ISOPLANT
DNA 快速提取试剂(植物/酶/细菌)
ISOPLANT 是一种可以迅速地从植物・酶・细菌提取 DNA 的试剂盒。
利用其主要成分氯化苄,破坏细胞壁、细胞膜及核膜,在表面活性剂的作用下,使其溶解,尤其是植物样品,无需捣碎即可提取 DNA。此试剂盒便于处理多个样品。从双子叶植物及单子叶植物提取 DNA 时,无需进行预处理。提取到的 DNA 可用于 PCR 及限制性内切酶反应。
◆特点
• 迅速地从植物・酶・细菌提取基因组 DNA
• 无需使用臼等工具捣碎材料,便于处理多个样品
• 从双子叶植物及单子叶植物提取 DNA 时,无需进行预处理
◆产品列表
保存方法
冷藏保存(2~10°C)
若长时间不使用 RNase A,请冷冻保存(-20°C)。除了 RNase A ,其他可以室温保存。
ISOPLANT (20次、100次) | |||
组成 | 容量 (20次) | 容量 (100次) | 备注 |
Solution I Extraction Buffer | 6 mL × 1 | 30 mL × 1 | 可能析出白色沉淀,但不影响品质。请进行37°C左右的水浴,待结晶完全溶解后即可放心使用。 |
Solution II Lysis Buffer | 3 mL × 1 | 15 mL × 1 | 主要成分是氯化苄。氯化苄为危险品,请小心使用。 |
Solution III Sodium Acetate | 3 mL × 1 | 15 mL × 1 | - |
TE(pH8.0) | 2 mL × 1 | 10 mL × 1 | 10 mMTris-HCl(pH8.0), 1 mM EDTA |
RNase A (1 mg/mL) | 20 µL × 1 | 100 µL × 1 | 若长时间不使用RNase A,请冷冻保存(-20°C)。 |
◆使用实例
操作步骤
* 若材料为植物,0.01 ~ 0.1 g 材料用剪刀剪取得到3-5 mm小块。根据植物种类,体积有所不同。添加 Solution II 时,使材料完全浸泡于下层溶液(Solution II)。此外,尽量使用新鲜材料。冻结保存试剂过长会导致回收率下降。若材料为酶、细菌,使用 1.5 mL culture 离心后得到的沉淀(~ 0.03 g)。
实验数据
◆备注
• 本产品为实验研究用试剂。请勿用于医疗或其他用途。
• 不了解试剂基本知识的人士请不要使用。
Q:若使用 ISOPLANT 提取 DNA 効率较低,该如何改善?
A:请尝试如下方法。
Q:使用植物材料时,即使添加了 Solution II,材料的形态还是没有发生改变。为什么会出现这种情况?
A:按照一般步骤进行处理时,肉眼无法观察期形态变化。浸泡在 Solution II,长时间放置后,形态发生变化。但是最终提取到的 DNA 溶液中
杂质会增多。
Q:使用果树等较硬的叶子时,按照一般的步骤进行操作后,DNA 的回收量较少。该怎样解决?
A:可事前使用液态氮冻结材料,然后将其粉碎。
Q:可以从动物组织、细胞分离 DNA 吗?
A:该产品不适用。但是实验证明,可以从虾提取 DNA。目前,,已经过实验证明,使用本试剂盒可以提取出 DNA 的材料有植物、细菌、酵
母菌、霉等。
(请参考上述实验数据)
参考文献
[ 1 ] Anil K. Jhingan, Methods in Molecular and Cellular Biology, 3, 15(1992)
[ 2 ] HengZho, Nucleic Acids Research, 21(22), 5279(1993)
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