细胞死亡 M65 EpiDeath® ELISA 试剂盒
M65 EpiDeath® ELISA
◆原理
M65 EpiDeath® ELISA 检测新一代生物标记物角蛋白18。检测细胞培养上清,血清和血浆样品中可溶性的角蛋白18。 K18 的含量反应了所有上皮细胞的死亡情况,不管是由于凋亡还是坏死引起的死亡都可以检测到。
◆优点・特色
● 只特异性定量检测上皮细胞整体的死亡情况
● 检测更稳定,特异性更高。
● 夹心法 ELISA 检测,可拆卸的96孔板。试剂即开即用
● 肝脏疾病:检测肝脏疾病患者肝细胞总的死亡情况。可用肝脏疾病检测。
● 肿瘤:监测上皮细胞肿瘤经化疗后肿瘤细胞的死亡情况。
● 毒理学:临床评估不同药物对肝脏细胞的毒性。
细胞凋亡或者坏死引起细胞死亡。细胞死亡的模式取决于刺激的类型 (比如:细胞毒素和化疗后的肿瘤,或者肝脏损伤)和组织类型(比如:肿瘤)。M30 Apoptosense ELISA 和 M65 EpiDeath ELISA 配套使用不仅定量检测细胞死亡的数量,而且确定细胞死亡的模式。(凋亡或者坏死)(样品包括血清,血浆和细胞培养上清)
肿瘤中使用的细胞毒素会尽量克服细胞凋亡过程中的紊乱状态,刺激细胞发生凋亡。不同的肿瘤细胞和细胞毒素也会引起细胞坏死。细胞内 ATP 产生缺失通常会引起细胞凋亡,但有时候也会导致细胞坏死(Leist et al., 1997)。
肝脏损伤可能会引起肝细胞的死亡– 凋亡和坏死均可导致。有报道称细胞死亡模式的确定可用于不同肝脏疾病的临床诊断,预判和评估治疗效果(Volkmann et al., 2006)。角蛋白18(K18)是由很多种上皮细胞高表达的细胞内蛋白。大多数 K18 分子在细胞内是非可溶性的,但也报道有可溶性K18池(Chou et al., 1993)。细胞死亡期间,细胞内 K18 会释放到细胞外。检测细胞外可溶性的 K18 可反映上皮细胞的死亡情况 “过程和原因”(由细胞凋亡和细胞坏死引起)(Kramer et al., 2004)。K18 在细胞凋亡期间被 caspase 催化发生水解, caspase-cleaved 片段释放到细胞外。因此细胞外的 caspase-cleaved K18(ccK18)浓度反映了细胞凋亡的数量。而且 M30:M65 比代表了总细胞死亡中细胞凋亡的比例(Kramer et al., 2004)。
M65 EpiDeath® ELISA 使用两种 IgG 型的 K18 小鼠单抗,评估人血清或则血浆中上皮细胞死亡情况。M30 Apoptosense® ELISA 特异性检测在 caspase-cleavage d K18 在 Asp396 形成的新表位(K18Asp396-NE 或者 M30 neo-epitope),反映上皮细胞的凋亡情况(Hägg et al. 2002; Bivén et al. 2003)。两种检测试剂盒的单位根据统一标准校对过,可以计算 caspase-cleaved 和总 K18 (“M30:M65 比例”)。培养细胞诱导细胞凋亡导致 caspase-cleaved K18 释放,M30:M65 比值较高, 然而如果细胞发生死亡,只有 K18 的水平是升高的,所以 M30:M65 比值较低M65 EpiDeath® ELISA 和 M65® ELISA 的区别,请参考相关资料。
M65 EpiDeath® ELISA 是 M65® ELISA 的升级版,用于患者血清/血浆或细胞培养样品中总 CK18 的测定。
特异性 | 人 |
样品类型 | 人血清或血浆、人细胞系的培养上清液或裂解液 |
灵敏度 | 25 U/L |
范围 | 0–5,000 U/L |
检测目标物 | 可溶性 CK18 |
特点 | 可进行定量检测;试剂盒包含两个阳性对照;预铺 ELISA 板,即用试剂,操作方便;可用于自动化 |
稀释线性 | 用 M65 EpiDeath Standard A 稀释,平均值是 95%(范围 88-101%);用血清释,平均值是 93%(范围82-101%) |
M65 EpiDeath® ELISA 与 M65® ELISA 使用相同的单抗。为了与 M30 Apoptosense® ELISA 匹配, 使用单抗 M5 作为捕获抗体(在 M65® ELISA 使用单抗 M6)。
●M65 EpiDeath® ELISA 可以更好的区分健康人群和病患(患有导致循环角蛋白18(K18)增加的疾病)。这是由于该试剂盒中的抗体有更好的结合特异性,在健康人群中检测到的值更低
●M65 EpiDeath® ELISA 和 M65® ELISA 检测含有 K18 的病患样品,检测值差不多(见图中提供的资料,相关性系数 r² = 0,84)。这些检测的主要区别是用 M65® ELISA检测,检测值在200 – 300 U/L范围内的样品用 M65 EpiDeath® ELISA 检测,检测值<100 U/L 。
●由于 M65 EpiDeath® 和M65® ELISA检测同一样品,检测值不一样,所以如果是特定的实验/项目,只能使用其中一种试剂盒。
●M65 EpiDeath® 的检测范围是 0~5000 U/L, M65® ELISA的检测范围是 125~2000 U/L。
M65 EpiDeath® ELISA和 M30 Apoptosense® ELISA 使用相同的捕获抗体,使用 M30 Apoptosense® 和 M65 EpiDeath® ELISA 检测 “M30:M65 比”(见 Kramer et al., 2004)希望反应细胞死亡形式。有些案例中,用 M30 Apoptosense® ELISA检测,样品的值高于用 M65 EpiDeath® ELISA 检测, 可能反应了表位如何在复合体中递呈。
注意:“M30:M65 比” 只有在 K18 含量提升的样品(比如,用 M65 EpiDeath® ELISA 检测,值>300 U/L )有意义。(见 Linder et al., Expert Reviews in Molecular Diagnostics 10, 353, 2010).
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10040 | M65 EpiDeath® ELISA 细胞死亡M65 EpiDeath ® ELISA试剂盒 |
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