PA tag
亲和纯化标签蛋白!
PA tag 系统是利用高亲和性&高特异性单抗(NE-1)识别肽标签(GVAMPGAEDDVV)的重组蛋白新型检测系统。PA tag 系统中的抗体琼脂糖可通过免疫沉淀法纯化 PA tag 融合蛋白,并可在洗涤后获得再生。中性 pH 条件下 PA tag 肽简单方便地竞争性洗脱 PA tag 融合蛋白。
PA tag 系统的亲和性和特异性优于现有标签系统,抗体琼脂糖可再生 60 次,极大地降低成本,可用于免疫细胞化学、免疫印迹和流式细胞术,是动物宿主细胞重组蛋白生产的有效工具。
◆原理
◆载体列表
产品名称(载体名称) | 抗性 | 规格 | 产品编号 | |
大肠杆菌抗性 | 真核细胞抗性 | |||
pCAG-Ble PA tag-C | 20 μg | |||
pCAG-Ble PA tag-N Signal Plus | 20 μg | |||
pCAG-Bsd PA tag-C | 20 μg | |||
pCAG-Bsd PA tag-N Signal Plus | 20 μg | |||
pCAG-Hyg PA tag-C | 20 μg | |||
pCAG-Hyg PA tag-N Signal Plus | 20 μg | |||
pCAG-Neo PA tag-C | 20 μg | |||
pCAG-Neo PA tag-N Signal Plus | 20 μg |
◆优点、特色
◆案例、应用
【使用例子:PA 标签抗体,大鼠单克隆抗体(NZ-1)】
NZ-1 是特异性识别 PA tag(GVAMPGAEDDVV)的单克隆抗体,能用于检测动物细胞表达的 PA tag 融合蛋白,亲和性很高并能简单地用肽洗脱!已确认不存在交叉反应的物种包括小鼠、大鼠、仓鼠和犬类。
浓度: 标签表示(约1.0 mg/mL)
配方: 1× PBS(pH 7.5)水溶液
克隆号: NZ-1
亚型: IgG2a
应用: 免疫印迹 0.01 – 1 μg/mL
免疫沉淀 10 – 50 μg/assay
流式细胞术 0.1 – 10 μg/mL
免疫细胞化学 0.1 – 10 μg/mL
保存条件:2–10°C 避免反复冻融
【NZ-1 Fab和PA肽的复合体结构分析】
亲和标签比较
亲和标签 | TARGET | PA | 6 x His | c-Mys | HA | GST |
序列 | (YPGQ)5V | GVAMPGAEDDVV | HHHHHH | EQKLISEEDL | YPYDVPDYA | - |
残基数 | 21 | 12 | 6 | 10 | 9 | 218 |
分子量(kDa) | 2.34 | 1.16 | 0.84 | 2.34 | 1.16 | 0.84 |
配位子 | TARGET tag | PA tag | Ni, Co, Zn, Cu | c-Myc tag | HA tag | GST |
抗体琼脂糖的 再利用 | 最高可再生循环利用40次 | 最高可再生循环利用60次 | 不可再生 | 不可再生 | 不可再生 | 不可再生 |
重组蛋白 纯化成本 | + | + | + | ++ | ++ | + |
单克隆抗体结合力(KD(M))(数字越小,亲和力越高) | 1.0x10-8 | 4.9x10-10 | Ni-NTA: 1.0x10-5~6 | 2.2x10-9 | 2.8x10-9 | Glutathione: 1.0x10-5~6 |
亲和性 | ++++ | +++++ | +++ | ++++ | ++++ | ++++ |
和动物细胞外(培养基)的蛋白非特异性结合 | + | + | +++++ | +++ | +++ | ++++ |
和动物细胞内蛋白的非特异性结合 | + | + | ++++ | ++++ | +++ | ++++ |
肽洗脱 | +++ | +++ | 咪唑洗脱 | ++ | ++ | 谷胱甘肽洗脱 |
本比较表由富士胶片和光独立完成。样品、检测方法及手法不同有可能产生的特异性有变化,不能保证各种亲和标签的性能。
Target tag 系统和 Pa tag 系统同属Wako亲和标签系统,详情请联系经销商。
Wako新一代超亲和性的亲和标签系统“PA Tag System”:http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/resources/show/14.html
1. Fujii, Y. et al., "PA tag: A versatile protein tagging system using a super high affinity antibody against a dodecapeptide
derived from human podoplanin.", Protein Exp. Purif., 95, 240-247(2014).
2. Fujii, Y. et al. 新規アフィニティータグシステム“PAタグ”の利用法~蛋白質の精製および検出~蛋白質科学会アーカイブ, 7,e075
(2014)
3. Kitago,Y et al.“ Structural basis for amyloidogenic peptide recognition by sorLA.”Nat Struct Mol Biol., 22(3):199-206(2015)
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
161-26861 | pCAG-Ble PA tag-C pCAG-Ble PA 标签-C |
20 μg | for Genetic Research | - |
168-26871 | pCAG-Ble PA tag-N Signal Plus pCAG-Ble PA 标签-N 信号 增加型 |
20 μg | for Genetic Research | - |
165-26881 | pCAG-Bsd PA tag-C pCAG-Bsd PA 标签-C |
20 μg | for Genetic Research | - |
162-26891 | pCAG-Bsd PA tag-N Signal Plus pCAG-Bsd PA 标签-N 信号 增加型 |
20 μg | for Genetic Research | - |
165-26901 | pCAG-Hyg PA tag-C pCAG-Neo PA 标签-C |
2 0μg | for Genetic Research | - |
162-26911 | pCAG-Hyg PA tag-N Signal Plus pCAG-Hyg PA 标签-N 信号 增加型 |
20 μg | for Genetic Research | - |
169-26921 | pCAG-Neo PA tag-C pCAG-Neo PA 标签-C |
20 μg | for Genetic Research | - |
166-26931 | pCAG-Neo PA tag-N Signal Plus pCAG-Neo PA 标签-N 信号 增加型 |
20 μg | for Genetic Research | - |
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