
抗6×组氨酸抗体琼脂糖珠 Anti 6×Histidine Antibody Beads	小鼠IgG₃・κ 28-75	免疫化学用	019-23391	2 mL(Net 1 mL)
			015-23393	10 mL(Net 5 mL)
可识别N端、C端的6×His tag 使用载体：4%琼脂糖溶液组成：1×TBS (pH 7.4), 0.05 w/v％ sodium azide 抗体结合量：2.0 mg/mL 结合容量：1 mL本产品可结合约1.0～2.0 mg的6×His标签融合蛋白
HA tag：YPYDVPDYA
抗HA抗体琼脂糖珠 Anti HA Antibody Beads	小鼠IgG₁ 4B2	免疫化学用	014-23081	2 mL(Net 1 mL)
			010-23083	10 mL(Net 5 mL)
使用载体：4%　琼脂糖溶液组成：1×PBS (pH 7.4), 50％ glycerol, 0.02 w/v％ sodium azide 抗体结合量：8.5 mg/mL 结合容量：1 mL本品可结合约1.5 mg的HA标签融合蛋白
c-My标签：EQKLISEEDL
抗c-Myc抗体琼脂糖珠 Anti c-Myc Antibody Beads (10D11)	小鼠IgG₁ 10D11	免疫化学用	010-26501	200 μL (Net 100 μL)
			016-26503	2 mL(Net 1 mL)
			014-26504	10 mL(Net 5 mL)
使用担体：4%　琼脂糖溶液组成：1×PBS (pH 7.4), 50％ glycerol, 0.02w/v％ sodium azide 抗体结合量：7.5mg/mL 结合容量：1mL本产品可结合约0.9 mg的c-Myc tag融合蛋白
V5 tag：GKPIPNPLLGLDST
抗V5 tag抗体琼脂糖珠 Anti V5 tag Antibody Beads	小鼠IgG₁ 10B5	免疫化学用	016-24381	2 mL(Net 1mL)
			012-24383	10 mL(Net 5mL)
使用载体：4%琼脂糖溶液组成：1×PBS (pH 7.4), 50％ glycerol, 0.02w/v％ sodium azide 抗体结合量：7 mg/mL 结合容量：1 mL本产品可结合约0.5 mg的V5标签融合蛋白

◆相关产品

内参照

下表为Western Blot实验中参照用单抗一览表。

产品名称	规格	产品编号	包装
抗β肌动蛋白单抗 Anti β-Actin, Monoclonal Antibody	免疫化学用	013-24553	200 μg
		011-24554	1 mg
		017-24556	5 mg
抗β肌动蛋白单抗,过氧化物酶标记 Anti β-Actin, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated	免疫化学用	017-24573	200 μL
抗α-微管蛋白, 单抗 Anti α-Tubulin, Monoclonal Antibody	免疫化学用	011-25034	10 μg
		017-25031	200 μg
		013-25033	1 mg
Anti β-Tubulin, Monoclonal Antibody 抗β-微管蛋白, 单抗	免疫化学用	018-25044	10 μg
		014-25041	200 μg
		010-25043	1 mg
Anti GAPDH, Monoclonal Antibody 抗GAPDH, 单抗	免疫化学用	016-25523	200 μg
		014-25524	1 mg
		010-25526	5 mg
Anti GAPDH, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated 抗GAPDH, 单抗, 过氧化酶结合	免疫化学用	015-25473	200 μL

蛋白酶抑制剂系列

产品名称	规格	产品编号	包装
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 I，无动物源成分（通用型） Protease Inhibitor Cocktail Set I, Animal-derived-free (for general use) (×100), Lyophilized	通用型	165-26021	1 mL用
	通用型	161-26023	1 mL用×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒III, DMSO溶液（不含EDTA）（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set III, DMSO Solution (EDTA free) (×100)	动物细胞	163-26061	1 mL
	动物细胞	169-26063	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒V （无EDTA）（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set V (EDTA free) (×100), Lyophilized	2D电泳	162-26031	1 mL
	2D电泳	168-26033	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 VI，DMSO溶液，用于植物（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set VI, DMSO Solution (for Plant) (×100)	植物细胞	164-26091	1 mL
	植物细胞	160-26093	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒VII，DMSO溶液，组氨酸标签蛋白（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set VII, DMSO Solution (for Histidine-tagged Protein) (×100)	His Tag 纯化^※	167-26101	1 mL
	His Tag 纯化^※	163-26103	1 mL×5

亲和标签比较表

亲和标签	TARGET	PA	6xHis
氨基酸序列	(YPGQ)5V	GVAMPGAEDDVV	HHHHHH
残基数	21	12	6
分子量 (kDa)	2.34	1.16	0.84
等电点（pI）	5.52	3.49	7.21
配体	TARGET tag	PA tag	Ni, Co, Zn, Cu
亲和珠回收	40% Propyleneglycol, 1×TBS(pH7.5)	3M MgCl₂, MES(pH6.0)	0.5M Imididazole(pH7.4)
单抗边界强度（KD（M））	1.0×10-8	4.9×10-10	Ni-NTA: 1.0×10-5～-6
单抗 Clone No.	P20.1(Mouse)	NZ-1(Rat)	Merck:HIS. H8(Mouse)
亲和力	++++	+++++	+++
提纯成本	+	+	+
多肽洗脱	+++	+++	Imidazole
背景（培养上清）	+	+	+++++
背景（细胞裂解物）	+	+	++++

亲和标签	DYKDDDDK	c-Myc	HA	GST
氨基酸序列	DYKDDDDK	EQKLISEEDL	YPYDVPDYA	-
残基数	8	10	9	218
分子量 (kDa)	1.01	1.20	1.10	26
等电点（pI）	3.97	4.00	3.56	-
配体	DYKDDDDK tag	c-Myc tag	HA tag	GST
亲和珠回收	Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)	Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)	Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)	Glutathione, Tris-HCl, Glycine Buffer(pH2～3.5)
单抗边界强度（KD（M））	2.8×10-8	2.2×10-9	2.8×10-9	Glutathione: 1.0×10-5～-6
单抗 Clone No.	M2(Mouse)	9E10(Mouse)	3F10(Mouse) HA-7(Rat)	Wako:5A7(Mouse)
亲和力	++++	++++	++++	++++
提纯成本	++	++	++	+
多肽洗脱	+++	++	++	Glutathione
背景（培养上清）	++++	+++	+++	++++
背景（细胞裂解物）	++++	++++	+++	++++

　　本比较表为Wako独家调查的数据。样品、检测方法和手法的不同，特异性也会有所变化，因此无法保证各个亲和标签的功能。

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

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