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NK 细胞抑制剂
Anti Asialo GM1(Anti AsGM1)

NK细胞抑制剂wako

Anti Asialo GM1(Anti AsGM1)



糖脂神经节苷脂GM1(ASGM1)在感染病毒时的T细胞及自然杀伤(NK)细胞中表达。ASGM1局部存在于NK和CD8(+)细胞的脂筏结构中,抗Asialo- GM1抗体可降低在各种小鼠、大鼠中的NK细胞活性。

接种抗Asialo-GM1抗体至实验动物,去除NK细胞,用于NK细胞的功能分析或移植其他物种来源的肿瘤组织至小鼠体内1)2)

ASGM1也在嗜碱性细胞中表达,有报告称,抗Asia-GM1抗体也可用于去除嗜碱性细胞3)


■ 参考文献


1)

Kasai M., Iwamori M., Nagai Y., Okumura K., and Tada T. : J. Immunol., 10, 175 (1980).

2)

Habu S., Fukui H., Shimamura M., Kasai M., Nagai Y., Okumura K., and Tamaoki N. : J. Immunol., 127, 34 (1981).

3)

Hideto, N., Kaori, M., Yohei, K., Yoshiyuki, M., and Hajime K., .: J. Immunol., 186, 10, 5766(2011)



原理介绍


   Anti Asialo-GM1(Rabbit)抗血清可以减少大鼠或者小鼠来源的自然杀伤细胞(NK 细胞)的活性。该抗体可以与 NK 细胞发生特异性结合,从而抑制 NK 细胞非特异性杀伤靶细胞的活性。NK 细胞是一种免疫监视细胞,其靶细胞包括肿瘤细胞、同种异体移植的器官、组织等。可运用于药物筛选,器官移植,自身免疫疾病等研究。

  每个产品有具体的体内外的滴定数据。



◆特点


● 已经体内NK细胞活性验证

● 众多文献应用案例


 特性

 抗Asialo-GM1抗体、冻干品

 免疫方法

 牛脑组织纯化的Asialo-GM1甲基化BSA(bovine   serum albumin),与FCA(Freund’s complete adjuvant)

 同时对兔免疫。

 纯化方法

 50%硫酸铵盐化后,使用含有磷酸缓冲液(pH=7.2)的生理盐水透析。

 特异性

 与小鼠、大鼠的NK细胞以及小鼠胚胎胸腺细胞反应。

 复溶

 请在1 mL蒸馏水中复溶。建议使用磷酸缓冲液(pH 7.2)进行稀释。

 接种方法

 一只小鼠静脉注射10~50 μL。



◆注射方法


小鼠-静脉注射:

10-50 μL(推荐 20 μL)具体剂量由滴度和规格而定。第一次注射在4天内有效,因此两周内需要注射3-4次。

大鼠-静脉注射:

50-250 μL(小鼠剂量的4或5倍)具体剂量还须考虑大鼠的健康状况、体重和 NK 活性。

小鼠和大鼠-腹腔给药:

同等剂量或多于静脉注射。


产品信息


 

制备:

 

从牛脑组织里提纯的 Asialo-GM1 与甲基化牛血清白蛋白和弗氏完全佐剂一起使用,可进行反复免疫。用含有磷酸缓冲盐水(ph7.2)的 50% 硫酸铵透析后,得到血清里的丙种球蛋白(Gammaglobulin)片段。

内容:

含有唾液酸抗体 GM1 的兔血清 50% 硫酸铵盐析分层物(含蛋白量约 10 mg/mL)。

提纯法:

50% 的硫酸铵盐析后 ,用含有磷酸缓冲液的生理盐水透析,然后冻干。

特异性:

作用于小鼠和大鼠的自然杀伤细胞;小鼠单核细胞(是一种不含自然杀伤细胞、骨髓、胎儿肝细胞和裸鼠脾脏巨噬细胞的肝细胞);小鼠胎儿胸腺细胞(12日龄;生存率不断降低直到没有出现新生小鼠)(备注:如果浓度高,也能作用于成熟的T淋巴细胞)

免疫球蛋白类型:

IgG、IgA 和 IgM

重悬:

建议用蒸馏水(1 mL)。由于该产品是使用盐来进行冻干的,如果用其它溶剂如 PBS 或 MEM,则会增加其盐浓度,影响该产品作用效果。

抗体滴度:

通过免疫凝聚实验得出结果,抗体滴度比例约 1 : 1,000

保存方法:

存储在2~10℃下

包装规格:

1mL样瓶

形状:

干冻品


014-09801(986-10001)

 

 欲了解详情请看相关资料


应用案例

 

 适用的动物模型

 运用

 肿瘤动物模型

 与抗肿瘤药物混合后注入肿瘤动物模型内,研究抗肿瘤药物的作用机理。

 肝纤维化动物模型

 与治疗肝纤维化的药物混合后注入动物模型体内,研究抗肝纤维化药物的作用机理。

 器官移植动物模型

 器官移植后,会产生免疫排斥反应,机体内的免疫监视会清除”异己“的细胞和器官。

 可用于研究器官移植后使用的免疫抑制剂的作用机理。

 自身免疫疾病动物模型

 研究治疗自身免疫疾病药物的作用机理。

 干细胞动物模型

 抑制NK细胞的活性,从而有利于干细胞动物模型的建立。

 糖尿病动物模型

 研究炎症与糖尿病的关系。



◆抗Asialo-GM1抗体体外活性


向抗Asialo-GM1抗体中添加豚鼠来源补体,并在BALB/c小鼠的胰腺细胞中进行处理。通过靶向YAC-1细胞(●)体外检测NK活性。

效应子/靶标的比率为50:1,○表示补体处理后BALB/c小鼠胰腺细胞的NK活性。

※ BALB/c小鼠经聚(I:C)钠盐100 μg(0.2 mL的500 μg/ mL)处理后,正常饲养18小时后开始下一步操作。



00923_img01.jpg



◆抗Asialo GM1抗体体内活性


向BALB/c小鼠腹腔内注射抗Asialo-GM1抗体,并检测单次给药(效应子/靶标= 50:1)3天后收集的胰腺细胞对YAC-1细胞的肿瘤溶解度。

※ BALB/c小鼠经聚(I:C)钠盐100 μg(0.2 mL的500 μg/ mL)处理后,正常饲养18小时后开始下一步操作。



■ 对照:正常兔血清


腹腔注射量

肿瘤溶解度(%)

100 μL

70.8



■ 抗Asialo-GM1抗体


腹腔注射量

肿瘤溶解度(%)

10 μL

7

25 μL

8.4

50 μL

2

100 μL

0



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[1]

Nishikado H, Mukai K, Kawano Y, et al. NK cell-depletinganti-asialo GM1 antibody exhibits a lethal off-target effect on basophils invivo[J]. The Journal of Immunology, 2011, 186(10): 5766-5771.


[2]

Kasai, M., Iwamori, M., Nagai, Y., Okumura, K. and Tada, T.: Eur. J. Immunol., 10, 175 (1980)


[3]

Habu, S., Fukui, H., Shimamura, M., Kasai, M., Nagai, Y., Okumura, K. and Tamaoki, N.: Immunol., 127, 34 (1981)


[4]

Jinxing Xia et al., Clinica l Immunology.(2010) 134, 130–139.


[5]

Eirini Christaki et al., Journal of Immunology Research, Volume 2015 (2015), Article ID 532717, 10 pages.


[6]

Hata R et al.,Scientific Reports(2015) 5 : 9083 | DOI: 10.1038/srep09083


[7]

Ivanova, D. L., Denton, S. L., & Gigley, J. (2019). Anti-Asialo GM1 treatment during secondary Toxoplasma gondii infection is lethal and depletes T cells. bioRxiv, 550608.


[8]

Sung, C. C., Horng, J. H., Siao, S. H., Chyuan, I. T., Tsai, H. F., Chen, P. J., & Hsu, P. N. (2020). Asialo GM1-positive liver-resident CD8 T cells that express CD44 and LFA-1 are essential for immune clearance of hepatitis B virus. Cellular & Molecular Immunology, 1-11.


[9]

Fujii, Y., Gerdol, M., Kawsar, S. M., Hasan, I., Spazzali, F., Yoshida, T., ... & Sugawara, S.

(2019). A GM1b/asialo‐GM1 oligosaccharide‐binding R‐type lectin from purplish bifurcate mussels Mytilisepta virgata and its effect on MAP kinases. The FEBS journal.


[10]

Kikuchi, N., Ye, J., Hirakawa, J., & Kawashima, H. (2019). Forced expression of CXCL10

prevents liver metastasis of colon carcinoma cells by the recruitment of natural killer cells. Biological and Pharmaceutical Bulletin, 42(1), 57-65. 


[11]

Jones, N. M., Yang, H., Zhang, Q., Morales-Tirado, V. M., & Grossniklaus, H. E. (2019). Natural killer cells and pigment epithelial-derived factor control the infiltrative and nodular growth of hepatic metastases in an Orthotopic murine model of ocular melanoma. BMC cancer, 19(1), 484. 


[12]

Vandenhaute, J., Avau, A., Filtjens, J., Malengier-Devlies, B., Imbrechts, M., Van den Berghe, N., ...& Wouters, C. (2019). Regulatory Role for NK Cells in a Mouse Model of Systemic Juvenile Idiopathic Arthritis. The Journal of Immunology, 203(12), 3339-3348.


[13]

Junqueira-Kipnis, A. P., Trentini, M. M., Marques Neto, L. M., & Kipnis, A. (2020). Live

Vaccines Have Different NK Cells and Neutrophils Requirements for the Development of a Protective Immune Response Against Tuberculosis. Frontiers in Immunology, 11, 741. 


[14]

Murer, P., Kiefer, J. D., Plüss, L., Matasci, M., Blümich, S. L., Stringhini, M., & Neri, D. (2019). Targeted delivery of TNF potentiates the antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity of an anti-melanoma immunoglobulin. Journal of Investigative Dermatology, 139(6), 1339-1348.


[15]

Turaj, A. H., Dahal, L. N., Beers, S. A., Cragg, M. S., & Lim, S. H. (2017). TLR-3/9 Agonists

Synergize with Anti-ErbB2 mAb. Cancer research, 77(12), 3376-3378.


[16]

Sorski, L., Melamed, R., Matzner, P., Lavon, H., Shaashua, L., Rosenne, E., & Ben-Eliyahu, S. (2016). Reducing liver metastases of colon cancer in the context of extensive and minor surgeries through β-adrenoceptors blockade and COX2 inhibition. Brain, behavior, and immunity, 58, 91-98.



◆其他文献


本公司的抗Asialo-GM1抗体在以下为代表的各种文献中均有应用案例。


1. 

Hudson, W. A., Li, Q., Le, C., and Kersey, J. H., : Leukemia12, 2029 (1998).


2. 

Murphy W. J., Durum S. K., Longo D. L., : PNAS, 89, 10, 4481 (1992).


3. 

Bentzmann S., Roger P., Dupuit F., Bajolet-Laudinat O., Fuchey C., Plotkowski C. M., Puchelle E. : Infection and immunity64, 5, 1582 (1996).


4. 

Nishikado H., Mukai K., Kawano Y., Minegishi Y., Karasuyama H. : J. Immunol., 186, 10, 5766(2011).


5. 

Victorino, F., Sojka, K. D., Brodsky, S. K. McNamee, N. E., Masterson, C. J., Homann, D., Yokoyama, M. W., Eltzschig, K. H., Clambey, T. E., : J. Immunol., 195, 10, 4973(2015).



产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
014-09801 Anti asialo GM1 (Rabbit) 
NK细胞抑制剂
1 mL for Immunochemistry -

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